肿瘤局部免疫反应特性的原位研究

肿瘤如何逃避宿主的免疫监视机制一直是国内外研究的热点。鉴于肿瘤局部是免疫系统与肿瘤相互作用的主要部位,淋巴细胞及巨噬细胞是主要的效应细胞.近10年来,我们对一大组人体肿瘤标本,使用免疫组化,免疫电镜,细胞培养及功能检测,原位杂交技术对肿瘤浸润淋巴细胞的组成及功能特性进行了分析。

c－myc蛋白的分子作用机制研究进展

ｃ－ｍｙｃ蛋白是一种真核转录调节因子，其作用是通过由ｍａｘ、ｍａｄ、ｍｘｉ１等ｂＨＬＨＺＩＰ蛋白家族新成员以及其它相关蛋白构成的网络系统实现的。这一网络系统的平衡与紊乱和细胞的增殖、分化以及恶变有密切关系。

胃肠癌的MG_7抗原表达及其免疫生物学

应用免疫组化技术对62例胃肠癌的MG_7,抗原表达和局部免疫应答状态进行了分析。结果发现:MG_7抗原的检出率在胃癌为80.77%(21/26例),结直肠癌为94.44%(34/36例),淋巴结转移癌为93.33%(14/15例)。除2例癌旁非典型增生粘膜上皮呈弱阳性外,其余正常。良性病变粘膜上皮均为阴性。而且MG_7抗原表达强度与肿瘤恶性程度呈正相关,与局部浸润单个核细胞亚群(MNC_s)的密度有一定相关。提示瘤细胞的MG_7抗原可能参与了肿瘤的局部免疫应答。

粘连分子及其在病理学中的作用

粘连分子及其在病理学中的作用司履生，王一理细胞粘连分子（Ｃｅｌｌｕｌａｒａｄｔｅｓｉｏｎｍａｔｅｒｉａｌ，ＣＡＭ）是细胞一细胞、细胞一细胞外基质（ＥＣＭ）之间一大类粘连物质的总称。从名称看来，它似乎只是一类粘合物质。其实，它是维持多细胞生物体正常发育...

绞股蓝总皂甙对体外培养肺癌细胞的抑制作用

利用绞股蓝总皂甙(GP)对5株不同的体外培养实体癌细胞株增殖的影响,发现GP的抑瘤作用随细胞株来源不同有明显的差异。当GP浓度为1～10mg/L时,对肺癌细胞株A549、Calu 1、592/9的抑制作用明显强于宫颈癌Hela S_3及结肠腺癌Colo 205,而同样浓度的GP却能促进正常人的混合淋巴细胞反应。

人肿瘤组织中B7.1和MHC抗原表达及其意义

肿瘤免疫主要由细胞免疫介导，研究证实抗原特异性Ｔ细胞的活化需要共刺激信号的参与，缺乏共刺激信号将导致受抗原刺激的Ｔ细胞发生免疫无能，耐受甚至凋亡。Ｂ７．１是目前研究最多也是最重要的共刺激分子，已有的动物实验证明肿瘤细胞缺乏Ｂ７．１表达是其逃逸免疫监视...

子宫颈癌患者HPV16 E6,E7血清抗体检测

通过基因工程技术制备HPV16 E6,E7抗原,用免疫酶联吸附法检测了44例子宫颈癌病人和20例健康献血员血清HPV16 E6,E7抗体。结果表明,健康人血清HPV16 E6和HPV16 E7抗体阳性者分别占35％(7/20)和20％(4/20)。病人血清中,HPV16 E6抗体阳性率68.18％(30/44),但其反应滴度均值与健康人无显著差异。HPV16 E7抗体阳性率为58.18％(25/44),其阳性率及反应滴度均明显高于健康人。这提示,HPV16 E6抗体可能并非HPV16的型特异性抗体,而HPV16 E7抗体则有可能成为子宫颈癌发生的预报信号。

HPV16 L1／L2蛋白单克隆抗体的制备

用真核表达的ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白作为抗原，经免疫、融合、选择性培养、克隆化等过程，我们建立了两株抗ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白的杂交瘤细胞株（另有数株仍在建株中）。免疫斑点法检测证明，它们产生的抗体，只与ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白起反应，而不与ＨＰＶ１６Ｅ６、Ｅ７蛋白、人血清蛋白和牛血清蛋白起反应。另外，免疫组化试验证明，这种抗体可应用于临床ＨＰＶ１６感染的检验，具有敏感、特异、准确、快捷、经济的优点。

人乳头瘤病毒16 E6蛋白单克隆抗体的研制

运用杂交瘤技术，我们成功地建立了两株能稳定分泌小鼠抗人乳头瘤病毒１６Ｅ６蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。经鉴定单克隆抗体均属ＩｇＧ１ｋ。试验结果表明，所得单克隆抗体仅与ＨＰＶ１６Ｅ６融合蛋白反应，不与ＨＰＶ１６Ｅ７、Ｌ１、Ｌ２融合蛋白以及Ｌ１－Ｌ２真核表达蛋白反应，也只与Ｃａｓｋｉ细胞反应，不与Ｈｅｌａ细胞反应。初步结果说明，该抗体是ＨＰＶ１６Ｅ１６蛋白特异性的ＭｃＡｂ。

HPV16的自然变异及其生物学行为

长期以来，人们一直以为HPV是相当稳定的病毒，近年来发现其在自然界中存在着变异。不同地区、不同种族人群中HPV16变异不同，HPV16变异后明显影响其生物学行为。本文仅就HPV16变异及其生物学特性作一简单的综述。

肽核酸的研究进展

肽核酸的研究进展司履生寡核苷酸（Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）指人工合成的长度为十几至几十个碱基的ＤＮＡ或ＲＮＡ片段，是天然ＤＮＡ或ＲＮＡ的严格类似物，已经成为分子生物学实验室不可缺少的工具，在医学日常实践中可被用作诊断试剂，也可能用做药物，如反义...

共刺激分子在宫颈癌组织中的表达

目的 研究宫颈癌组织中癌细胞中的共刺激分子B7 1、B7 2、细胞间粘附因子 Ⅰ (ICAM 1)及主要组织相容性抗原 (MHC)Ⅰ、Ⅱ类分子表达 ,以揭示人体肿瘤的逃逸机制。方法 利用免疫组织化学技术 ,观察了42例人宫颈癌组织中B7 1、B7 2、ICAM 1的表达 ,观察了 36例MHCⅠ、Ⅱ类抗原的表达 ;利用原位杂交技术观察了 2 0例人宫颈癌组织中B7 1、B7 2和ICAM 1的mRNA表达。结果 在进行免疫组织化学检测的标本中 ,42例中有 2 2及 2 7例的癌组织癌细胞分别表达B7 1及ICAM 1分子 ,但无一例表达B7 2分子 ;所有癌组织及癌巢间质中均可见有程度不同的B7 1、B7 2和ICAM1阳性的树突状细胞及淋巴细胞浸润 ;37例中有 32例及 4例的癌细胞分别表达MHCⅠ和Ⅱ类抗原 ,癌巢及间质内有成团或散在的MHCⅡ阳性树突状细胞浸润 ,同一标本中MHCⅡ阳性树突状细胞的数量明显多于B7 1和B7 2阳性树突状细胞。在进行原位杂交的 2 0例标本中 ,有 11例和 15例的癌细胞分别表达B7 1和ICAM 1mRNA ,浸润的树突状细胞及淋巴细胞可见B7 1、B7 2和ICAM 1mRNA表达。结论 人宫颈癌的癌细胞确实表达与抗原提呈及刺激T细胞活化有关的分子 ,而且肿瘤组织中存在有职业性抗原提呈细胞浸润 。

宫颈癌中HPV16E6基因表达与p53蛋白积累

宫颈癌中ＨＰＶ１６Ｅ６基因表达与ｐ５３蛋白积累宋建明王一理司履生一、材料和方法５１例宫颈癌标本取自我室存档的福马林固定、包埋的蜡块，其中Ⅰ级６例、Ⅱ级４２例、Ⅲ级３例。１．聚合酶链反应：石蜡切片脱蜡，经一步消化法提取模板ＤＮＡ，ＨＰＶ１６Ｅ６引物对为...

逆转录-聚合酶链反应测定多药耐药基因

目的建立一个用于测定多药耐药基因(mdr_1)表达水平、反映临床耐药情况的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术。方法根据处于指数增长期的 PCR 产物量可反映最初摸板量多少的原理,以白血病为疾病模型,通过对最佳模板量及最佳循坏数的分析、参比对照的设定等,建立了^(35)S-dATP(~35硫-脱氧三磷酸腺苷)掺入的 RT-PCR 法,并以此法对19例临床白血病标本 mdr_1mR-NA(信使核糖核酸)表达水平进行了检测。结果 19例临床标本检测发现,6例化疗耐药或复发病例中,5例有高水平的 mdr_1mRNA 表达(mdr_1/β-actin:0.68～0.76)(β-actin:β肌动蛋白)。11例化疗完全缓解或部分缓解病例中,除2例有低水平 mdr_1mRNA 表达(mdr_1/β-actin:0.33、0.40)外,其余9例均为阴性。mdr_1mRNA 表达水平和临床化疗结果明显相关(P=0.017)。结论所建立的方法基本上可反映白血病患者化疗耐药情况,指导临床化疗。

pcDNA3/HPV16 E6真核表达质粒的构建及裸DNA注射动物实验观察

目的探讨ＨＰＶ１６Ｅ６基因ＤＮＡ诱发体液和细胞免疫反应的能力。方法利用基因工程技术构建了ＨＰＶ１６Ｅ６真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３／Ｅ６，脂质体法转染Ｃｏｓ７细胞，肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，免疫组化技术检测抗体产生及抗原表达。结果被转染的Ｃｏｓ７细胞表达ＨＰＶ１６Ｅ６蛋白免疫小鼠产生抗ＨＰＶ１６Ｅ６抗体。结论这一结果为ＨＰＶ１６相关宫颈癌治疗性ＤＮＡ疫苗的研制提供了资料。

逆转录－聚合酶链反应测定多药耐药基因

目的建立一个用于测定多药耐药基因（ｍｄｒ１）表达水平、反映临床耐药情况的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量技术。方法根据处于指数增长期的ＰＣＲ产物量可反映最初模板量多少的原理，以白血病为疾病模型，通过对最佳模板量及最佳循坏数的分析、参比对照的设定等，建立了３５Ｓ－ｄＡＴＰ（３５硫－脱氧三磷酸腺苷）掺入的ＲＴ－ＰＣＲ法，并以此法对１９例临床白血病标本ｍｄｒ１ｍＲ－ＮＡ（信使核糖核酸）表达水平进行了检测。结果１９例临床标本检测发现，６例化疗耐药或复发病例中，５例有高水平的ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达（ｍｄｒ１／β－ａｃｔｉｎ：０．６８～０．７６）（β－ａｃｔｉｎ：β肌动蛋白）。１１例化疗完全缓解或部分缓解病例中，除２例有低水平ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达（ｍｄｒ１／β－ａｃｔｉｎ：０．３３、０．４０）外，其余９例均为阴性。ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达水平和临床化疗结果明显相关（Ｐ＝０．０１７）。结论所建立的方法基本上可反映白血病患者化疗耐药情况，指导临床化疗。

共刺激分子B7.1在淋巴瘤组织中的表达

目的研究免疫共刺激分子Ｂ７．１在淋巴瘤组织中的表达及其在肿瘤免疫逃逸机制中的作用。方法利用ＲＴ－ＰＣＲ及原位杂交技术对１２例新鲜及２３例石蜡包埋淋巴瘤组织中Ｂ７．１的表达进行了检测。结果１０／１２例新鲜瘤组织及１６／２３例石蜡包埋瘤组织Ｂ７．１表达阳性，同时还意外发现，所有阳性标本中还强表达一种与正常Ｂ７．１分子不同但与其相关的ｍＲＮＡ转录子。