肺泡灌洗液宏基因二代测序在儿童重症肺炎病原诊断中的价值

目的探讨肺泡灌洗液(BALF)宏基因二代测序(mNGS)对儿童重症肺炎病原的诊断价值。方法选取2019年6月至2020年12月于西安市儿童医院住院诊断为重症肺炎的146患儿的BALF进行传统实验室检测(常规培养+涂片)和mNGS检测。分析BALF mNGS检测与常规培养+涂片检测对病原微生物的检出结果。结果BALF mNGS检测病原阳性率为80.1%(117/146),前3位依次为肺炎链球菌55株、肺炎支原体43株、流感嗜血杆菌18株。常规培养+涂片检测病原阳性率为18.5%(27/146),前3位分别为肺炎链球菌6株、流感嗜血杆菌4株、肺炎支原体4株。单一感染最多的是肺炎链球菌,混合感染最多的是肺炎支原体+肺炎链球菌。BALF mNGS检测病原阳性率高于常规培养+涂片检测(χ^(2)=84.65,P<0.05)。血清肺炎支原体抗体检测病原阳性率为39.7%(58/146),BALF mNGS检测病原阳性率为29.5%(43/146),差异具有统计学意义(χ^(2)=78.76,P<0.05)。结论BALF mNGS检测对儿童重症肺炎病原的检出率高于常规培养+涂片检测,可在早期指导临床合理用药。

FOSL1通过ITGA6/PI3K/AKT途径参与儿童呼吸哮喘疾病

目的探究FOS样抗原1(FOS-like antigen 1,FOSL1)对哮喘中气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖与迁移的作用及其分子机制。方法建立TGF-β1诱导的ASMCs模型,并采用CCK-8试剂盒检测细胞活力。使用qRT-PCR和Western印迹方法检测FOSL1及ITGA6的表达量。MTT法、Transwell试验、qRT-PCR和Western印迹方法被用于测定ASMCs细胞增殖、迁移及其过程中关键蛋白的表达量。结果TGF-β1诱导下,ASMCs细胞中的FOSL1表达量上升。沉默FOSL1后,ASMCs细胞的增殖及迁移能力降低,并且细胞增殖过程中关键蛋白细胞核增殖因子及细胞核增殖抗原,迁移过程中关键蛋白基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9的表达量均显著降低。沉默FOSL1降低ITGA6的表达量。过表达ITGA6及IGF-1/SC79(PI3K/AKT信号通路激活剂)可部分程度上缓解沉默FOSL1导致的ASMCs细胞增殖及迁移能力的降低。结论FOSL1可通过ITGA6/PI3K/AKT通路调节气道平滑肌细胞的增殖及迁移能力,进而影响儿童呼吸哮喘的疾病进程。

PON2与LT在儿童睡眠呼吸暂停综合征中的变化分析

目的探讨对氧磷酶2(PON2)和白三烯(LT)在儿童睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)中表达的相关性及临床生物学意义,为探索OSAS细胞乏氧代谢损伤机制提供分子病理学研究基础。方法选择2015年2月至2016年6月于西安市儿童医院初诊确诊为OSAS且未经治疗的患儿32例,以及同期正常体检的儿童18例,以正常儿童群体为对照,比较PON2和LT在OSAS睡眠状态及清醒状态中的差异。结果与正常对照组相比,OSAS(睡眠状态)组中的轻度组和中重度组分别与OSAS(清醒状态)组的患儿比较,PON2和LT的表达水平差异均有统计学意义(t值分别为1.56、1.60、1.45;1.41、1.58、1.60,均P<0.05)。OSAS(睡眠状态)组整体与OSAS(清醒状态)组的PON2和LT表达水平比较差异均无统计学意义(t值分别为1.79、1.81,均P>0.05)。Spearman相关性分析显示,PON2和LT的表达水平与呼吸暂停低通气指数(AHI)分级呈正相关,r值分别为0.78和0.66,均P<0.05。结论 PON2和LT与OSAS患儿的AHI分级存在关联,并可作为独立因子辅助其诊断及分级。

儿童大叶性肺炎286例病原谱分析

目的:探讨儿童大叶性肺炎的病原学变迁。方法:分析286例儿童大叶性肺炎患儿的临床资料,对其病原学特点进行回顾性分析。结果:286例患者病原学检查痰培养阳性率为23.77﹪,肺泡灌洗液培养阳性率43.38﹪,支原体阳性53.85﹪。混合感染者居多,其中支原体合并EB病毒感染34例,支原体合并其他病毒55例,各种病毒混合感染79例。结论:1肺炎链球菌不再是儿童大叶性肺炎的主要病原,非典型病原体尤其是肺炎支原体在儿童大叶性肺炎中占重要地位。2混合感染不容忽视,支原体感染可合并EB病毒感染。3不同年龄段和不同季节病原不同。

维生素A水平与儿童肺炎支原体感染的关系

目的 探讨维生素A （VA） 水平与肺炎支原体 （MP） 感染的相关性.方法 随机选取2015年3月-2015年12月因呼吸道急性感染性疾病住院的0-12岁儿童为研究对象.采用高效液相色谱法 （HPLC） 检测血清VA水平, 聚合酶链反应 （PCR） 检测鼻咽拭子MP-DNA, 酶联免疫吸附法 （ELISA） 检测血清MP-IgM.分析和比较亚临床VA缺乏 （SVAD）、可疑亚临床维生素A缺乏 （SSVAD） 和VA正常患儿间MP感染情况.结果 600例患儿中SVAD 83例 （13.83%）, SSVAD 193例 （32.17%）, 〈 1岁、 1-3岁、 6岁以及-〉 6岁组间SVAD及SSVAD发生率的差异有统计学意义 （P均 〈 0.001）, 其中 〈 1岁婴儿SVAD及SSVAD发生率最高, 分别为26.36%和49.10%. 600例患儿中MP阳性病例201例 （33.5%）, 其中SVAD 57例 （28.35%）, SSVAD 70例 （34.83%）; MP阳性患儿的SVAD发生率高于阴性患儿, 差异有统计学意义 （P〈 0.001）.201例MP阳性患儿不同年龄组间SVAD、 SSVAD以及VA正常儿童分布的差异有统计学意义 （P = 0.003）, 〈 1岁婴儿SVAD发生率 （48.39%） 较高. 结论 SSVAD、 SVAD以 〈 1岁婴儿最多, SVAD与儿童MP感染可能相关.

责任制护理对儿童非霍奇金淋巴瘤患者化疗副作用及疗效分析

目的探讨责任制护理对儿童非霍奇金淋巴瘤患者化疗副作用及远期疗效的影响。方法选取本院非霍奇金淋巴瘤儿童患者162例作为研究对象,随机分为干预组和对照组,对照组采用常规护理,干预组采用责任制护理,比较2组患儿化疗不良反应发生情况、生存质量及远期疗效。结果干预组头晕头痛、恶心呕吐、腹痛腹泻的不良反应发生率分别为25.9%、14.8%、4.9%显著低于对照组的53.1%、28.4%、12.8%(P<0.05);干预组生理功能、社会功能、角色功能以及情感功能方面评分均显著高于对照组(P<0.05);干预组患者1年、3年总体生存率以及1年、3年无瘤生存率均显著高于对照组患者(P<0.05)。结论责任制护理能够有效改善儿童非霍奇金淋巴瘤患者化疗不良反应症状,提高患者生存率。

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征临床监测分析

目的:探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者的临床特征及评价疗效。方法:回顾分析70例阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者PSG监测数据。结果:随着呼吸紊乱指数的增加,年龄、体重指数、最长呼吸暂停时间、最低SaO_2%、平均SaO_2%下降等指标在轻度与中、重度SAS之间差异显著;70例患者中伴有高血压52.9%、糖尿病5.7%、冠心病21.4%。结论:OSAS是一种具有潜在危险的疾痛,对OSAS早期诊断治疗是预防发生严重并发症的关键。

电子支气管镜治疗儿童支原体肺炎34例疗效观察

目的:探讨支气管肺泡灌洗术治疗儿童肺炎支原体肺炎的疗效。方法:将94例肺炎支原体肺炎患儿随机分为两组,对照组60例给予常规抗感染治疗及对症支持治疗,治疗34例在对照组治疗基础上进行电子支气管镜肺泡灌洗术治疗。观察两组患儿的临床症状、体征以及胸部CT的改善情况。结果:治疗组患儿在咳嗽时间、肺部体征消失时间、住院时间等方面均显著短于对照组(P<0.05),胸部CT显示病变吸收明显快于对照组(P<0.05)。结论:支气管肺泡灌洗术治疗儿童肺炎支原体肺炎可取得良好效果。

DEAH盒解旋酶15对转化生长因子-β_(1)诱导的呼吸道平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨DEAH盒解旋酶15(DHX15)对转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))诱导的呼吸道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响。方法将TGF-β_(1)(20 mg·L^(-1))诱导的ASMCs随机分为对照组、阴性对照组和沉默组。阴性对照组和沉默组细胞分别转染control-siRNA和DHX15-siRNA质粒,对照组细胞不作处理。转染24 h后,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞中DHX15 mRNA相对表达量,细胞计数试剂盒-8实验检测各组细胞增殖能力,Transwell小室实验检测各组细胞迁移能力,Western blot法检测各组细胞中磷酸化p65(p-p65)、磷酸化核因子抑制蛋白(p-IκB)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、磷酸化p38(p-p38)蛋白的表达。结果对照组和阴性对照组ASMCs中DHX15 mRNA相对表达量、细胞增殖能力、细胞迁移能力比较差异无统计学意义(P>0.05);沉默组ASMCs中DHX15 mRNA相对表达量、细胞增殖能力、细胞迁移能力显著低于对照组和阴性对照组(P<0.05)。对照组和阴性对照组ASMCs中p-p65、p-IκB、p-JNK和p-p38蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);沉默组ASMCs中p-p65、p-IκB、p-JNK和p-p38蛋白相对表达量均显著低于对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论干扰DHX15表达可显著抑制TGF-β_(1)诱导的ASMCs的增殖和迁移能力,其机制可能与抑制核因子-κB和丝裂原活化蛋白激酶信号通路有关。

Stomatin样蛋白2通过PI3K通路对儿童哮喘的影响

目的研究Stomatin样蛋白2（STOML2）基因表达在儿童哮喘发病中的作用。方法选择2013年9月-2014年3月在西安市儿童医院（以下简称＂我院＂）呼吸科住院的14例哮喘患儿为研究对象,选择同期在我院进行健康体检的9例正常儿童作为对照。采用RT-q PCR和Western blot方法检测两组儿童外周血单个核细胞（PBMC）中STOML2和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）m RNA和蛋白的表达水平;构建STOML2过表达载体并转染气道平滑肌细胞（ASMC）,MTT法检测细胞的生长,观察STOML2过表达对PI3K表达的影响。结果与正常儿童比较,哮喘患儿PBMC中STOML2 m RNA及蛋白水平显著降低,而PI3K水平显著升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。体外实验结果显示,过表达STOML2会抑制气道平滑肌细胞生长,并抑制PI3K的表达。结论 STOML2在哮喘患儿中低表达,过表达STOML2抑制ASMC的生长,其可能是通过抑制PI3K活性实现的。

下呼吸道感染2310例病原菌学监测及抗生素应用分析

目的:探讨儿童下呼吸道感染的病原菌学分布及抗生素应用情况。方法:对2310例下呼吸道感染患儿呼吸道深部分泌物标本及血液标本进行细菌培养及药物敏感性试验,并对用药合理性进行分析研究。结果:下呼吸道感染比例较大,株致病菌中,革兰阳性菌占32.86%,革兰阴性菌占64.68%。革兰阳性菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占64.89%,耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)占45.43%,耐青霉肺炎链球菌(PRSP)占60.78%,革兰阴性菌中,大肠杆菌对头孢呋辛、头孢哌酮、哌拉西林、头孢他啶、环丙沙星、氨苄青霉素耐药率均大于50%,铜绿假单胞菌对阿莫西林/克拉维酸耐药率为97.83%,所有革兰阴性菌对氨苄青霉素耐药率均在65%以上。结论:儿童呼吸道感染以下呼吸道感染为主,常用抗革兰阳性菌药物的耐药情况较为普遍,革兰阴性菌耐药率也较高。

儿童支气管异物合并肉芽形成的危险因素及并发症分析

目的探讨支气管异物患儿合并气管内肉芽形成的危险因素以及肉芽形成对其它并发症的影响。方法回顾性分析2019年1月至2019年10月西安市儿童医院收治的140例支气管异物患儿的临床资料,将患儿按支气管镜下是否有肉芽形成,分为普通组和肉芽组,分析影响支气管异物患儿气管内肉芽形成的危险因素以及肉芽形成对肺不张、肺气肿及肺部炎症发生率的影响。结果 140例患儿中普通组84例(60%),肉芽组56例(40%)。肉芽组患儿的异物平均滞留时间明显高于普通组患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。肉芽组患儿白细胞计数高于普通组患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。肉芽组患儿植物性异物的比率高于普通组患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,异物滞留时间[(OR)=2.104, 95%置信区间(CI):1.804~2.295,P<0.001],白细胞计数[(OR)=1.545, 95%置信区间(CI):1.445~1.805,P=0.03]为支气管异物患儿肉芽形成的危险因素。肉芽组患儿阻塞性肺炎发生率高于普通组患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。结论异物在气道的滞留时间,机体炎症反应,是支气管异物患儿气管内肉芽形成的危险因素。伴发肉芽形成的支气管异物患儿阻塞性肺炎的发生率高于普通支气管异物患儿。

影响儿童大叶性肺炎支气管镜下治疗次数的危险因素分析

目的分析影响大叶性肺炎患儿多次支气管镜下治疗的危险因素。方法回顾性分析2017年1月~2019年8月在西安市儿童医院呼吸二科住院治疗并行支气管镜下灌洗的122例大叶性肺炎患儿临床资料,将患儿分为单次组和多次组(≥2次),对二组患儿的相关影响因素进行比较分析,并采用Logistic回归分析得到影响大叶性肺炎患儿多次支气管镜下灌洗的危险因素。结果122例患儿中单次组67例,多次组55例。多次组患儿支气管镜前热程(≥10天)的比例明显高于单次组,差异有统计学意义(P<0.05)。胸腔积液、肺不张及白细胞总数升高的发生率上,多次组明显高于单次组(P<0.05)。多次组CRP≥10 mg/L的比例高于单次组,差异有统计学意义(P<0.05)。支气管镜下,多次组粘液栓形成率明显高于单次组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,镜前热程、胸腔积液、肺不张及CRP≥10 mg/L支气管镜下粘液栓形成为大叶性肺炎患儿需多次行支气管镜下灌洗治疗的独立危险因素。结论早期是否积极行支气管镜灌洗治疗、CRP≥10 mg/L、并发症的发生及支气管镜下粘液栓形成,是影响大叶性肺炎患儿镜下治疗次数的重要危险因素。

儿童塑型性支气管炎临床特征性表现及病原学分析

目的探讨儿童塑型性支气管炎(PB)临床特征性表现及病原学分析。方法回顾性研究分析2015年9月至2020年9月在西安市儿童医院呼吸二科住院患儿的病例资料。将临床表现、体征及影像学特点符合“支气管肺炎”和/或“大叶性肺炎”及“肺不张”、并在住院期间行电子支气管镜检查的患儿作为研究对象,共计268例。根据电子支气管镜下结果,将患儿分为塑型性支气管炎组(PB组)及非塑型性支气管炎组(非PB组)。对两组患儿的临床资料、症状、病原学及电子支气管镜结果进行分析。结果PB组55例,非PB组213例。PB组患儿年龄大于非PB组,差异有统计学意义(t=140.293,P<0.05),而性别差异无统计学意义(P>0.05)。PB组患儿发热(χ^(2)=3.217)、气喘(χ^(2)=4.371)、呼吸急促(χ^(2)=9.515)、胸腔积液(χ^(2)=44.792)的发生率及发热热峰(t=6.004)、热程(t=5.877)、病程(Z=-11.267)、支气管镜灌洗次数(Z=-9.717)均高于非PB组,差异均具有统计学意义(P<0.05),但咳嗽在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。PB组肺炎支原体阳性45例,占81.82%,肺炎支原体是最常见的病原体。结论PB患儿以年长儿多见,其最常见的病原体是肺炎支原体,且发热时间、住院时间更长,出现胸腔积液的比例更高,进行支气管镜灌洗次数更多。

儿童难治性肺炎支原体肺炎后发生塑型性支气管炎的影响因素分析

目的探讨儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)后发生塑型性支气管炎的影响因素。方法回顾性选取2017年1月至2020年12月于我院就诊并行支气管镜检查的100例RMPP患儿为研究对象,收集并分析患儿的一般资料、临床表现、实验室指标、影像学表现、支气管镜下表现。根据支气管镜检查结果对患儿进行分组。通过单因素分析及多因素Logistic回归分析探讨RMPP患儿发生塑型性支气管炎的潜在影响因素。结果100例RMPP患儿中,塑型性支气管炎35例(塑型组),非塑型性支气管炎65例(非塑型组)。塑型组的发热持续时间、住院时间长于非塑型组,呼吸急促、胸腔积液患儿占比、支气管镜灌洗次数、白细胞计数、中性粒细胞比例、C反应蛋白及乳酸脱氢酶水平高于非塑型组,淋巴细胞比例低于非塑型组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,发热持续时间、呼吸急促、胸腔积液、白细胞计数、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例、C反应蛋白、乳酸脱氢酶为儿童RMPP后发生塑型性支气管炎的独立影响因素(P<0.05),其中发热持续时间、淋巴细胞比例、C反应蛋白、乳酸脱氢酶的临界值分别为10 d、30%、40 mg/L、450 U/L。结论儿童RMPP后发生塑型性支气管炎的影响因素较多,临床尤其应关注患儿的发热持续时间、淋巴细胞比例、C反应蛋白、乳酸脱氢酶水平,及时调整治疗方案,促进患儿尽快康复。

难治性肺炎支原体肺炎患儿的早期临床特征及相关细胞因子水平变化

目的探讨难治性肺炎支原体肺炎（RMPP）患儿的早期临床特征及相关细胞因子水平的变化。方法回顾性选取2013年12月至2016年12月西安市儿童医院确诊治疗的RMPP患儿50例作为RMPP组，选取同期普通型肺炎支原体肺炎（GMPP）患儿50例作为GMPP组，所有患儿均行胸部X线片和/或CT检查、纤维支气管镜检查和肺泡灌洗等。比较2组临床特征、胸部X线片和/或CT特征、支气管镜特征和肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素6（IL-6）、IL-10和γ-干扰素水平。结果2组发热、咳嗽、白细胞计数升高、C反应蛋白升高等临床特征，肺突变、大叶性肺炎、肺门淋巴结肿大、胸腔积液、肺不张等胸部X线片和/或CT特征及气道黏膜充血肿胀、纵行皱褶、分泌物增多、支气管开口炎性狭窄、管腔软化等支气管镜特征比例比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），但RMPP组管腔肉芽组织增生、气道黏液栓堵塞、黏膜糜烂等支气管镜特征检出率和BALF中IL-6和γ-干扰素水平明显高于GMPP组［16.0%（8/50）比4.0%（2/50）、52.0%（26/50）比26.0%（13/50）、16.0%（8/50）比4.0%（2/50）、（32±5）ng/L比（17±3）ng/L、（11.7±2.1）ng/L比（8.0±1.6）ng/L］，BALF中IL-10水平明显低于GMPP组［（4.5±1.0）ng/L比（7.6±1.2）ng/L］，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论RMPP与GMPP患儿部分支气管镜特征和BALF中IL-6、IL-10、γ-干扰素等细胞因子水平存在明显差异，提示早期检测临床特征及细胞因子水平变化有利于预测RMPP的发生。

护患沟通技巧系统护理在支气管肺炎患儿雾化吸入治疗中的应用及对患儿肺功能的影响

目的探讨护患沟通技巧系统护理在支气管肺炎患儿雾化吸入治疗中的应用效果及对患儿肺功能的影响。方法选取西安市儿童医院2018年2月1日至2019年1月31日收治的支气管肺炎患儿86例为研究对象,按照随机数字表法将其分为两组,每组43例。对照组应用传统的常规护理,研究组在对照组基础上应用护患沟通技巧系统护理。比较两组的治疗效果、满意度和肺功能指标。结果研究组的总有效率高于对照组(P<0.05);研究组护理满意度优于对照组(P<0.05);研究组患儿肺功能指标高于对照组(P<0.05)。结论将护患沟通技巧系统护理应用在支气管肺炎患儿雾化吸入治疗中,可有效提高患儿及患儿家属护理满意度,显著改善患儿的临床症状和肺功能,值得推广应用。

小儿肺炎支原体肺炎与心肌损害的临床相关性

目的探讨小儿肺炎支原体肺炎与心肌损害的相关性。方法对临床诊断为肺炎支原体肺炎的患儿按MP-IgM阳性与否分为MP组及nMP组,各150例,通过心电图、血清心肌酶谱、临床观察等方面进行对比研究,分析其与心肌损害的相关性。结果MP组出现心悸、乏力、早搏、憋气等症状及窦性心动过速、ST-T段特异性改变明显高于nMP组。MP组持续顽固心律失常及心衰的发生率也明显高于nMP组(P<0.05)。血清学监测磷酸肌酸(CK)及其同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)也存在显著性差异(P<0.05)。结论支原体感染所致的心肌损害为肺炎支原体肺炎的常见并发症之一,且近年来其发病率有进一步上升的趋势。有效的抗支原体治疗有利于心肌损害的纠正与预防,激素和质膜稳定剂在肺炎支原体肺炎与早期心肌炎的治疗中有共同的协同作用。

nm23、EGFR和Bcl-2蛋白在肺癌组织中的表达及临床意义

目的:观察nm23、EGFR和Bcl-2在人肺癌中的表达,探讨其与肺癌临床生物学行为的关系。方法:采用免疫组化检测了49例肺癌及癌旁组织中nm23、EGFR和Bcl-2蛋白的表达情况,并对其与肺癌临床生物学行为进行相关分析。结果:在49例肺癌中,EGFR和Bel-2蛋白的阳性表达率分别为51.0%和34.7%,均高于正常肺组织17.5%和12.5%(p<0.05),nm23蛋白的阳性表达率为55.1%,则显著低于正常肺组织87.5%(p<0.01)。在病理分级的高一中分化、低分化和未分化中nm23的阳性表达率分别为82.6%、41.2%和11.1%(p<0.01)。EGFR在非小细胞肺癌(NSCLC)组为61.5%,在小细胞肺癌(SCLC)组为10.0%(p<0.01)。在NSCLC TNM分期中,Ⅰ期+Ⅱ期与Ⅲ+P<0.01)期中EGFR的阳性表达率分别为39.3%和81.8%(p<0.01);病理分级的高-中分化和低分化中EGFR的阳性表达率分别为39.1%和88.2%(p<0.01);在淋巴结转移组为57.9%,无淋巴结转移组为27.3%(p<0.05)。Bcl-2的阳性表达率在NSCLC组为25.6%,在SCLC组为70%,统计学分析差异有统计学意义(p<0.01);在NSCLC组病理分级的高分化、中分化和低分化中Bcl-2阳性表达率分别为62.5%、26.7%和5.89%(p<0.01)。结论:癌基因EGFR、凋亡抑制基因Bcl-2与抑癌基因nm23在肺癌的发生、发展中存在着相互促进作用。

miR-143-3p靶向IL-6R/STAT3通路抑制IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞血管生成

目的探究miR-143-3p在IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞(HLMVEC)血管生成中的作用和机制。方法首先使用100 ng/ml重组IL-6蛋白处理HLMVEC细胞,管腔形成实验分析IL-6对细胞管腔形成数目的影响,Real-time PCR检测IL-6对miR-143-3p和VEGF mRNA表达的影响。Western blot检测VEGF蛋白水平的变化。然后使用miR-143-3p mimics过表达miR-143-3p,按照上述方法检测miR-143-3p对IL-6诱导的管腔形成数目、VEGF mRNA和蛋白表达的影响。此外,使用双荧光素酶报告基因检测法分析miR-143-3p和IL-6R的关系,Real-time PCR检测miR-143-3p过表达对IL-6R mRNA表达的影响,Western blot检测IL-6R、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平的变化。结果 IL-6能够增加管腔形成数目和VEGF的表达,降低miR-143-3p的表达。过表达miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的管腔形成、VEGF、IL-6R和p-STAT3的表达水平,但是不影响STAT3的表达。此外还发现IL-6R是miR-143-3p的一个靶基因。结论 miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的内皮细胞血管生成,这可能是通过抑制IL-6R/STAT3通路发挥作用的。