乙酰半胱氨酸通过激活PI3K/AKT信号通路抑制脂多糖诱导的肺泡上皮细胞活力降低和炎症反应

目的研究乙酰半胱氨酸(acetylcysteine,NAC)调控磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺泡上皮细胞活力、增殖、迁移及炎症因子的影响。方法体外培养人肺泡上皮A549细胞,采用10μg/mL LPS诱导A549细胞建立炎症细胞模型作为LPS组,之后在模型基础上加入0.5、1、2、4、8 mmol/L NAC,以不做干预的细胞作为对照组,药物干预24 h,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法筛选出最佳的NAC浓度用于后续实验研究。而后将细胞分为对照组、LPS组、NAC组(10μg/mL LPS+8 mmol/L NAC)、激活剂组(10μg/mL LPS+10μmol/L PI3K/AKT信号通路激活剂SC79)、NAC+激活剂组(10μg/mL LPS+8 mmol/L NAC+10μmol/L SC79)及NAC+抑制剂组(10μg/mL LPS+8 mmol/L NAC+10μmol/L PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002)。药物干预24 h后,CCK-8法、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)、划痕法和酶联免疫检测(ELISA)法分别测定细胞活力、增殖率、迁移率及炎症因子(IL-6、IL-8、IL-1β、IL-10)水平,蛋白免疫印迹法测定细胞中PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT水平。结果干预细胞活力的最佳浓度为8 mmol/L NAC。与对照组比较,LPS组细胞活力、增殖率、抑炎因子IL-10水平及p-PI3K、p-AKT水平降低,迁移率和促炎因子(IL-6、IL-8、IL-1β)水平升高;与LPS组比较,NAC组和激活剂组细胞活力、增殖率、抑炎因子IL-10水平及p-PI3K、p-AKT水平升高,迁移率、促炎因子(IL-6、IL-8、IL-1β)水平降低;与NAC组比较,NAC+激活剂组上述指标变化进一步加大,而NAC+抑制剂组逆转上述指标变化。结论NAC可通过激活PI3K/AKT信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞活力与增殖力降低、细胞迁移力增强及炎症反应。

沉默PROX1基因对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的影响

目的探讨沉默prospero相关同源异形盒蛋白1(PROX1)基因对甲状腺乳头状癌(PTC)TPC-1细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。方法将TPC-1细胞分别转染NC-siRNA(NC-siRNA组)和PROX1-siRNA(PROX1-siRNA组)。Western blot检测PTC细胞系BCPAP、TPC-1、K1、IHH4和正常甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-ori-3-1中PROX1蛋白表达水平。CCK-8法检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot检测Notch1信号通路相关蛋白(hes1、hes5、NICD)表达水平。结果与正常甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-ori-3-1比较,PTC细胞系TPC-1、BCPAP、K1和IHH4中PROX1蛋白表达水平明显较高(P<0.05),其中TPC-1最高。与NC-siRNA组比较,PROX1-siRNA组PROX1蛋白表达水平及细胞增殖、侵袭、迁移能力较低,细胞凋亡率较高(P<0.05)。与NC-siRNA组比较,PROX1-siRNA组hes1、hes5和NICD蛋白表达水平较低(P<0.05)。结论沉默PROX1可通过抑制Notch1信号通路进而抑制TPC-1细胞的增殖、侵袭、迁移,并促进其凋亡。

十二指肠球部-远端胃Dieulafoy病伴嗜酸细胞性胃肠炎及Brunner腺囊性增生1例并文献回顾

Dieulafoy病是一种罕见的血管异常,多发生在上消化道,以异常扩张的小动脉在黏膜下层蜿蜒为特征,临床多表现为不明原因的上消化道出血,占急性消化道出血的1%~2%[1],重者表现为突发的致命性大呕血。本研究报道1例以上腹部不适就诊的Dieulafoy病伴Brunner腺囊性增生及肠壁炎症改变的病例,以提高对该疾病的认识,减少漏诊。