睑缘炎及其相关眼表疾病患者蠕形螨的实验室诊断及结果分析

目的协助临床诊断蠕形螨性睑缘炎及其相关眼表疾病。方法选取2016年4月~7月在西安市第一医院眼科门诊就诊,临床诊断为睑缘炎、干眼和睑缘炎相关角结膜病变(BKC)等眼病患者42例,同期健康体检无眼疾志愿者10例,采用拔取眼部睫毛,加无水乙醇诱导固定,光学显微镜下直接镜检蠕形螨及虫卵的方法进行实验室诊断。结果 42例眼病患者,蠕型螨阳性30例,检出率71%;10例健康志愿者,蠕形螨阳性1例,检出率10%,两组检出率差异有统计学意义(χ~2=10.23,P<0.01)。结论蠕形螨性睑缘炎发病率高,应重视及加强早期实验室诊断,指导临床精准治疗,预防并发症的发生。

半巢式PCR扩增联合基因测序鉴定丝状真菌的实验研究

目的 采用分子生物学方法鉴定痰标本培养分离出的丝状真菌菌种.方法 收集陕西省人民医院检验科2012年2月～5月痰标本分离的丝状真菌菌落20份,采用半巢式PCR联合基因测序法及形态学方法同时鉴定菌种.结果 基因测序法：烟曲霉菌13株,黑曲霉菌3株,土曲霉菌1株,绿色木霉1株,娄地青霉菌1株,淡紫拟青霉菌1株.形态学方法：17株曲霉菌与基因序列分析法结果一致,其余3例未能鉴别出菌种.结论 半巢式PCR扩增联合基因测序鉴定丝状真菌快速、简便、准确,可克服传统表型法鉴定真菌的缺点.

FS-LASIK Xtra治疗中高度近视患者术后2a的矫正效果

目的:评估FS-LASIK Xtra治疗中高度近视患者术后2 a的矫正效果及角膜形态的稳定性。方法:回顾性病例对照研究。纳入2019-08/2020-08在我院拟行屈光手术的中高度近视合并散光患者30例58眼,根据术前角膜地形图中圆锥角膜筛查相关指数行不同手术方式,分为FS-LASIK Xtra组15例29眼,FS-LASIK组15例29眼。术前,术后3 mo,1、2 a观察裸眼视力(UCVA)、最佳矫正视力(BCVA)、等效球镜度(SE)及Sirius三维角膜地形图仪测量的不同直径区域(3、5、7 mm)前后表面角膜曲率。结果:两组患者术后不同时间点UCVA均较术前明显提高(均P<0.01),两组间UCVA和SE比较均无差异(P>0.05)。术后2 a,FS-LASIK Xtra组25眼(86%),FS-LASIK组24眼(83%)残余散光为-0.25-0 D。两组实际矫正SE与预矫正SE均呈正相关(均P<0.05)。两组患者术后3 mo,1、2 a不同直径区域(3、5、7 mm)前后表面角膜曲率均较术前有差异(均P<0.05),术后1、2 a FS-LASIK Xtra组角膜直径3、5 mm后表面曲率均高于FS-LASIK组(P<0.05)。结论:FS-LASIK Xtra治疗中高度近视患者有良好的安全性、有效性及可预测性。

角膜胶原交联方法联合那他霉素抗真菌效果研究

目的:研究角膜胶原交联方法联合那他霉素应用时的体内外抗真菌效果,为临床真菌性角膜炎的治疗提供治疗方法及实验基础。方法:采用黄曲霉菌、茄病镰刀菌、白色念珠菌三种常见致病真菌,实验组分为交联联合那他霉素组、那他霉素联合核黄素组、那他霉素联合紫外照射组、交联组,并用那他霉素组作为对照。将药物涂到有1. 5麦氏浊度的真菌孢子悬液的沙堡弱琼脂培养皿的中心,10min后使用胶原交联仪照射10min,之后28℃培养36h,测量抑菌圈并进行统计学分析。制备兔眼茄病镰刀菌感染模型,按随机数字表法将模型兔随机分为模型对照组、交联治疗组、那他霉素治疗组、交联联合那他霉素治疗组,每组5只;另取5只正常兔按照角膜胶原交联疗法进行照射,5只正常对照。通过前节照相、角膜刮片、共焦显微镜等观察各组治疗结果,并在治疗结束后采用电镜观察角膜超微结构改变情况。结果:体外单独应用角膜胶原交联术,对三种真菌均无效;当交联与那他霉素联合应用时,抗真菌效果均优于对照组,且差异具有统计学意义(P<0. 05);那他霉素与核黄素、那他霉素与紫外线分别联合应用时,抗菌效果与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0. 05)。针对兔真菌感染模型,那他霉素治疗组及交联联合那他霉素治疗组病程约14d,交联治疗组病程约21d;经治疗后,各治疗组均已愈合,各组角膜上皮均无缺损,新生血管较多,角膜内无菌丝;前节照相结果显示,交联联合那他霉素治疗组治疗结果优于其它各治疗组,瘢痕组织较少,角膜愈合较好,病程相对短。结论:角膜胶原交联方法联合那他霉素,可促进角膜愈合,缩短病程,增强抗真菌效果,有望为眼科临床真菌性角膜炎的治疗提供一种新的治疗技术。

儿童与成人干眼临床表现的差异性研究

目的:探讨儿童与成人干眼临床表现的差异。方法:选取2018-06/2019-02在我院眼科门诊就诊的具有干眼主观症状的儿童患者52例52眼(儿童组)和成人患者55例55眼(成人组),进行主观症状问诊,并采用Keratograph 5M非侵入性眼表综合分析仪进行下睑泪河高度(TMH)、首次泪膜破裂时间(BUTf)、平均泪膜破裂时间(BUTave)、泪膜脂质层厚度(LLT)、睑板腺缺失率测量。结果:儿童组患者TMH(0.15±0.04mm)、BUTf(3.22±1.24s)、BUTave(4.27±1.67s)、睑板腺缺失率[0.00%(0.00%,5.03%)]均明显低于成人组[0.20±0.05mm、4.36±1.93s、5.15±1.49s、9.90%(5.30%,18.40%),均P<0.01],但两组患者LLT无差异(72.31±22.20nm vs 68.58±21.05nm,P>0.05)。两组患者BUTf与BUTave均呈正相关,儿童组患者LLT和睑板腺缺失率无相关性(r_s=-0.23,P=0.10),而成人组患者LLT和睑板腺缺失率呈负相关(r_s=-0.28,P<0.05)。结论:儿童与成人干眼在症状、临床表现、检查方面均不同,症状主要为瞬目次数增加,检查主要表现为短BUT,伴随TMH降低,而睑板腺缺失率相对不明显。

配戴离焦RGPCL对高度近视儿童角膜屈光力及散光量的影响

目的:对比观察高度近视儿童配戴离焦硬性透气性角膜接触镜(RGPCL)前后角膜屈光力改变,并分析配戴后镜片对角膜屈光力及散光量的影响。方法:自身前后对照研究。收集2019-06/2020-06在西安市第一医院眼视光中心就诊并验配离焦RGPCL的8~12岁高度近视儿童30例60眼。使用TMS-4N角膜地形图仪测量基线及戴镜0.5、1a时戴镜状态下角膜切向屈光力,分析角膜鼻侧(N)、颞侧(T)、上方(S)和下方(I)角膜最大屈光力值及中央顶点处角膜屈光力改变情况,同时以1mm为间隔采集前述4个方位角膜屈光力以及角膜顶点处屈光力,采集范围为1~4mm,分析戴镜前后各点位屈光力变化情况。戴镜0.5,1a时后要求停戴1wk后复测眼轴、屈光度和角膜地形图,分析戴镜后较基线时眼轴、等效球镜度、散光和角膜屈光力等改变情况。结果:配戴离焦RGPCL时鼻侧(N)、颞侧(T)、上方(S)和下方(I)的角膜最大屈光力在0.5、1a时较戴镜前均显著增加,与角膜顶点处屈光力相比均表现为正相对屈光力,与戴镜前的负相对屈光力相比具有显著差异。在戴镜0.5、1a时复诊时戴镜状态下角膜相对周边屈光力朝正屈光力方向改变,除T1点位周边负屈光力增加外,其余各轴向各点位周边屈光力均显著增加。配戴0.5a后角膜陡K值变平0.11±0.10D,simK值减少0.20±0.18D,1a后角膜陡K值变平0.10±0.12D,平均K值变平0.02±0.05D,simK值减少0.16±0.13D。戴镜0.5、1a时后角膜平K较基线变化无差异。结论:配戴离焦RGPCL状态下角膜最大屈光力较角膜顶点处均表现为正相对屈光力,且4条轴向上各点位角膜相对周边负屈光力均由负值转变为正值。戴镜1a内眼轴和等效球镜度均较基线时增加,而散光量减少,角膜屈光力呈陡K变平趋势。

原发性视网膜色素变性的低视力患者配戴琥珀色滤光镜前后视觉功能变化

目的:对比观察原发性视网膜色素变性(RP)的低视力患者在配戴琥珀色滤光镜前后的视觉功能变化。方法:自身前后对照研究。收集2021-08/2022-03就诊于西安市第一医院眼科门诊诊断为原发性RP的低视力患者30例60眼。记录配戴琥珀色滤光镜前后裸眼远视力(UCDVA)、最佳矫正远视力(BCDVA)、裸眼近视力(UCNVA)、最佳矫正近视力(BCNVA)、视野和FM-100色觉,并分别在明室环境、暗室环境和暗室伴眩光环境进行对比敏感度检查并记录,分析配戴前后上述视功能参数的变化。结果:配戴琥珀色滤光镜后UCDVA和BCDVA均优于配戴前(t=-2.32,P<0.001;t=-6.77,P<0.001),而UCNVA和BCNVA在戴镜前后差异无统计学意义。戴镜后的视野指数(VFI)低于配戴前(t=8.62,P<0.001)、视野平均缺损值(MD)大于配戴前(t=7.73,P<0.001),FM100色棋检查显示TES和多个分区PES均高于戴镜前(P<0.001)。配戴后明室环境、暗室伴眩光环境下各频段CS值较配戴前提高(P<0.001),暗室不伴眩光环境下各频段配戴琥珀色滤光镜前后差异无统计学意义。结论:原发性RP的低视力患者配戴琥珀色滤光镜后UCDVA和BCDVA提高,UCNVA和BCNVA无改变,而视野和辨色能力较戴镜前更差。明室环境及暗室伴眩光环境对比敏感度较戴镜前改善,而暗室不伴眩光环境对比敏感度无明显变化。

超声乳化IOL植入联合房角分离术治疗原发性慢性闭角型青光眼

目的:探讨超声乳化人工晶状体(IOL)植入联合房角分离术治疗原发性慢性闭角型青光眼的有效性。方法:纳入2018-05/11于西安市第一医院眼科住院的原发性慢性闭角型青光眼合并白内障患者共33例35眼,对术前和术后6mo的最佳矫正视力、眼压、中央前房深度、房角开放距离500、小梁虹膜夹角、房角关闭或粘连的范围进行比较。结果:患者34眼(97%)术后最佳矫正视力较术前提高;27眼(77%)术后不需给予任何降眼压药物,眼压维持在21mmHg以下;术前前房深度、房角开放距离500、小梁虹膜夹角平均值分别为2.04±0.31mm、0.132±0.033μm、15.44°±3.10°,显著小于术后的平均值(3.26±0.29mm、0.407±0.038μm、34.26°±3.60°,均P<0.01);术后房角关闭或粘连范围较术前减少(P<0.05)。结论:超声乳化人工晶状体植入联合房角分离术是治疗原发性慢性闭角型青光眼的有效方式。

FS-LASIK两种光学区直径术后视觉质量的比较

目的:探讨FS-LASIK设置6.0mm和6.5mm两种光学区直径对术后视觉质量的影响。方法:本研究为前瞻性研究。选取行FS-LASIK手术的患者25例50眼,随机预设置患者双眼光学区切削直径6.0mm或6.5mm,并按光学区直径分为6.0mm及6.5mm两组。术后3mo对两组患者进行Sirius三维眼前节分析系统测量角膜高阶像差(包括3、5、7mm瞳孔直径下的总高阶像差、球差、彗差及三叶草差)以及OQASⅡ视觉质量分析仪比较MTF截止空间频率(MTF cut off)、斯特列尔比值(SR)和客观散射指数(OSI)、不同模拟对比度视力(OV100%、OV20%、OV9%),并对两组患者进行OSDI干眼相关视觉质量主观问卷调查。结果:术后3mo,3mm瞳孔直径下,两组总高阶像差、球差、彗差及三叶草差无差异(均 P >0.05);5mm瞳孔直径下,两组总高阶像差、彗差、三叶草差无差异(均 P >0.05),但球差有差异( P <0.05);7mm瞳孔直径下,两组总高阶像差、球差均有差异(均 P <0.05),但彗差、三叶草差无差异(均 P >0.05)。两组的OSDI问卷评分及OQASⅡ客观视觉质量各项参数均无差异(均 P >0.05)。结论:6.5mm光学区直径FS-LASIK术后暗环境的高阶像差较小,但术前设置6.0mm光学区直径或6.5mm光学区直径均能获得良好的主观及客观视觉质量。

影响角膜塑形镜定位的因素分析

目的:分析影响角膜塑形镜定位的相关因素。方法:前瞻性研究。选取2014-07/2016-12于我院配戴角膜塑形镜的近视患者88例88眼,评估戴镜后1mo角膜塑形镜定位情况,并分析角膜塑形镜偏位程度与戴镜前年龄、等效球镜度、角膜散光、e值、角膜陡峭曲率和平坦曲率、角膜前表面曲率不对称指数的关系。结果:根据本课题组制定的角膜塑形镜定位分级方法,戴镜后1mo本组患者中Ⅰ级者24眼,Ⅱ级者26眼,Ⅲ级者25眼,Ⅳ级者13眼。不同分级患者戴镜前等效球镜度、角膜陡峭曲率和平坦曲率均有差异(P<0.05)。多元线性回归分析显示,角膜塑形镜偏位程度与戴镜前等效球镜度呈负相关(P<0.01),与其它因素相关性较弱。结论:戴镜前等效球镜可能是影响角膜塑形镜偏中心定位的主要因素。

16S rRNA基因序列法对30例泪囊炎致病细菌的鉴定

背景泪囊炎是眼科常见的感染性疾病，对泪囊炎致病菌检测的金标准为培养法，在培养法的基础上结合分子生物学的检测方法可以更精确地鉴定出致病菌的种属，但目前眼科领域类似的研究资料比较缺乏。目的采用PCR法扩增细菌核糖体16SrRNA基因序列鉴定泪囊炎病原细菌的种属。方法取10例质控标准菌样本，利用PCR的加热过程使细菌核酸释放，扩增出细菌16SrRNA基因序列，测序后与GenBank中的基因序列进行比对，鉴定出细菌的种属信息，与生化鉴定法结果进行对比，确定16SrRNA基因检测方法的可靠性。取30例泪囊炎患者泪囊分泌物培养出的细菌，利用上述方法进行病原菌鉴定。结果10例质控标准菌样本经PCR扩增后其产物序列的鉴定结果与生化鉴定法结果完全一致。30例泪囊炎病原细菌标本中，16SrRNA基因序列法鉴定结果为表皮葡萄球菌13例，沃氏葡萄球菌2例，人葡萄球菌1例，麦氏棒杆菌5例，肺炎链球菌3例，蜡状芽孢杆菌2例，藤黄微球菌1例；卡他莫拉菌1例，奥斯陆莫拉菌1例，铜绿假单胞菌1例。结论通过PCR扩增细菌核糖体16SrRNA基因序列鉴定泪囊炎病原细菌种属的方法准确性高，特异性强。

鼻内窥镜下泪囊鼻腔吻合置管术治疗人工鼻泪管取出后复发性泪囊炎

目的:探讨人工鼻泪管取出后复发性泪囊炎泪囊大小的比例分布情况及鼻内窥镜下泪囊鼻腔吻合置管术治疗人工鼻泪管取出后复发性泪囊炎的临床疗效。方法:回顾性研究。2018-01/2019-11于我院眼科就诊的人工鼻泪管取出后复发性泪囊炎患者73例73眼,收住院后均行泪囊造影测量泪囊大小,并于全身麻醉下行鼻内窥镜下泪囊鼻腔吻合置管术,分析术后2wk,1、3、6mo造瘘口面积及有效率。结果:纳入患者中大泪囊(横径>5mm)者13眼(18%),中泪囊(横径2~5mm)者26眼(36%),小泪囊(横径<2mm)者34眼(47%)。术后2wk,1、3、6mo泪囊造瘘口面积有差异(P<0.05);术后6mo造瘘口面积较术后2wk,1、3mo分别显著减少了14.08±0.68、10.49±0.75、0.31±0.23mm2(均P<0.05);术后2wk,1、3、6mo有效率分别为100%、93%、88%、85%。结论:人工鼻泪管取出后复发性泪囊炎泪囊大小以中、小泪囊为多,鼻内窥镜下泪囊鼻腔吻合置管术治疗人工鼻泪管取出后复发性泪囊炎疗效肯定。

渗透压对角膜上皮细胞的影响及牛磺酸对高渗环境细胞的保护作用

目的观察渗透压对体外培养的兔角膜上皮细胞的影响及牛磺酸对高渗环境细胞的保护作用,为人工泪液的处方制定提供理论依据。方法采用分离培养的兔角膜上皮细胞,分为低渗组(143,229和257 mOsm·L^-1)、等渗对照组(286 mOsm·L^-1)和高渗组(315,343和429 mOsm·L^-1),用不同渗透压的培养液作用3 h后,换回正常培养液培养3 d,记录作用3 h及恢复培养3 d时的细胞形态,并用MTT法检测作用3 h、恢复培养1 d和恢复培养3 d后的细胞活性。在正常培养液286 mOsm·L^-1中加入牛磺酸培养细胞24 h后,换为429 mOsm·L^-1的高渗培养液培养3 h后,换回含牛磺酸的等渗培养液恢复培养1 d,倒置显微镜下记录作用3 h及恢复培养1 d时的细胞形态,并用MTT法检测细胞活性。结果高渗环境会导致细胞活性降低,甚至死亡;低渗环境会改变细胞形态及活性。257 mOsm·L^-1渗透压组与等渗对照组相比,在作用3 h及恢复培养1和3 d后细胞形态及细胞活性差异无统计学意义。含有不同浓度牛磺酸培养基的各组细胞也有轻度肿胀,高渗培养基作用3 h后以及恢复正常培养基培养1 d后,细胞活性差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论泪液高渗透压会造成眼表损伤。应用渗透压为257 mOsm·L^-1的人工泪液,在对正常细胞无影响的条件下,可降低干眼患者泪液的高渗透压,有助于干眼病的治疗。牛磺酸作为细胞保护剂,可降低高渗透压对细胞的损害,在干眼病治疗方面,具有很好的应用前景。

原发性翼状胬肉患者泪液中TNF-α和IFN-γ的表达

目的:检测原发性翼状胬肉患者泪液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、γ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)的含量,探讨翼状胬肉发生的泪液机制。方法:用酶联免疫吸附方法(ELISA)对单眼原发性翼状胬肉患者60例60眼(静止期组30例30眼、活动期组30例30眼)和正常对照组健康志愿者30例30眼泪液中TNF-α、IFN-γ的含量进行定量测定,并进行统计学分析。结果:原发性翼状胬肉患者患眼泪液中TNF-α、IFN-γ的含量与正常对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。原发翼状胬肉患者患眼泪液中TNF-α含量均高于正常对照组,而IFN-γ含量均低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:泪液中TNF-α、IFN-γ含量的变化在促进翼状胬肉的发生发展中可能发挥重要作用,为原发性翼状胬肉的药物治疗提供了新思路。

影响角膜塑形镜偏中心定位的相关因素分析

目的探究影响角膜塑形镜偏中心定位的相关因素。方法前瞻性研究。选取配戴角膜塑形镜近视患者76例142眼;戴镜前患者年龄为8~16岁,等效球镜度为-0.25^-6.00 D。142眼患者中Ⅰ级偏位者(中心定位)51眼、Ⅱ级偏位者48眼、Ⅲ级偏位者30眼、Ⅳ级偏位者13眼。不同偏位分级组间的差异性分析使用单因素方差分析,非参数秩和检验分析不同年龄分组、不同等效球镜度数分组、不同角膜散光度分组中角膜塑形镜偏位情况分布的差异性。使用Spearman相关分析方法分析等效球镜度、角膜散光度、角膜离散系数、角膜曲率、年龄和偏位程度的相关性。结果本研究纳入患者年龄为(10.78±2.12)岁,等效球镜度为(-3.78±1.45)D,角膜曲率为(43.39±1.21)D,角膜离散系数为0.51±0.13。单因素方差分析示,不同偏位分级组间戴镜前等效球镜度的差异有统计学意义(F=9.398,P<0.001)。相关分析显示,戴镜前等效球镜度和角膜塑形镜偏位程度呈负相关(r=-0.311,P<0.001),其余因素,如角膜散光度、角膜离散系数、角膜曲率、年龄和角膜塑形镜偏位程度均无相关性。结论戴镜前等效球镜可能是影响角膜塑形镜治疗后出现偏中心定位的主要因素。

吉西他滨对兔眼晶状体后囊膜混浊的抑制作用

目的研究眼内应用不同浓度的吉西他滨对兔眼晶状体后囊膜混浊(PCO)的抑制作用,初步探讨吉西他滨在眼内应用的安全性及有效性。方法 36只3个月龄新西兰白兔采用随机单位组设计分组法分为A、B、C三组,每组12只。A组为吉西他滨5 mg/m L治疗组,B组为吉西他滨10 mg/m L治疗组,C组为空白对照组;所有的实验动物均进行白内障囊外摘除+人工晶体植入术;术后监测角膜水肿,对后囊膜混浊程度及角膜内皮细胞数量进行分析。结果术后第1天、第3天,三组兔角膜均出现水肿,组间比较水肿差异无统计学意义(P>0.05),而术后第5天三组兔角膜水肿均吸收;后囊膜混浊术后第2周出现,术后30 d后囊膜混浊程度分级,A、B组后囊膜混浊分布于1级和2级,而C组多分布于2级和3级,A组与B组间比较差异无统计学意义(P>0.05),而A组和B组分别与C组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);A、B和C三组术后角膜内皮细胞数量低于术前,角膜内皮损失量分别为(182.0±65.6)个/mm^2、(195.2±60.4)个/mm^2和(158.8±58.6)个/mm^2,三组手术前后角膜内皮细胞损失量组间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与空白对照组比较,吉西他滨治疗组可以有效抑制后囊膜混浊的发生;5 mg/m L吉西他滨溶液可作为预防后发性白内障的药物。

复方倍他米松对异种角膜板层移植术后免疫排斥反应的影响

目的:观察结膜下注射复方倍他米松对鸵鸟-兔眼板层角膜移植术后免疫排斥反应的缓释治疗作用。方法:16只6周龄健康新西兰白兔角膜(单眼)行板层角膜移植术,植片应用鸵鸟脱细胞的角膜基质,术后分成两组,实验组术毕及术后结膜下注射复方倍他米松注射液(每隔7d一次),对照组术毕及术后结膜下注射地塞米松磷酸钠注射液(每隔7d一次)。分别于术后1、2wk,1、2mo取兔角膜组织做石蜡包埋切片,进行HE染色观察组织特点,同时进行间接免疫荧光法检测CD4^+、CD8^+T淋巴细胞的变化。结果:术后2mo,实验组角膜植片在位,并保持透明,新生血管极少,组织切片HE染色和间接免疫荧光染色结果显示,仅见少许中性粒细胞浸润,未见CD4^+、CD8^+T淋巴细胞;对照组炎症反应明显,角膜植片混浊,组织切片HE染色和间接免疫荧光染色结果显示,炎性反应以中性粒细胞浸润为主,可见CD4^+、CD8^+T淋巴细胞。结论:复方倍他米松作为长效缓释剂可有效抑制鸵鸟-兔板层角膜移植术后免疫排斥反应,延长植片的存活时间。

人角膜基质间充质干细胞的分离培养及表型鉴定

目的建立人角膜基质间充质干细胞(HCS-MSC)体外分离培养、传代和鉴定等方法。方法无菌条件下,取眼科临床角膜移植术后剩余的供体角膜缘组织,去除上皮和内皮组织,将基质组织切成1mm×2mm的组织块,采用无动物源性血清的间充质干细胞培养液进行组织块贴壁法培养,倒置显微镜下动态观察细胞的生长形态及贴壁状态,将传代培养后的第三代细胞采用流式细胞分析法进行表型鉴定,液氮冷冻保存。结果采用人角膜缘基质组织块贴壁法培养,于培养后第7天开始向周围呈放射状长出细胞,14天左右长满培养皿,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于2~4天达90%融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90,CD29和CD105阳性率>95%,CD34和CD-HLA-dr阳性率<3%。结论采用人角膜缘基质组织可分离培养出间充质干细胞,为角膜组织修复、重建及对抗免疫排斥反应等奠定基础。

鸵鸟去细胞异种角膜基质载体异位移植对BALB/c小鼠外周血T细胞亚群的影响

背景 鸵鸟去细胞角膜基质具有与人角膜基质相似的天然结构,有望成为直接应用或构建生物角膜理想的载体材料之一. 目的 用鸵鸟角膜制备去细胞基质载体,研究其免疫原性,为产业化开发早日用于临床提供实验基础.方法 收集新鲜鸵鸟和猪眼球各20个,采用低温冷冻联合酶消化及干燥剂脱水法制备鸵鸟及猪去细胞角膜基质载体,用Co^60照射法进行消毒.按随机数字表法将雄性BALB/c小鼠45只随机分为伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜基质组,伪手术组小鼠仅制作囊袋,不植入异种角膜基质片,其余两组分别取干燥脱水法制备的猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体（复水后每片湿质量为10 mg）异位植入BALB/c小鼠背部皮下,术后观察伤口愈合情况,并分别于术后7、14、28 d获取BALB/c小鼠外周血,进行免疫荧光标记及流式细胞仪分析,比较两种异种角膜基质对小鼠CD4^＋、CD8^＋、CD25^＋表型的动态影响.结果 猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体小鼠植入处皮肤无红肿及渗出,伤口愈合良好.术后7、14和28 d,伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜基质组外周血中CD4^＋细胞百分率的差异均无统计学意义（F=0.74,P=0.50;F=0.39,P=0.05;F=3.46,P=0.58）;外周血中CD8^＋细胞百分率的差异均无统计学意义（F=1.75,P=0.21;F=1.14,P=0.35;F=0.78,P=0.48）;外周血中CD25^＋细胞百分率差异亦均无统计学意义（F=0.52,P=0.61;F=3.53,P=0.62;F=2.42,P=0.13）.结论 鸵鸟去细胞角膜基质载体的免疫原性低,具有重要的开发价值.

渗出性年龄相关性黄斑变性患者玻璃体液中VEGF的改变及与炎症的关系

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在渗出性年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,ARMD)患者玻璃体液中的改变及与炎症的关系。方法:纳入2016-09/2017-09于我院就诊的渗出性ARMD患者61例61眼作为观察组,另纳入特发性黄斑裂孔(idiopathic macular hole,IMH)患者25例25眼作为对照组。抽取两组患者玻璃体液0.5mL,检测VEGF、白介素-10(IL-10)及白介素-6(IL-6)的水平,并分析VEGF与炎症介质的关系。结果:观察组患者玻璃体液内VEGF及IL-6水平均显著高于对照组患者(t=32.530、8.443,均P<0.01)。两组患者玻璃体液IL-10水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析显示,以460.6pg/mL为截点值,VEGF鉴别ARMD和IMH的敏感性为84.00%,特异性为93.44%,曲线下面积为0.879,优于IL-6。观察组患者玻璃体液VEGF水平与IL-6呈显著正相关关系(r=0.787,P<0.01)。结论:渗出性ARMD患者玻璃体内VEGF水平显著升高,并与炎症呈正相关,且VEGF水平对于鉴别IMH有一定价值。