黄芪甲苷对缺血性卒中小鼠神经功能保护作用及机制研究

目的探讨黄芪甲苷(astragaloside-IV,AST-IV)对缺血性卒中(ischemic stroke)模型鼠神经功能保护作用及机制研究。方法选取改良线栓法制备大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion,MCAO)小鼠模型,小鼠分成四组,每组8只,分别为假手术组(Sham)、药物对照组(AST-IV)、MCAO组和治疗组(AST-IV+MCAO);采用改良神经功能损伤评分(modified neurological severity score,mNSS)实验和转棒(Rotarod)实验综合评价ASTIV的神经保护功能;采用ELISA法检测AST-IV对MCAO脑组织核转录因子(NF-κB)、Toll样受体4(TLR-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、血红素氧合酶-1(HO-1)以及半胱天冬酶-1(caspase-1)表达水平的影响;采用比色法检测AST-IV对MCAO脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)表达水平的影响。结果MCAO组的mNSS评分(54.06±8.52)、脑组织ROS(54.06±8.52AFU)、MDA(2.40±0.33nmol/mg),NF-κB(304.94±39.93pg/mg),TLR4(225.60±37.51pg/mg),TNF-α(80.14±11.06pg/mg),GFAP(181.24±19.88pg/mg)和caspase-1(1.76±0.20)表达均显著高于Sham组(0.75±0.89,19.85±2.45AFU,1.43±0.29 nmol/mg,131.03±29.45 pg/mg,102.74±19.18 pg/mg,32.04±10.30 pg/mg,63.14±14.48pg/mg,1.00±0.09),差异具有统计学意义(F=38.572~184.478,均P<0.001);MCAO组在Rotarod上的停留时间(74.63±18.73s),脑组织SOD(2.88±0.49unin/mg),GSH(3.49±0.64nmol/mg)和HO-1(105.93±24.45pg/ml)表达均显著低于Sham组(186.50±48.10s,5.58±0.71unit/mg,6.32±0.82 pg/ml,203.11±28.65pg/ml),差异具有统计学意义(F=37.586~78.889,均P<0.001);AST-IV+MCAO组的mNSS评分(3.88±1.36)、脑组织ROS(24.64±14.26AFU),MDA(2.00±0.21nmol/mg),NF-κB(212.03±38.63 pg/mg),TLR-4(134.81±25.60 pg/mg),TNF-α(53.61±12.49pg/mg),GFAP(101.00±15.04 pg/mg)和caspase-1(1.46±0.15)表达均显著低于MCAO组,差异具有统计学意义(F=4.639~82.890,均P<0.05);AST-IV+MCAO组在Rotarod上的停留时间(160.75±33.33s),脑组织SOD(4.51±0.51unit/mg),GSH(5.30±0.73nmol/mg)和HO-1(179.96±20.97pg/ml)均显著高于MCAO组,差异具有统计学意义(F=27.681~42.364,均P<0.001)。结论AST-IV的脑保护作用可能与其抗炎、抗氧化应激、抑制焦亡进程有关。

Klotho在缺血性脑卒中患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨缺血性脑卒中(CIS)患者血清中Klotho蛋白的表达及其临床意义。方法 采用RT-qPCR,Western Blotting的方法检测2020年4月至2022年4月西安市西京医院收治的52例CIS患者及52例正常对照组的血清中Klotho的表达,并分析其与患者疾病活动度的相关性。结果 Klotho的mRNA在CIS患者血清标本中的相对表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(t=17.986,P<0.05);Western Blotting检测显示,Klotho蛋白在CIS血清标本中相对表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(t=15.554,P<0.05);Klotho蛋白表达水平与CIS患者疾病活动度NIHSS评分呈负相关关系(r=-0.5974,P<0.05),与BI评分呈正相关关系(r=0.6069,P<0.05)。结论 Klotho可能参与缺血性脑卒中的发生发展。