分级定量PCR检测血清HBV DNA

目的利用竞争ＰＣＲ法建立分级测定ＨＢＶＤＮＡ含量的定量方法．方法设立３个标准竞争模板（１０２ｃｏｐ，１０４ｃｏｐ，１０６ｃｏｐ），分别和恒量的待测模板混合，分别进行４０，３０，２０次循环的ＰＣＲ扩增，最后凝胶电泳分离待测模板和竞争模板的ＰＣＲ产物，测定两者的荧光强度的比值，计算待测模板的初始量．结果对乙型肝炎血清ＨＢＶＤＮＡ定量表明，１２份ＨＢｅＡｇ阳性血清，ＨＢＶＤＮＡ的血清浓度在６×１０７～１×１０１１ｃｏｐ／Ｌ，而１２份ＨＢｅＡｂ阳性血清只有７份可检出ＨＢＶＤＮＡ，它们的血清浓度均在３×１０８ｃｏｐ／Ｌ以下，其余５份用该ＰＣＲ方法，检测不到．