复合凋亡通路介导的水飞蓟宾抑制膀胱癌的动物实验研究

目的 探讨水飞蓟宾（Silibinin）对荷人膀胱癌细胞5637裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及其机制.方法 取培养于体外的对数生长期的人膀胱癌细胞5637接种于裸鼠右后腿背侧皮下,建立裸鼠移植瘤模型,通过口服给予不同剂量的水飞蓟宾（0、50、100、200 mg/kg）后定期观察并测量各组肿瘤体积大小,给药一定时间后处死裸鼠,取出肿瘤组织,称重.采用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率,采用Western blot法及免疫组织化学法检测肿瘤组织内凋亡相关因子Caspase-3、Cleaved PARP、Bax、Bcl-2及细胞色素C（Cyt-C）的蛋白表达情况并运用统计学方法进行比较分析.结果 50只裸鼠建模成功42只,随机选取40只进入实验,实验过程中无裸鼠死亡.通过测量实验过程中肿瘤体积算得在32 d观察结束时,水飞蓟宾低、中、高剂量组肿瘤生长抑制率分别为10.08％、47.64％、63.14％（F=52.79,P＜0.01）;对照组、低、中、高剂量组肿瘤质量分别为（1.54±0.25）、（1.46±0.22）、（0.94±0.15）和（0.72±0.16）g,差异具有统计学意义（F=39.90,P＜0.01）;肿瘤细胞凋亡率（％）对照组、低、中和高剂量组分别为（6.70±1.34）、（8.08±1.19）、（26.11±1.91）、（44.87 ±2.96）,差异有统计学意义（F=794.17,P＜0.01）,但低剂量组与对照组相比凋亡率没有明显差别（P=0.14）;各组间Caspase-3、Cleaved PARP、Bax、Bcl-2和Cyt-C的蛋白表达均有明显差异（P＜0.05）,但水飞蓟宾不同剂量组间及与对照组两两进行比较,结果差异性不尽一致.结论 水飞蓟宾在体内环境中可以显著抑制膀胱癌组织的生长,并且这种生长抑制作用随水飞蓟宾剂量增高而增强,这种抑制作用可能与Caspase介导的细胞凋亡,线粒体介导的细胞凋亡及Bcl-2家族蛋白表达下调/Bax家族蛋白表达上调有关.