直接免疫荧光法和实时荧光定量PCR法检测汉坦病毒效果的比较

目的比较直接免疫荧光法（DFA）和实时荧光定量PCR法检测鼠肺汉坦病毒（HV）带毒效果的差异。方法于2012年4-10月在陕西省户县、泾阳县和眉县3个肾综合征出血热（HFRS）高发县的居民区和野外鼠类活动地，采用鼠夹法捕获野鼠和家鼠共479只。解剖取鼠肺，1份鼠肺经冰冻切片后免疫荧光染色检测HV抗原，另1份经抽提组织RNA后应用实时荧光定量PCR法检测HV核酸。比较2种方法的病毒阳性检出率和检测结果的一致性。结果捕获的479只鼠中，包括家鼠105只、野鼠374只。DFA和实时荧光定量PCR两种方法在家鼠肺中均未检出HV，而DFA法检测野鼠带毒率为13．1％（49／374），实时荧光定量PCR法检测野鼠带毒率为14．7％（55／374），差异无统计学意义（X^2=0．402，P=0．526）。对每份鼠肺标本分别检测，DFA法检测鼠肺HV带毒率为10．2％（49／479），实时荧光定量PCR法检测带毒率为11．5％（55／479），两种方法比较差异无统计学意义（X^2=1．286，P=0．257），检测结果Kappa一致性系数（K）为68．2％，两种方法结果有高度一致性（X^2=11．759，P〈0．05）。以DFA法为标准，实时荧光定量PCR法在检测鼠肺HV的灵敏度为77．6％（38／49），特异度为96．1％（413／430）。DFA检测的9个疑似阳性结果中6个被实时荧光定量PCR方法证实，3个被否定。结论与DFA法相比，实时荧光定量PCR法同样可用于检测鼠肺中HV带毒率，而且结果更稳定。

肠道病毒EV71感染后标志物变化特点分析

目的 观察分析手足口病常见病原肠道病毒71型（enterovirus71,EV71）早期检测效果及其随病程进展感染标志物变化特点.方法 整群抽样手足口病住院病例249人及健康对照50人,调查信息,跟踪采样,采集肛拭子和血清标本,分别检测EV71、柯萨奇病毒A16组（coxsackie virus 16 0f groups A,CA16）病毒RNA和免疫球蛋白M（immuoglobulin M,IgM）抗体,录入数据库后用SPSS 13.0进行统计学分析.结果 入院诊断手足口病249人中肠道病毒检出者167人（67.1％）,EV71和CA16双重感染14人（5.6％）,未检出肠道病毒者51人（20.5％）;早期检测患儿肛拭子EV-RNA和血清IgM,其中EV71感染检出效果两法差异无统计学意义（x2=0.01,P=0.928）;病程第3 d EV71-IgM检出超过80％,第6d可达100％,第6～7d抗体滴度达峰值,第8d以后低度下降,检出率降低.结论 手足口病早期实验室病原检测中,EV71-IgM在病程第3d后的检出与病毒RNA检出率符合性较高.