免疫聚合酶链反应新技术的建立及其在消化道肿瘤血清诊断中的应用

本研究报道了以聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）的建立及在检测非核酸物质─肿瘤相关抗原的应用。首先制备了肿瘤单克隆抗体。重组ＤＮＡ联合体，（ＭＧ或ＭＣ－ＰＸＪ１９）以此将抗原抗体反应的特异性同ＰＣＲ技术的高敏感性相结合，建立了免疫聚合酶链反应技术（免疫ＰＣＲ技术），胃癌卑抗（ＭＧ系列）及结肠癌单抗（ＭＣ系列）均为本室制备。基础研究中以该技术检测胃印戒细胞癌株ＫＡＴＯⅢ上肿瘤相关抗原，并与ＥＬＩＳＡ法比较其敏感性，结果表明，ＫＡＴＯⅢ细胞数目在２０个时即可出现阳性结果，敏感性较ＥＬＩＳＡ法高出１０倍。若以０．２５％戊二醛固定相同数量（２×１０６／ｍｌ）ＫＡＴＯⅢ细胞后加入ＭＧ－ＰＸＪ１９嵌合体及单独ＭＧ分别以免疫ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ法进行检测，免疫ＰＣＲ检测结果呈阳性所需ＭＧ－ＰＸＪ１９为３．８×１０－１４ｍｏｌ，而ＥＬＩＳＡ法为３．０×１０－１１ｍｏｌ。临床研究中以该技术分别检测了４１６例胃癌、４６例结肠癌患者，其血清诊断阳性率分别为８３．３％及７２．９％，明显高于其它检测方法。将ＰＣＲ扩增产物进行定量研究表明，胃癌伴发转移者明显高于不伴有转移及早期癌肿患者。此外该方法还可用于高危人群普查，胃癌术后监测等。总之，免疫?

MDR相关性单克隆抗体MGr－1逆转胃癌细胞耐药的体外研究

目的：研究胃癌细胞耐药相关性单克隆抗体ＭＧｒ－１对耐长春新碱胃癌细胞（ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ）多药耐药性（ＭＤＲ）的影响。方法：用ＭＴＴ法检测阿霉素的细胞毒性；用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积及潴留。结果：ＭＧｒ－１能明显逆转ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ细胞对阿霉素的耐药性（Ｐ＜０．０１），并可增加ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ细胞内阿霉素的蓄积（Ｐ＜０．０１）及潴留（Ｐ＜０．０１）。结论：ＭＧｒ－１具有通过增加细胞内药物蓄积及潴留逆转ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ细胞耐药性的功能。提示ＭＧｒ－１所对应的细胞膜抗原可能为一种新的有活性功能并与ＭＤＲ相关的分子。

经颈内静脉肝内门腔静脉分流术治疗Budd-Chiari综合征

目的探讨经颈静脉肝内门腔静脉分流术(TIPS)治疗Budd-Chiari综合征(BCS)的疗效。方法本组14例患者经影像学检查确诊为BCS,因进行性肝功能损害,或严重门脉高压并发症(顽固性腹水,食管胃底静脉曲张上消化道出血),或广泛肝静脉闭塞而行TIPS术治疗。其中混合型8例,肝静脉型5例,肝静脉广泛闭塞型1例。TIPS术中对于下腔静脉、肝静脉的不同情况,灵活选择肝静脉或下腔静脉穿刺点进行穿刺,7例从肝静脉开口处行门静脉穿刺,建立门-腔静脉分流道,4例从下腔静脉直接穿刺门静脉分支,3例经皮穿刺开通肝右静脉后再经肝右静脉穿刺门静脉。术后对分流道支架开通情况进行长期随访。结果14例手术均获成功,门静脉压力由术前平均(4.9±1.4)kPa,降至术后(3.2±1.5)kPa,术后随访5～64个月,2例因支架狭窄分别于术后13、24个月再发上消化道出血,行分流道球囊扩张治疗,术后恢复良好。结论TIPS适用BCS合并有进行性肝功能损害或门静脉高压引起的上消化道出血、顽固性腹水的治疗。对于已行下腔静脉或肝静脉成形术后再发或加重的门静脉高压患者亦为适应证,但手术难度增加。

血浆及乙状结肠粘膜中CCK、SS的含量与肠易激综合征的关系

采用放射免疫分析法检测24例正常人及26例肠易激综合征(IBS)患者血浆及乙状结肠粘膜中胆囊收缩素(CCK)和生长抑素(SS)的含量,探讨此两种激素在IBS中的可能作用及临床意义。结果:IBS组血浆中CCK、SS的含量明显升高(P<0.05);乙状结肠粘膜中CCK的含量两组无明显差别(P>0.2);SS的含量痛秘型IBS(腹痛便秘为主)显著高于痛泻型IBS(腹痛腹泻为主)(P<0.05),痛泻型IBS显著高于正常人(P<0.05)。结果提示CCK和SS在IBS的疾病过程中可能有一定作用,建议在临床实验诊断中验证它们作为IBS诊断标志的可能性。

血清胃泌素对老年人慢性萎缩性胃炎的诊断

目的 探讨老年慢性萎缩性胃炎 (Chronicatrophicgastritis,CAG)患者血清胃泌素的变化及其与幽门螺杆菌感染之间的关系 ,将胃泌素作为血清学的诊断标志物 ,用于老年CAG的诊断。 方法 12 0例因消化不良行胃镜和活体组织病理检查的患者 ,根据病理结果分为正常组、胃炎组、轻度、中度和重度萎缩组共 5组。ELISA方法检测血清基础胃泌素、幽门螺杆菌IgG抗体和蛋白刺激后血清胃泌素。胃泌素增加量为刺激后胃泌素与基础胃泌素之差。 结果 幽门螺杆菌IgG抗体阳性 74例 ,其中CAG患者阳性 5 3例。血清基础胃泌素、刺激后胃泌素和胃泌素增加量与粘膜病变程度呈负相关。幽门螺杆菌感染可使CAG患者的基础胃泌素的水平升高。胃泌素增加量诊断CAG的受试者工作特征 (ROC)曲线下面积是 0 918( 95 %CI :0 871～ 0 96 5 ) ,临界值为 5 5 pg/ml,灵敏度和特异度分别为 89%和 84 %。 结论 血清胃泌素增加量可做为诊断CAG的敏感标志物 ,对老年人CAG初始筛选有一定意义 ,是内镜和组织活检的有效补充。

用随机肽库筛选胃癌相关抗原MGb2-Ag模拟肽表位

的 运用肽库筛选技术寻找胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２ 所识别的胃癌相关抗原的短肽模拟表位。方法 以胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２ 作为筛选配基，对呈现于噬菌体衣壳蛋白ｐⅧ上的两个九肽库进行了亲和富集和免疫筛选；阳性克隆用荧光标记和硝酸纤维素膜斑点印迹证实结合活性；随机抽取部分阳性克隆进行了ＤＮＡ 测序分析。结果 经ＤＮＡ 测序分析推导出相应的氨基酸序列并加以比较分析，得到具有保守性的表位信息。结论 具有相对保守性的ＶＣＸＸＤＧＶ 可能为胃癌单克隆抗体ＭＧｂ２所识别的表位基序。

体表小肠电检测方法的探讨

目的探讨体表检测小肠电的方法和肠易激综合征（ＩＢＳ）患者体表小肠电的主频有无变化。方法应用自适应滤波方法通过自行设计的生物电检测分析系统检测正常对照组２４例及ＩＢＳ组２６例受检者的小肠体表电活动。结果体表检测小肠电活动波形清晰；经功率谱计算对照组和ＩＢＳ组小肠体表电的主频分别为１０．８８±０．７０周次／分（ｃｐｍ）和１１．０３±０．８４ｃｐｍ，范围均为９－１２ｃｐｍ，两组比较ｐ＝０．１０６。结论本实验方法可在体表清晰地记录小肠电活动，ＩＢＳ患者空腹状态下体表小肠电主频可能与正常人一致。