二甲双胍治疗与结核病发病的两样本孟德尔随机化分析

目的:以孟德尔随机化方法探讨二甲双胍治疗与结核病发病之间的关系。方法:以二甲双胍治疗作为暴露变量、以结核病发病作为结局变量搜索MR Base在线数据库(http://app.mrbase.org),使用一组公开可用的全基因组关联研究(GWAS)对数据进行汇总,并采用逆方差加权(IVW)、加权中位数和MR-Egger回归分析两个样本(二甲双胍治疗样本:462933例,病例组:11552例,对照组:451381例;结核病发病样本:212453例,病例组:549例,对照组:211904例)的孟德尔随机化关联性,采用Cochran’s Q统计量和I2统计量评价单核苷酸多态性(SNP)之间的异质性。采用“留一法”敏感性分析和漏斗图验证结果的可靠性。结果:从GWAS中筛选出40个在全基因组水平上与二甲双胍治疗显著相关的独立的SNP作为工具变量,168个与结核病发病显著相关的独立的SNP。逆方差加权分析显示,二甲双胍治疗与结核病发病之间存在显著的正相关性(P=0.022);MR-Egger回归分析发现,定向多效性不太可能影响结果(截距=-0.043,P=0.394),没有证据表明二甲双胍治疗与结核病发病之间存在直接关联性(P=0.150);但加权中位数方法分析支持二甲双胍治疗与结核病发病之间存在正相关性(P=0.010)。逆方差加权和MR-Egger分析均未发现异质性(Q=46.890,I2=0.168,P=0.175;Q=45.990,I2=0.174,P=0.181),增加了孟德尔随机化分析估计的可靠性。“留一法”敏感性分析发现,孟德尔随机化整体估计结果稳定,没有出现显著偏差,结果具有可靠性。漏斗图也未显示不对称,不存在定向多效性,支持结果的稳健可靠。结论:经异质性和敏感性检验,通过逆方差加权、加权中位数和MR-Egger回归3种分析方法获得的孟德尔随机化结果支持二甲双胍治疗与结核病发病风险之间的正相关性。

中药治疗肺结核的用药规律及作用机制预测

目的探索中药治疗肺结核的用药规律,并探讨高频药物的作用机制。方法通过中国知网数据库和万方医学网检索中文文献,检索词为"肺结核""中药";通过PubMed数据库检索外文文献,检索词为"tuberculosis""traditional Chinese medicine";检索时间限定为1998年1月1日至2018年12月31日。共检索到相关文献512篇(中文文献405篇,英文文献107篇),最终纳入363篇(中文文献352篇,英文11文献篇)。运用Rapidminer软件进行信息提取,探索中医治疗肺结核的核心中药、常用配伍组合,分析用药规律及药物联用情况。采用BATMANTCM数据库获取高频药物的潜在活性成分及作用靶点,采用DisGeNET数据库、治疗靶点数据库(Therapeutic Target Database,TTD)及GeneCards数据库预测和筛选核心中药治疗肺结核的作用靶点,并对药物靶点和疾病靶点进行匹配。采用DAVID数据库对潜在靶点进行GO(Gene Ontology)生物功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析。结果中药治疗肺结核常用补虚药(663次),其次为活血化瘀药(403次)及清热药(325次),出现频次最多的药物为甘草(122次),其次为当归(102次)、生地(99次)、白芍(74次)。配伍组合频次最高的两两药对是甘草-当归(70次),其次为甘草-生地(52次);3味药组合出现频次最高的是甘草-当归-生地(37次),4味药组合出现频次最高的是甘草-当归-生地-白芍(24次)。在生地、白芍配伍时当归也出现的概率为95.0%。筛选出甘草、当归、生地和白芍等4味高频次中药抗结核关键靶点基因92个,可能是通过癌症通路(14个基因)、白细胞跨内皮迁移(13个基因)、自然杀伤细胞介导的细胞毒性(10个基因)、ErbB信号通路(10个基因)等来发挥抗结核作用。结论肺结核的治疗多以补虚药、活血化瘀药、清热药为主,临床治疗可与甘草、当归、生地、白芍等药配伍使用;高频次药物甘草、当归、生地、白芍治疗肺结核的作用机制可能是通过癌症通路、白细胞跨内皮迁移、自然杀伤细胞介导的细胞毒性、ErbB信号通路来实现。

雷帕霉素联合2-DG对多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响

背景多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是血液系统第二常见的恶性肿瘤,新药时代使骨髓瘤患者的生存得到极大改善,但仍不可治愈,需要探索新的治疗方法以进一步提高骨髓瘤的治疗效果。目的研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂雷帕霉素(rapamycin,Rapa)联合糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对体外培养人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞周期和凋亡的影响。方法CCK-8法分析两药单独应用及联用对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖和毒性的影响,并通过CompuSyn软件计算合用指数(combination index,CI);利用流式细胞术检测Rapa和2-DG单药及联合作用下对骨髓瘤细胞周期和凋亡的影响;Western blot检测Rapa和2-DG单药及联合作用下骨髓瘤细胞周期调控分子CyclinD1、凋亡相关指标P53、Bax、Bcl-2的表达。结果CCK-8法显示多种不同浓度组合下Rapa联合2-DG作用48 h有显著的抗骨髓瘤协同作用,其CI值介于0.6~0.8,其中Rapa(50 nmol/L)和2-DG(0.5 mmol/L)合用的CI值为0.642,显示出很好的协同作用;流式细胞术显示联合应用Rapa(50 nmol/L)和2-DG(0.5 mmol/L)较空白对照组和单药组使细胞周期阻滞在G0/G1期、S期的比例下降,凋亡率明显升高(P均<0.05);Western blot结果显示Rapa(50 nmol/L)和2-DG(0.5 mmol/L)联用组促凋亡指标P53、Bax等表达增加,凋亡抑制指标Bcl-2表达下降(P均<0.05)。结论Rapa和2-DG联合应用可显著抑制RPMI8226细胞增殖,并显著增加其细胞凋亡,显示出较好的协同作用,对于进一步探索Rapa和2-DG在多发性骨髓瘤中的应用有一定的启示作用。