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YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的恶性胸膜间皮瘤细胞增殖的影响
1
作者
白祎阳
王文娟
+1 位作者
阮之平
南克俊
《山西医科大学学报》
CAS
2023年第7期885-893,共9页
目的研究YAP(Yes-associated protein,YAP)、TEAD(TEA domain transcription factor,TEAD)在恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)组织中的表达水平,以及YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的MPM细胞增殖的影响。方法利用...
目的研究YAP(Yes-associated protein,YAP)、TEAD(TEA domain transcription factor,TEAD)在恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)组织中的表达水平,以及YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的MPM细胞增殖的影响。方法利用高通量基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)通过生物信息学方法分析YAP及TEAD蛋白家族成员在MPM及正常胸膜组织中mRNA差异表达。免疫组化法检测36例MPM及15例正常胸膜组织中YAP、TEAD4、CTGF及Ki-67的蛋白表达水平。选取3株Hippo通路突变的MPM细胞株(H2373、MESO25及H2052)及2株Hippo通路野生型细胞株(MCF10A及293T)。通过慢病毒分别感染上述细胞株构建dnTEAD4过表达稳转细胞系及其对照EV细胞系,双荧光素酶报告基因实验检测YAP-TEAD转录活性的变化,实时荧光定量PCR检测下游靶分子CTGF及CYR61 mRNA表达水平的差异,平板克隆形成实验通过比较两组细胞克隆形成的大小、数目及克隆形成指数检验过表达dnTEAD4对MPM细胞增殖的影响。结果生信分析(GSE2549)显示,恶性胸膜间皮瘤组织中YAP及TEAD4 mRNA表达水平高于正常组织(P<0.01)。免疫组化结果显示,恶性胸膜间皮瘤组织中YAP、TEAD4及CTGF的蛋白表达水平高于正常胸膜组织(P<0.05),YAP蛋白表达阳性的恶性胸膜间皮瘤组织较YAP蛋白表达阴性的恶性胸膜间皮瘤组织具有更高的Ki-67指数(P<0.001)。相比EV组,dnTEAD4过表达组YAP-TEAD转录活性降低(P<0.01),下游靶分子CTGF及CYR61的mRNA表达水平降低(P<0.05)。同时,在Hippo通路突变的MPM细胞株中,相比EV组,dnTEAD4过表达组细胞克隆大小减小、克隆数目减少且克隆形成指数减小(P<0.001)。在Hippo通路野生型细胞株中,dnTEAD4过表达组细胞的克隆大小、克隆数目及克隆形成指数较EV组无明显变化。结论YAP及TEAD4在恶性胸膜间皮瘤组织中呈高表达。YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的恶性胸膜间皮瘤细胞增殖至关重要,Hippo通路突变的恶性胸膜间皮瘤细胞的增殖依赖高水平的YAP-TEAD转录活性。
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关键词
恶性胸膜间皮瘤
Hippo信号通路
YAP
YAP-TEAD转录活性
细胞增殖
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题名
YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的恶性胸膜间皮瘤细胞增殖的影响
1
作者
白祎阳
王文娟
阮之平
南克俊
机构
西安
交通大学第一附属
医院
皮肤科
西安
交通大学第一附属
医院
肿瘤
内科
西安国际医学中心医院肿瘤医院肿瘤内科
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2023年第7期885-893,共9页
基金
国家自然科学基金青年项目(82203295)。
文摘
目的研究YAP(Yes-associated protein,YAP)、TEAD(TEA domain transcription factor,TEAD)在恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)组织中的表达水平,以及YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的MPM细胞增殖的影响。方法利用高通量基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)通过生物信息学方法分析YAP及TEAD蛋白家族成员在MPM及正常胸膜组织中mRNA差异表达。免疫组化法检测36例MPM及15例正常胸膜组织中YAP、TEAD4、CTGF及Ki-67的蛋白表达水平。选取3株Hippo通路突变的MPM细胞株(H2373、MESO25及H2052)及2株Hippo通路野生型细胞株(MCF10A及293T)。通过慢病毒分别感染上述细胞株构建dnTEAD4过表达稳转细胞系及其对照EV细胞系,双荧光素酶报告基因实验检测YAP-TEAD转录活性的变化,实时荧光定量PCR检测下游靶分子CTGF及CYR61 mRNA表达水平的差异,平板克隆形成实验通过比较两组细胞克隆形成的大小、数目及克隆形成指数检验过表达dnTEAD4对MPM细胞增殖的影响。结果生信分析(GSE2549)显示,恶性胸膜间皮瘤组织中YAP及TEAD4 mRNA表达水平高于正常组织(P<0.01)。免疫组化结果显示,恶性胸膜间皮瘤组织中YAP、TEAD4及CTGF的蛋白表达水平高于正常胸膜组织(P<0.05),YAP蛋白表达阳性的恶性胸膜间皮瘤组织较YAP蛋白表达阴性的恶性胸膜间皮瘤组织具有更高的Ki-67指数(P<0.001)。相比EV组,dnTEAD4过表达组YAP-TEAD转录活性降低(P<0.01),下游靶分子CTGF及CYR61的mRNA表达水平降低(P<0.05)。同时,在Hippo通路突变的MPM细胞株中,相比EV组,dnTEAD4过表达组细胞克隆大小减小、克隆数目减少且克隆形成指数减小(P<0.001)。在Hippo通路野生型细胞株中,dnTEAD4过表达组细胞的克隆大小、克隆数目及克隆形成指数较EV组无明显变化。结论YAP及TEAD4在恶性胸膜间皮瘤组织中呈高表达。YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的恶性胸膜间皮瘤细胞增殖至关重要,Hippo通路突变的恶性胸膜间皮瘤细胞的增殖依赖高水平的YAP-TEAD转录活性。
关键词
恶性胸膜间皮瘤
Hippo信号通路
YAP
YAP-TEAD转录活性
细胞增殖
Keywords
malignant pleural mesothelioma
Hippo pathway
YAP
YAP-TEAD transcriptional activity
cell proliferation
分类号
R743.3 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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作者
出处
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1
YAP-TEAD转录活性对Hippo通路突变的恶性胸膜间皮瘤细胞增殖的影响
白祎阳
王文娟
阮之平
南克俊
《山西医科大学学报》
CAS
2023
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