消瘰丸(Ⅱ)通过调控NLRP3炎症小体治疗小鼠附睾炎的机制研究

目的:探讨消瘰丸(Ⅱ)对LPS诱导的附睾炎的影响机制。方法:使用LPS局部注射法构建附睾炎小鼠模型;研究分为生理盐水对照组(n=5)、模型组(n=5)、模型+消瘰丸组(n=5)和生理盐水+消瘰丸组(n=5);消瘰丸(Ⅱ)/生理盐水连续灌胃14 d后,检测附睾组织病理变化、NLRP3炎症小体和Caspase-1的表达以及相关蛋白水平。结果:与模型组相比,消瘰丸(Ⅱ)能显著减轻炎性细胞浸润和病变,降低NLRP3、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD、p-p38 MAPK蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01),减少炎症反应。结论:消瘰丸(Ⅱ)通过调控NLRP3介导的细胞焦亡途径,减轻附睾炎症水平,改善小鼠附睾上皮损伤。

基于网络药理学和分子对接技术探究左卡尼汀治疗附睾炎的作用机制

目的:基于网络药理学及实验研究探究左卡尼汀治疗附睾炎的潜在作用机制。方法:通过多个数据库联用检索出附睾炎与左卡尼汀相关的靶蛋白,在Venny软件获得两者的共同靶点。应用STRING数据库获得蛋白-蛋白之间的相互关系。利用Cytoscape软件进行可视化,拓扑分析后筛选出关键靶点。使用DAVID数据库进行GO与KEGG通路富集分析。使用Autodock Vina进行分子对接。结果:共获得药物靶点130个,疾病靶点2 151个,共同靶点47个。PPI网络分析得到左卡尼汀治疗附睾炎的核心靶点包括AKT1、HSP90AA1、ALB、CASP3、GSK3B和GSR等。KEGG通路分析提示代谢途径、脂质与动脉粥样硬化、癌症途径、流体剪切应力与动脉粥样硬化、麻疹、化学致癌物质-活性氧物质、嘌呤代谢、P13K-Akt等信号通路可能与左卡尼汀治疗附睾炎的机制有关。结论:本研究通过网络药理学揭示了左卡尼汀可能作用于AKT1、HSP90AA1、ALB、CASP3、GSK3B、GSR等靶点调节多条信号通路,从而可能发挥对附睾炎的治疗效果。

基于NF-κB通路探讨苗药酢浆草调控人前列腺癌PC-3细胞生物学作用的机制研究

目的:本研究旨在探讨苗药酢浆草对人前列腺癌PC-3细胞的生物学作用机制。方法:通过体外实验,用苗药酢浆草对PC-3细胞进行干预,采用了MTT法检测细胞活力,细胞流式技术检测PC-3细胞凋亡情况,Transwell法检测迁移及侵袭状况以及蛋白质印记技术检测NF-κB通路中p65、p-p65、Ikba、p-Ikba蛋白的表达情况。结果:苗药酢浆草以抑制PC-3细胞的增殖、诱导的PC-3细胞的凋亡,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),苗药酢浆草呈浓度依赖性抑制PC-3细胞的侵袭与迁移,差异较对照组有统计学意义(P<0.05),同时上调IκBα,下调p-p65及p-IκBα的表达水平,差异较照对照组有统计学意义(P<0.05)。结论:苗药酢浆草可抑制PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导PC-3细胞凋亡,且这些作用可能与抑制p-p65、p-Ikba的表达并调节NF-κB信号通路活性有关。

基于网络药理学探究消瘰丸(Ⅱ)治疗附睾炎的作用机制

目的:应用网络药理学方法探究消瘰丸(Ⅱ)治疗附睾炎的潜在作用机制。方法:通过多个数据库联用检索出附睾炎与消瘰丸(Ⅱ)相关的靶点,在Venny平台获得两者的共同靶点。应用STRING数据获得蛋白-蛋白之间的相互关系,利用Cytoscape软件进行可视化。拓扑分析后筛选出关键靶点。使用DAVID数据库进行GO与KEGG通路富集分析。结果:共获得药物靶点238个,疾病靶点2150个,共同靶点85个。PPI网络分析得到消瘰丸(Ⅱ)治疗附睾炎的核心靶点包括TNF、IL6、IL1B、MMP9、AKT1、PTGS2和TP53等。GO功能分析结果显示共同靶点参与缺氧的反应、细胞凋亡过程的调控、炎症反应、MAPK级联反应的正调控等生物过程。KEGG通路分析提示癌症通路、PI3K-Akt通路、癌症中的蛋白聚糖通路、Ras信号通路及化学致癌–受体激活通路等信号通路可能与消瘰丸(Ⅱ)治疗附睾炎的机制有关。结论:本研究利用网络药理学的方法发现消瘰丸(Ⅱ)治疗附睾炎的潜在靶点和通路,初步探索其作用机制,为后续的研究提供了一些新的思路。

卵巢超声指标联合LH、E2及T对多囊卵巢综合征患者不孕的诊断价值

目的研究卵巢超声指标联合性激素指标对多囊卵巢综合征(PCOS)患者不孕的诊断价值。方法选取2017年1月至2020年1月西安市人民医院收治的84例PCOS不孕患者作为观察组,另选取同期入院进行孕前检查的84例健康女性作为对照组。比较两组受检者的血清促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)以及各超声指标的差异,并采用受试者工作特征曲线(ROC)评价其对PCOS患者不孕的诊断价值。结果观察组患者的子宫内膜体积为(1.51±0.33)cm^(3),明显小于对照组的(3.24±0.92)cm^(3),且卵巢体积、卵泡体积、平均卵泡数量、血管化指数(VI)、血流指数(PI)以及血管化血流指数(VFI)明显大(高)于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的LH和T分别为(12.04±2.46)U/L、(7.94±2.21)nmol/L,明显高于对照组的(5.33±1.12)U/L、(2.30±0.57)nmol/L,E2为(113.52±31.22)pmol/L,明显低于对照组的(125.36±38.14)pmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);经ROC分析结果显示,VI诊断多囊卵巢综合征患者不孕的曲线下面积值(AUC)值为0.794,敏感性为88.57%,特异性为68.09%;卵巢超声指标和LH、E2及T联合诊断多囊卵巢综合征患者不孕的AUC值为0.866,敏感性为90.48%,特异性为79.76%。结论卵巢超声指标联合LH、E2及T对PCOS患者不孕有一定的诊断价值,其特异度和敏感度较高。

男性血清和精浆HCY水平与精液参数的相关性及其对复发性自然流产的影响

目的:探讨男性血清和精浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与精液参数的相关性及其对配偶复发性自然流产(RSA)的影响。方法:研究对象为2021年3月至2022年9月于西安市人民医院(西安市第四医院)生殖中心男科门诊孕前检查患者103例,检测其血清、精浆Hcy水平与精液参数,并对其相关性进行分析;根据其配偶有无RSA将其分为流产组(RSA,n=43例)和未流产组(NRSA,n=60例),观察两组患者Hcy水平及精液参数差异。结果:患者血清与精浆Hcy水平的关联性无统计学差异(r=-0.041,P=0.723);血清Hcy与精子DNA碎片指数(DFI)的关联性存在着统计学差异(r=0.316,P=0.005),与其他精液参数的关联性无统计学差异(P>0.05);精浆Hcy与精液参数的关联性无统计学差异(P>0.05)。与NRSA组患者[14.65(12.00,18.20)umol/L]相比较,RSA组患者血清Hcy中位数[18.39(13.02,42.84)umol/L]明显升高,两组总体血清Hcy分布存在着统计学差异(Z=-2.20,P=0.028);与NRSA组[13.00%(11.00%,18.50%)]相比较,RSA组患者精子DFI中位数[25.00%(12.50%,37.25%)]显著升高,两组总体精子DFI分布存在着统计学差异(Z=-2.74,P=0.006)。结论:血清Hcy与精子DFI呈正相关性;配偶RSA患者血清Hcy与精子DFI均明显升高,其有望作为配偶RSA的男性患者临床筛查指标。

经皮穴位电刺激对体外授精-胚胎移植妊娠结局的影响:随机对照试验的meta分析

目的:依据现有临床证据评价经皮穴位电刺激(TEAS)对体外授精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。方法:通过计算机检索PubMed、MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆和CNKI、VIP、CBM、万方数据库建库至2021年2月有关TEAS应用于改善IVF-ET临床妊娠结局的随机对照试验(RCT),由两位研究者按照纳入与排除标准进行文献筛选、资料提取和质量评价,并采用RevMan 5.3软件进行meta分析。结果:共纳入来自9项随机对照试验的IVF-ET患者2206例,TEAS治疗组1018例,对照组1188例。meta分析结果显示:分别与TEAS模拟对照组(MTEAS)或无TEAS干预对照组比较,TEAS治疗均可显著提高IVF-ET患者的临床妊娠率[RR=1.85,95%CI(1.42,2.42),P<0.01;RR=1.23,95%CI(1.10,1.39),P=0.0004];与对照组相比较,在取卵前或取卵后行TEAS治疗,IVF-ET患者的临床妊娠率也均得到显著提高[RR=1.50,95%CI(1.03,2.17),P=0.03;RR=1.47,95%CI(1.12,1.92),P=0.005]。与对照组相比较,TEAS治疗可显著提高IVF-ET患者的胚胎种植率[RR=1.49,95%CI(1.24,1.79),P<0.01]以及活产率[RR=1.44,95%CI(1.04,1.98),P=0.03]。结论:TEAS作为一种安全、非侵入性治疗手段,其可明显改善IVF-ET妊娠结局,疗效可靠。

高危流产术后应用不同药物对子宫恢复效果的影响

目的 比较雌孕激素续贯人工周期治疗和口服复方口服避孕药(COC)对高危流产术后患者子宫恢复效果的影响。方法 纳入383例行人工流产术且术后接受相关治疗的高危患者,其中术后接受人工周期治疗(经皮涂抹雌二醇凝胶+口服黄体酮治疗)的患者共274例(人工周期组),术后口服COC(屈螺酮炔雌醇片Ⅱ)治疗的患者共109例(COC组)。比较两组患者术后子宫内膜厚度、阴道出血时间、并发症发生率、月经首次复潮时间、月经量恢复正常(即月经复常)情况。采用多元线性回归或Logistic回归模型分析高危流产术后干预措施对患者子宫恢复效果的影响。结果 人工周期组患者术后子宫内膜厚度厚于COC组,术后阴道出血时间、首次月经复潮时间均短于COC组,且宫腔积液发生率低于COC组,月经复常率高于COC组(均P<0.05)。回归分析结果显示,在校正所有基线混杂因素后,与接受COC治疗的患者相比,接受人工周期治疗的患者术后子宫内膜厚度增加0.14 mm,术后阴道出血缩短0.55 d,发生宫腔积液的概率更低,且月经复常的概率更高(均P<0.05)。结论 高危流产术后给予患者雌孕激素续贯人工周期治疗是安全、有效的,与COC治疗相比,其更有利于术后子宫内膜的修复,以及减少术后并发症的发生。

脂多糖诱导的炎症对雄性大鼠精子质量的影响及其可能机制探索

目的:研究脂多糖(LPS)诱导的炎症对雄性大鼠附睾精子质量的影响,初步探讨其可能的机制。方法:36只雄性SD大鼠(400~450 g)随机分为4组,每组9只。对照组大鼠腹膜内注射无菌生理盐水,余下3组大鼠腹膜内注射LPS(5 mg/kg,溶于无菌生理盐水中),分别于注药12 h(LPS 12 h组)、24 h(LPS 24 h组)和72 h(LPS 72 h组)后麻醉处死。取其附睾检测附睾尾精子活动率及精子数目,并计算精子相对计数值(10~6个/100 mg附睾重);检测附睾组织匀浆中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性来反映附睾氧化应激状态;流式细胞术检测睾丸生精细胞凋亡率。结果:(1)与对照组(68.01±1.80)%相比,LPS 12 h组大鼠附睾尾精子活动率[(62.28±4.06)%]明显降低(P﹤0.05),而LPS 24 h组(45.35±3.39)%以及LPS 72 h组附睾尾精子活动率(34.85±4.42)%极显著降低(P﹤0.01);与对照组(38.94±4.08)×10~6个/100 mg相比,LPS 12 h组大鼠附睾尾精子相对计数[(37.15±2.54)×10~6个/100 mg]减少,但无统计学差异(P>0.05),而LPS 24 h组[(31.97±2.81)×10~6个/100 mg]和LPS 72 h组[(28.60±4.03)×10~6个/100 mg]极显著减少(P﹤0.01)。(2)与对照组(4.66±1.49)nmol/mg prot相比,LPS 12 h组[(15.95±3.26)nmol/mg prot]和LPS 24 h组[(12.93±2.54)nmol/mg prot]大鼠附睾MDA含量极显著升高(P﹤0.01),而LPS 72 h组[(9.67±1.68)nmol/mg prot]明显升高(P﹤0.05);与对照组(879.335±105.089)U/mg prot相比,LPS 12 h组大鼠附睾组织匀浆中SOD活性[(729.265±93.783)U/mg prot]降低,但无统计学差异(P>0.05),LPS 24 h组[(694.126±58.530)U/mg prot]和LPS 72 h组[(655.352±115.215)U/mg prot]显著降低(P﹤0.05)。(3)流式细胞术结果显示,与对照组(4.21±1.67)%相比,LPS 12 h组大鼠睾丸生精细胞凋亡率(11.01±3.30)%明显增加(P﹤0.05),而LPS 24 h组[(23.88±4.58)%]和LPS 72 h组[(41.28±2.28)%]极显著增加(P﹤0.01)。结论:LPS(5 mg/kg)腹膜内注射诱导炎症呈时间依赖性损害雄性大鼠生殖细胞与附睾精子质量,可能与其生殖系统氧化应激损伤和凋亡有关。

miR-152通过HLA-G/KIR2DL4通路对dNK分泌LIF和GM-CSF的影响

目的研究微小RNA-152(miR-152)通过其靶基因人类白细胞抗原G(HLA-G)与蜕膜NK细胞(dNK)表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)KIR2DL4之间通路,对dNK分泌白血病抑制因子(LIF)及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的影响。方法收集2020年9月-2020年10月在西安市人民医院行人工流产患者的正常早孕蜕膜组织5例,分选、纯化dNK。在体外培养的HTR8细胞中过表达和抑制miR-152,分为对照组(未转染)、过表达组(转染miR-152 mimics)与抑制组(转染miR-152 inhibitor)。实时定量PCR(qRT-PCR)检测转染后miR-152水平。构建dNK与过表达或抑制miR-152后的HTR8共培养体系,并在共培养过程中特异性封闭dNK KIR2DL4,分组为:NC组[HTR-8+dNK+白细胞介素-15(IL-15)共培养]、A组(过表达miR-152的HTR-8+dNK+IL-15)、B组(抑制miR-152的HTR-8+dNK+IL-15)、C组[过表达miR-152的HTR-8+dNK+KIR2DL4抑制物(anti-KIR2DL4)+IL-15]、D组[过表达miR-152的HTR-8+dNK+IgG1(anti-KIR2DL4对照物)+IL-15]、E组(转染miR-152 mimics NC的HTR-8+dNK+antiKIR2DL4+IL-15)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测共培养24 h后上清中LIF、GM-CSF的表达。结果转染后6 h于荧光显微镜下观察转染效率(羧基荧光素酶标记对照),可见转染效率超过90%。与对照组(1.27±0.29)相比,过表达组细胞中miR-152表达水平升高(2.63±0.44),抑制组细胞中miR-152表达降低(0.34±0.12),差异均有统计学意义(F=130.47、130.47,P<0.05)。与NC组相比,C组共培养上清中LIF、GM-CSF的浓度最低;A、D、E组在过表达miR-152的前提条件下,共培养上清中LIF、GM-CSF的浓度均分别低于NC组;B组共培养上清中LIF、GM-CSF的浓度高于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-152能够通过HLA-G/KIR2DL4通路影响dNK分泌LIF、GM-CSF。

miR-152 通过HLA-G / KIR2DL4 通路对人正常滋养细胞中基质金属蛋白酶2、9 表达的影响

目的研究miR-152通过其靶基因人类白细胞抗原G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)与蜕膜NK细胞(decidual natural killer,dNK)表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer Ig-like receptors,KIR)2DL4之间通路,对人正常滋养细胞(HTR-8)中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)2、9表达的影响。方法收集2020年9月~10月西安市第四医院妇产科门诊人工流产患者正常早孕蜕膜组织(n=5),分选、纯化dNK;构建其与过表达和抑制miR-152后的HTR-8细胞共培养体系,在共培养中封闭dNK表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer Ig-like receptors,KIR)KIR2DL4。实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测miR-152转染效率;qRT-PCR、蛋白免疫印迹检测转染miR-152及干预HLA-G/KIR2DL4通路后HTR-8中MMP2、9的表达,Transwell实验检测HTR-8浸润能力的变化情况。结果miR-152在HTR-8细胞中过表达和抑制效果显著;在抑制miR-152表达的共培养组HTR-8中MMP2、MMP9在mRNA及蛋白水平表达升高,且细胞浸润能力增强;过表达miR-152且封闭KIR2DL4共培养组HTR-8浸润能力显著降低,MMP2、MMP9在mRNA及蛋白水平表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-152能够通过HLA-G/KIR2DL4通路影响HTR-8细胞中MMP2、MMP 9表达。

放化疗患者的生育力保存

文献报道,育龄期癌症患者中大约50%有生育的需求,然而,癌症幸存者的生育力比普通人群差[1]。肿瘤治疗对生育力的损害是受多种因素影响的,一方面抗癌治疗中的放疗或化疗均会累及卵巢及其他生殖内分泌器官,直接导致卵巢储备功能减退或丧失[2];另一方面,癌症治疗本身延迟了妊娠计划,卵巢功能会随着时间推移逐渐下降,越来越多的证据肯定了生育力保存对年轻患者的重要性[3]。在临床工作中,肿瘤的类型及患者的年龄是临床医生为其提供建议时考虑的主要因素。