依托咪酯对机械性损伤的体外培养视网膜神经节细胞的保护作用

目的观察依托咪酯(ET)对机械性损伤的体外培养视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用。方法体外培养新生Sprague-Dawley大鼠RGC,采用Thy1.1和微管关联蛋白2对其进行免疫荧光双标鉴定。培养的原代细胞随机分为对照组、RGC划伤组、ET低剂量组(1μmol/L)、ET中剂量组(5μmol/L)、ET高剂量组(10μmol/L)。RGC划伤组和不同浓度ET组采用虹膜刀划伤培养细胞,建立RGC机械性损伤模型。建模后7 d,细胞计数试剂盒-8增生分析法检测各组RGC存活率;膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶双染色法检测各组RGC凋亡率。多组间比较采用单因素方差分析;组间两两比较采用最小显著差法检验。结果RGC划伤组、ET低剂量组、ET中剂量组、ET高剂量组的RGC存活率分别为(72.60±2.97)%、(73.73±1.14)%、(79.19±1.79)%、(83.88±0.94)%;对照组、RGC划伤组、ET低剂量组、ET中剂量组、ET高剂量组的RGC凋亡率分别为(5.08±0.17)%、(18.67±1.24)%、(17.96±0.74)%、(15.11±0.56)%、(11.67±1.32)%。组间RGC存活率比较:与RGC划伤组相比,ET低剂量组、ET中剂量组、ET高剂量组的细胞存活率增高,RGC划伤组与ET低剂量组之间的差异无统计学意义(P=0.728);RGC划伤组与ET中剂量组、ET高剂量组之间的差异均有统计学意义(P<0.001);ET中剂量组与ET高剂量组之间的差异有统计学意义(P=0.002)。组间RGC凋亡率比较:RGC划伤组凋亡率较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与RGC划伤组比较,ET低剂量组、ET中剂量组、ET高剂量组的细胞凋亡率降低,RGC划伤组与ET低剂量组之间的差异无统计学意义(P=0.869);R G C划伤组与E T中剂量组、E T高剂量组之间的差异均有统计学意义(P<0.05);ET中剂量组与ET高剂量组之间的差异有统计学意义(P=0.007)。结论ET对机械性损伤的体外培养RGC具有神经保护作用,且保护作用在一定范围内随ET剂量的增长而增强。