B7.1cDNA基因免疫抗移植瘤生长的实验研究

采用分子生物学、细胞生物学及病理学技术,研究B7.1cDNA基因免疫对移植瘤生长状况的影响。在实验中首先提取、纯化B7.1cDNA真核表达质粒,经鉴定证实后以其免疫小鼠。在免疫鼠背部皮下接种SP2/0细胞,观察移植瘤在实验鼠体内生长状况。结果见B7.1cDNA免疫组接种SP/0细胞后,肿瘤的发生率仅为8％,明显低于对照组(100％),且免疫组小鼠的肿瘤生长缓慢,小鼠存活时间延长,经统计学处理,其结果有显著性差异,提示B7.1cDNA基因免疫有明显的抗移植瘤生长作用。

免疫佐剂研究进展

佐剂是一类能够增强或调节特异性免疫反应的化合物，理想的佐剂不仅能增强免疫反应，更重要的是使宿主获得最适的保护性免疫。近年来合成人工多肽和重组ＤＮＡ技术的发展，推出了新一代的分子疫苗，使免疫反应的特异性更高，对免疫反应的调控更加准确。

白细胞介素6抗肿瘤作用的实验研究

用S180腹水瘤动物模型,经IL-6治疗后绝大多数肿瘤消退(8/10),且用同一肿瘤再次攻击不能生长,对照组中大多数小鼠因肿瘤进展而死亡(9/10).经S180肉瘤再次攻击的动物脾脏明显肿大,约为对照组的4倍以上,镜下观察脾脏白髓明显增生,牌中央动脉周围淋巴鞘明显增大,主要由大淋巴细胞及免疫母细胞构成,与薄层小淋巴细胞构成的边缘区分界明显,而脾小结的淋巴滤泡亦可见明显的生发中心.体外细胞毒测定显示:实验组脾细胞对S180靶细胞的杀伤作用明显高于对照组(907±318:387±144,P=0.003).对L929靶细胞的细胞毒亦是如此(1145±164:186±251,P<0.001).提示IL-6在活体内可激发荷瘤宿主对肿瘤的免疫反应.体外经IL-6处理的人PBL及人瘤靶细胞,亦明显增强效应细胞的杀伤活性.有趣的是这一现象主要是肿瘤细胞对效应细胞的杀伤敏感性增加,其机制可能是通过增强细胞间识别分子表达,诱发效应细胞对肿瘤的免疫应答来实现.

肿瘤浸润淋巴细胞和低剂量rhIL-2综合治疗进展期肿瘤的初步研究

对20例经手术切除的进展期肿瘤患者用活化的自身肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）和重组人白细胞介素－2（rhIL－2）治疗，并检测治疗前后细胞免疫变化。患者的PBL对同种异体相同组织学类型靶细胞的细胞毒性明显升高（P＜0．05），而对无关靶细胞的细胞毒性无明显变化（P＞0．05）；外周血淋巴细胞产生IL－2的能力均有明显的提高，从12．3U／ml到19．8U／ml（P＜0．01）；对植物血凝素（PHA）皮试反应性明显增强，反应直径从8．6mm升高到13．5mm（P＜0．01）。TIL输注过程中，11例有一过性寒战、发热（T＜38℃），其中6例伴轻度恶心、呕吐。结果提示：单次输注TIL和小剂量rhIL－2综合治疗后，可明显提高进展期肿瘤患者的细胞免疫功能，而无严重毒副作用，可能成为进展期肿瘤术后重要的辅助治疗方法。

TIL治疗人体进展期肿瘤后的免疫学监测

对8例晚期恶性肿瘤的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)分离、培养至l0°细胞以上．再重输给病人，同时应用小剂量IL-2,在治疗前一周及治疗后一个月采集病人外周静脉血、分离单个核细胞作为效应细胞，选用一组不同类型人肿瘤细胞株为靶细胞．以MTT比色法测定效应细胞对靶细胞的杀伤活性，同时分析效应细胞表型变化．结果显示．治疗后对不同靶细胞的杀伤活性均有不同程度提高。最有趣的是对与病人有相同组织学类型的瘤细胞的杀伤活性显著提高(43升高到1249溶解单位p<0．06)，用T4、T8单抗双染流式细胞仪分析表明T4、T8细胞表面荧光强度明显增强(T4：l9→3．98．T8：445→7．2 p<0．06)。提示TIL能够明显上调病人的免疫状况．其作用途径除直接的细胞毒效应外．免疫调节作用可能是其主要效应途径。

人乳头瘤病毒16型-L1真核表达质粒的构建和表达以及实验动物对裸DNA的免疫反应

Recombinant plasmid pcDNA-L1 was constructed by inserting HPV16-L1 gene fragment into eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1. pcDNA-L1 was transfected into mammalian cells Cos-7 and the expression of HPV16-L1 protein was testified by immunohistochemistry(IHC). Then the recombinant plasmid was directly injected into the quadriceps muscle of BALB/c mice. Antibodies against HPV16-L1 in the immunized mice were positively detected by immunodot and IHC at 28 and 41 days after the last immunization.

多药耐药性研究进展

多药耐药性（ＭＤＲ）是肿瘤细胞抵抗化疗药物导致肿瘤化疗失败的主要原因。本文探讨ＭＤＲ基因与癌基因的关系，某些药物对ＭＤＲ的逆转及转基因小鼠在ＭＤＲ研究中的新进展．

Th_1和Th_2细胞在机体免疫中的作用及调节

在小鼠和人体内ＣＤ＿４￣＋Ｔ淋巴细胞可区分为Ｔｈ＿１细胞和Ｔｈ＿２细胞，在机体免疫中其作用各有不同。Ｔｈ＿１细胞主要分泌ＩＬ－２，ＩＦＮ－ｒ，刺激细胞免疫反应；Ｔｈ＿２细胞则以分泌ＩＬ－４，ＩＬ－１０为主，刺激体液免疫反应。ＩＬ－２、ＩＦＮ－ｒ促进Ｔｈ＿１细胞分化，抑制Ｔｈ＿２细胞分化；而ＩＬ－４、ＩＬ－１０促进Ｔｈ＿２细胞分化，抑制Ｔｈ＿１细胞分化。

HPV_(16)预防性疫苗的研究进展及展望

高危型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ），尤其是ＨＰＶ１６是宫颈癌的重要启动因素。制备预防ＨＰＶ感染的疫苗可能达到对大部分宫颈癌的预防作用。因ＨＰＶ生物学特性的限制，使得该疫苗的研究曾一度受阻，随着分子生物学和基因工程技术以及在疫苗制备方法策略上的不断发展，ＨＰＶ预防性疫苗的大量供给不久将成为可能。

肿瘤浸润淋巴细胞和重组人白细胞介素-2对进展期肿瘤患者细胞免疫功能的影响

对20例经手术切除的进展期肿瘤患者用活化的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）和重组人白细胞介素-2（rhIL－2）治疗，检测治疗前后细胞免疫功能变化。其中8例治疗后PBL对同种异体相同组织学类型靶细胞的细胞毒性从43．2升高到1249．0溶解单位（P＜0．05），而NK活性无明显变化；T4、T8淋巴细胞亚群荧光强度明显升高，从1．9到3．9（P＜0．05）及4．4到7．2（P＜0．05）。所有患者PPD及PHA反应性明显增强，从10．9mm到13．6mm（P＜0．01）及7．9mm到12．7mm（P＜0．01），15例有一过性寒战、发热，其中10例伴轻度恶心、呕吐。结果提示：TIL和rhIL－2治疗后可明显提高进展期肿瘤患者的细胞免疫功能，而无明显毒副作用，可能成为进展期肿瘤术后重要的辅助治疗方法。

白细胞介素12研究新进展（－）

白介素－１２（ＩＬ－１２）是一种具有多种生物学活性的免疫效应细胞生长刺激因子。它不仅对细胞免疫具有增强调节作用，且可与其它细胞因子协同作用，在以细胞免疫为主的疾病中具有重要意义。

对比基因组杂交技术在肿瘤遗传学研究中的应用

对比基因组杂交技术是近几年发展起来的一种能快速全面分析染色体一个基因组甚至一条染色体获得和缺失的分子细胞遗传学方法。其具体方法是分别标记肿瘤ＤＮＡ和正常人体胎盘组织中提取的参照ＤＮＡ，制成探针，再与正常人体中期染色体铺片竞争性地原位杂交，通过对比各条染色体ＤＮＡ序列中两种荧光强度，揭示出肿瘤染色体某一基因的扩增和缺失。

Dbl癌基因家族的研究进展

Dbl癌基因发现于 1 985年 ,随后人们以 Dbl具有的 DH域及紧接于 DH域碳末端的PH域为结构特征 ,不断扩大 Dbl癌基因家族。 Dbl癌基因是目前认识的成员最多的癌基因家族。主要通过活化小 G蛋白家族成员等方式参与肿瘤生成及一些肿瘤恶性表型的获得。

6种肿瘤细胞株细胞B71分子的表达及其意义

目的 :观察肿瘤细胞株细胞共刺激分子B7.1的表达状况 ,并为进一步进行体外研究B7 1分子功能提供模型。方法 :用SABC免疫细胞化学方法研究 6种肿瘤细胞株细胞B7.1的表达。结果 :除BLZ2 11(人膀胱癌细胞株 )、A375 (人黑色素瘤细胞株 )阴性外 ,其余四株细胞——— 772 1(人肝癌细胞株 )、BLS2 11(人膀胱癌细胞株 )、GRC1(人肾癌细胞株 )、MGC(人胃癌细胞株 )均呈阳性染色反应 ,阳性细胞胞膜被染成棕黄色。结论 :本研究中的大多数肿瘤细胞株细胞表达B7.1分子 ;B7.1阳性细胞株细胞可用于体外研究B7.

抑癌基因p16在卵巢肿瘤中的表达及其意义

采用ＳＰ免疫组化染色法对９７例卵巢癌，３５例卵巢良性肿瘤及１６例正常卵巢ｐ１６蛋白表达进行测定，结果ｐ１６蛋白表达阳性率分别为３８．１４％，８２．８３％和８７．５０％，卵巢癌组明显低于正常对照及良性肿瘤（Ｐ＜０．０１）；不同组织类型卵巢癌之间ｐ１６蛋白阳性率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；但随着分化程度的降低，ｐ１６蛋白阳性率明显降低，高分化组（５８．０６％）与低分化组（１３．０４％）有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）；Ⅰ、Ⅱ期癌和Ⅲ、Ⅳ期癌阳性率分别为５２．２７％和２６．４２％（Ｐ＜０．０５）；ｐ１６蛋白阳性的卵巢癌患者累计生存率明显高于ｐ１６阴性者（Ｐ＜０．０１）。说明ｐ１６基因表达缺失与卵巢癌的发生、分化程度、进展及预后密切相关。

用~3H和地高辛配基标记TNF—α cDNA探针进行原位杂交的比较

用~3H和地高辛配基标记肿瘤坏死因子-αcDNA探针以及原位杂文技术检测33例子宫颈癌和28例阴道尖锐湿疣活检标本中的TNF mRNA。结果表明,两种标记探针原位杂交结果基本一致,~3H标记探针敏感性稍高于地高辛配基标记探针。但放射性核素探针的固有缺点及非同位素探针的安全、快速、方便使非同位素探针有着日益广泛的应用前景。

使用WEHI细胞和MTT试验检查单核细胞的细胞毒性

以TNF-α敏感细胞株WEHI克隆13为靶细胞,用MTT比色法代替传统的^(51)Cr释放试验检测单核细胞的细胞毒性,本法有更大的优点,快速、敏感,所需效应细胞量少,更适于临床应用,而且无同位素污染。

人单链白细胞介素12在酵母细胞中的表达

IL-12是一个多功能细胞因子,由于它结构复杂只有当P_(40)和P_(35)两条链同时表达并以1:1形式构成异二聚体蛋白时才具有生物活性,亦不能在E.coli中表达。构建人单链白细胞介素12(hscIL-12)融合基因真核表达质粒进行基因转导,获得hscIL-12表达载体,pYES-hscIL-12,使hscIL-12置于半乳糖可诱导启动子GAL_1的调控之下,用醋酸锂方法将重组体转入酿酒酵母YPH500细胞。免疫印迹结果表明重组hscIL-12成功地在酵母细胞中表达,分子量约为70kD,与推测的分子量一致。

胃泌素释放肽前体片段31-98检测对小细胞肺癌的临床意义

目的 与神经元特异性烯醇化酶 (NSE)对照 ,探讨胃泌素释放肽前体片段 31 98(ProGRP31 98)检测对小细胞肺癌 (SCLC)的临床意义。方法 采用ELISA检测 30例SCLC、30例非小细胞肺癌、15例肺良性疾病、15例正常健康者和 10例治疗后SCLC患者血清ProGRP31 98和NSE值。采用ROC曲线确定阈值 ,比较诊断准确性。结果 SCLC组血清ProGRP31 98值显著高于对照组 (P <0 0 0 0 1) ,广泛期高于局限期 (P =0 0 44 ) ,有远处转移者高于无远处转移者 (P <0 0 0 0 1)。SCLCProGRP31 98升高幅度大于NSE。以 40pg/ml和 8μg/L为阈值 ,SCLCProGRP31 98和NSE敏感性分别为 73%和 6 0 % ,ROC曲线下面积分别为 0 96 39± 0 0 18和 0 872 3± 0 0 36 ,差异有显著性 (P =0 0 0 0 1)。局限期SCLC的二者敏感性分别为 6 7%和 47% ,ROC曲线下面积分别为 0 95 6 5± 0 0 2 0和0 830 7± 0 0 42 ,差异有显著性 (P =0 0 0 0 1)。化疗有效者治疗后ProGRP31 98显著下降 (P =0 .0 18)。结论ProGRP31 98是较NSE更为特异。

宫颈癌患者外周血中的人乳头瘤病毒16型E6及E7蛋白特异性致敏淋巴细胞的检测

本研究证明进展期宫颈癌患者10/37例和10/46例外周血中分别存在有HPV16 E6和E7蛋白致敏的淋巴细胞,而40例献血员中分别为12.5％(5/40)和17.5％(7/40)。46例中有17例和25例分别进行了宫颈癌组织中的HPV16E6和E7基因序列检测,E6蛋白致敏淋巴细胞阳性的6例中检出与未检出E6序列的各占3例,E7蛋白致敏淋巴细胞阳性的5例中有3例未检出,有2例检出E7序列。