甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶促进腹壁缺损修复

背景:目前用于填充腹壁缺损部位的合成高分子材料(如聚丙烯或聚酯)不仅缺乏可降解性和生物活性,还难以适应复杂形状伤口需求,因此,找到免疫原性低、组织相容性好的生物活性材料成为腹壁缺损修复研究的热点。目的:制备甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,探讨其在腹壁缺损中的潜在应用价值。方法:(1)依次用0.25%胰蛋白酶、1%Triton X-100对猪真皮进行脱细胞处理,获得真皮细胞外基质;胃蛋白酶消化真皮细胞外基质,经甲基丙烯酸酐改性后光交联形成甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,扫描电镜观察水凝胶的微观形貌,测试其流变学性能、溶胀性等理化性质;(2)将L929成纤维细胞接种到甲基丙烯酰化改性的真皮细胞外基质水凝胶中,检测细胞相容性;(3)将12只SD大鼠随机分为2组(n=6),创建保留腹膜的腹壁缺损模型,聚丙烯组缺损部位填充聚丙烯材料,水凝胶组缺损部位填充甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,两组创面皮肤均用聚丙烯材料覆盖,观察创面愈合情况并进行组织学分析。结果与结论:(1)采用酶解法对猪真皮进行脱细胞后具有良好的脱细胞效果,并且原有的糖胺聚糖及胶原蛋白保留较好。扫描电镜下可见甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶为疏松多孔结构,孔径在70-120μm之间,该水凝胶的溶胀比为(16.88±3.24)%,吸水率为(94.24±1.11)%,流变学性能测试表明该水凝胶状态稳定且具有剪切变稀特点,具备可注射性;(2)CCK-8检测与Live/Dead染色结果显示,甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶具有良好的细胞相容性;(3)动物实验结果显示,实验组术后7,10,14 d的皮肤创面愈合率高于对照组(P <0.05);皮肤与肌层组织苏木精-伊红、Masson染色显示,与聚丙烯组比较,水凝胶组术后14 d的皮肤创面上皮化情况、毛囊生成、胶原纤维排列及新生血管情况更好,术后28 d的皮肤创面新生组织结构与正常组织相近,并且瘢痕增生较少,术后28 d时可见少量肌肉组织再生;(4)结果表明,甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶可促进腹壁缺损大鼠的皮肤创面愈合和肌肉组织再生。

早期胸腔穿刺引流对重症急性胰腺炎急性肺损伤的影响

目的 探讨重症急性胰腺炎(SAP)伴发的少、中量胸腔积液早期穿刺引流对SAP患者急性肺损伤的影响。方法 回顾性分析中国人民解放军西部战区总医院 2015 年 1 月-2021 年 12月收治的107例 SAP 患者临床资料,根据入院后前3天是否进行胸腔穿刺置管引流,分为胸腔穿刺置管引流组(TPD组,51例)和非胸腔穿刺置管引流组(N-TPD组,56例)。分别比较入院后第5天、第10天两组相应时间节点实验室指标及临床结局。正态分布或近似正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验,非正态分布的计量资料两组间比较采用 Mann-Whitney U检验,计数资料两组间比较采用χ^(2)检验。结果 TPD组重症监护病房住院时间、总住院时间、住院费用明显少于N-TPD组(P值均<0.05);而 TPD组与N-TPD组患者病死率(9.8%vs 14.3%,χ^(2)=0.502,P=0.478)、脓毒症发生率(29.4%vs 44.6%,χ^(2)=2.645,P=0.104)比较差异无统计学意义。TPD组急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发生率明显降低(χ^(2)=6.038,P=0.043),且中度ARDS发生率显著低于N-TPD组,差异有统计学意义(7.8%vs 21.4%,χ^(2)=3.874,P=0.049)。TPD组患者机械通气使用率明显低于N-TPD组(35.3%vs 57.2%,χ^(2)=6.735,P=0.034),且有创机械通气患者,TPD组明显低于N-TPD组(9.8%vs 26.8%,χ^(2)=5.065,P=0.024)。TPD组肺部感染发生率显著低于N-TPD组(23.5%vs 42.9%,χ^(2)=4.466,P=0.035),TPD组全身炎症反应综合征持续时间缩短[(11.2±5.0)d vs (16.8±4.7)d,t=5.949,P<0.001]。在入院后第5、10天,TPD组患者实验室指标(超敏C反应蛋白、IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α、动脉血气氧分压、氧饱和度、氧合指数)、呼吸衰竭发生率均显著优于N-TPD组(P值均<0.05)。入院后第10天,TPD组APACHEⅡ评分、改良Mashall评分均显著优于N-TPD组(P值均<0.05)。结论 对于SAP伴发少、中量胸腔积液患者,早期进行胸腔穿刺引流,可有效改善患者的急性肺损伤,减轻全身炎症反应,缩短住院时间,减少住院费用。

急性胰腺炎相关腹腔积液的研究进展

急性胰腺炎(AP)相关腹腔积液是AP患者常见的并发症,与患者疾病严重程度、局部及全身并发症的发生及预后密切相关。胰腺炎相关腹腔积液产生可能来源于腹腔内血管、淋巴管及胰管的渗漏等。近年来,研究发现通过腹腔穿刺引流早期积极清除胰腺炎相关腹腔积液有助于降低全身炎症水平及缓解胰腺炎相关器官损伤,从而改善重症AP患者病情及降低病死率。但胰腺炎相关腹腔积液如何加重全身炎症反应、参与胰腺和远处器官损害,以及如何导致AP患者病情恶化,尚不完全清楚。因而,本文就AP相关腹腔积液的概况及近年来的研究做一综述,为AP病理生理过程及治疗的探索提供一些方向。

氧化应激在高原脱习服大鼠脑损伤中的作用

目的:探讨氧化应激(oxidative stress,OS)在高原暴露后返回平原大鼠大脑损伤中的作用及抗氧化剂维生素C(vitamin C,VitC)的治疗效果。方法:80只健康雄性SD大鼠,40只随机分为对照组(8只)、高原组(8只)和高原脱习服(high-altitude de-acclimatization,HADA)组(24只);另40只再随机分为对照组、VitC治疗3 d组、VitC治疗7 d组、安慰剂治疗3 d组和安慰剂治疗7 d组,每组8只。对照组大鼠在平原环境(500 m)中饲养30 d,高原组和HADA组大鼠于高原环境模拟舱(5000 m)内饲养30 d后,高原组结束造模,HADA组分成3个亚组,每组8只,再在平原(500 m)环境中分别饲养3、7和30 d;VitC治疗3 d组、VitC治疗7 d组按100 mg/kg剂量经尾静脉注射VitC溶液干预高原脱习服的大鼠,每日1次,自返回平原日起分别连续给药3和7 d,安慰剂治疗组则采用相同给药方式注射等体积的生理盐水。所有实验动物于造模结束后立即采集血清及脑组织,HE染色、透射电镜观察大鼠大脑的病理学变化,ELISA法检测血清中神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)及脑组织中晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein product,AOPP)表达水平,生化法测定血清中总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、脑组织中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substances,TBARS)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)表达水平,免疫组化检测cleaved caspase-3和细胞色素C(cytochrome C,CytC)在大鼠海马CA3区域的表达水平。结果:与对照组相比,HADA(3 d)组血清NSE水平显著升高,T-AOC水平显著降低(P<0.01),脑组织中AOPP、TBARS和GSSG水平显著升高且SOD和GSH活性显著降低(P<0.05),海马神经元呈现染色质凝聚、胞体核膜皱缩等典型凋亡改变;经VitC干预3 d后,与安慰剂3天组相比,大鼠血清NSE水平显著降低,T-AOC水平显著升高(P<0.01),脑组织中AOPP和GSSG水平显著降低,GSH和SOD水平显著升高(P<0.05),海马CA3区cleaved caspase-3和CytC表达水平显著降低(P<0.05)。结论:氧化应激改变参与低压低氧大鼠脱习服期脑损伤发生,该作用可能通过介导神经元凋亡而实现,抗氧化剂VitC能够增强大鼠抗氧化能力,抑制神经元凋亡,减轻大脑损伤。

经鼻胰岛素对高原小鼠记忆损伤的保护作用

目的探索经鼻给药胰岛素对高原小鼠记忆损伤的防治作用及机制。方法将80只雌性C57BL/6小鼠随机分为常氧对照(CON)组、高原(HH)组、生理盐水(NS+HH)组、胰岛素预处理(I+HH)组和胰岛素治疗(HH+I)组,每组16只。NS+HH组和I+HH组连续经鼻给生理盐水或胰岛素17.5μL(即胰岛素1.75 U)7 d后和HH组、HH+I组放入低压氧舱,模拟海拔6000 m,放舱7 d。期间HH+I组每日出舱行经鼻胰岛素给药1.75 U。通过Morris水迷宫实验测试小鼠的认知功能;通过过氧化氢(H 2 O 2)测试盒、丙二醛(MDA)测试盒、超氧化物歧化酶(SOD)测试盒、Western blotting实验、尼氏染色观察海马氧化应激、神经元凋亡和神经突触功能改变的情况。结果①与CON组相比,HH组(P<0.01)小鼠出现明显的记忆损伤,HH+I组高原小鼠记忆显著改善(P<0.01);②与CON组相比,HH组海马区氧化应激指标H 2 O 2(P<0.05)、MDA(P<0.05)升高,抗氧化指标SOD活性呈降低趋势;I+HH组和HH+I组氧化应激指标被逆转;③尼氏染色显示,HH组CA1区神经元尼氏小体溶解明显,I+HH组和HH+I组此现象明显减轻;HH组CA3区出现大量核固缩深染细胞,I+HH组和HH+I组核固缩细胞显著减少;④与CON组相比,HH组B淋巴细胞瘤2蛋白表达量显著降低(P<0.01),cleaved caspase-3表达量显著升高(P<0.01);I+HH组和HH+I组逆转凋亡相关蛋白表达;⑤与CON组相比,HH组(P<0.05)突触蛋白1(Syn-1)表达水平下降,I+HH组(P<0.01)和HH+I组(P<0.05)Syn-1表达量显著升高。结论经鼻胰岛素可通过减轻海马氧化应激损伤、减少神经元凋亡、提高突触功能,防治高原环境诱导的记忆损伤。

早期积极液体复苏与常规液体复苏治疗急性胰腺炎效果及安全性的Meta分析

目的本研究旨在系统评价积极液体复苏与常规液体复苏在急性胰腺炎(AP)早期治疗过程中的效果与安全性,为临床研究与实践提供参考。方法本研究根据PRISMA指南完成,PROSPERO注册号:CRD42023455046。计算机检索PubMed、Cochrane Library、Web of Science、中国知网、维普和万方数据库等中英文期刊服务平台,从建库至2022年11月30日发表的有关液体复苏治疗AP临床效果的随机对照试验与队列研究。采用RevMan 5.4软件和Stata 17.0软件进行Meta分析。结果最终纳入15项研究,共4061例AP患者。Meta分析结果显示,与常规液体复苏组相比,积极液体复苏组的持续器官功能衰竭发生率(OR=2.19,95%CI:1.46~3.29,P<0.001)、胰腺坏死发生率(OR=1.73,95%CI:1.19~2.51,P=0.004)、死亡率(OR=1.64,95%CI:1.26~2.14,P<0.001)显著升高,同时还增加了感染性胰腺坏死(OR=1.82,95%CI:1.33~2.48,P<0.001)、循环功能衰竭(OR=6.31,95%CI:1.81~21.93,P=0.004)、呼吸功能衰竭(OR=3.81,95%CI=1.77~8.19,P<0.001)、肾功能衰竭(OR=1.88,95%CI:1.11~3.19,P=0.020)、腹腔间隔室综合征(OR=6.01,95%CI:2.45~14.71,P<0.001)、液体过负荷(OR=3.83,95%CI:1.65~8.88,P=0.002)的发生风险。结论积极液体复苏在AP早期治疗阶段表现出较差的效果及安全性,可能不利于患者预后。但受纳入研究数量和质量的限制,未来需要更多的多中心大样本随机对照试验来验证。

柚皮苷抑制大鼠心肌缺血/再灌注损伤诱导的细胞焦亡

目的:观察柚皮苷是否减轻心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)及其与细胞焦亡的关系。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术(sham)组、模型(MI/RI)组和低、中、高剂量(10、50和100 mg/kg)柚皮苷组。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min后再灌注2 h建立MI/RI模型。伊文思蓝-氯化三苯基四氮唑(TTC)复染检测心肌梗死面积,HE染色和Masson染色分析梗死病理变化,紫外分光光度法检测血清心肌损伤标志物和内源性抗氧化剂活性,ELISA法检测血清炎症因子和心肌组织丙二醛(MDA)含量。Western blot检测含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)和gasdermin D(GSDMD)的蛋白表达。结果:与sham组相比,MI/RI组血清心肌损伤标志物活性显著升高,炎症因子和心肌组织MDA含量显著增加,心肌梗死面积、心肌细胞破裂和细胞坏死显著增加,内源性抗氧化剂活性显著降低,心肌组织ASC、caspase-1、NLRP3和GSDMD蛋白表达显著增加(P<0.05)。与MI/RI组相比,柚皮苷各组上述变化均明显减轻。结论:柚皮苷可减轻MI/RI,其机制可能与抑制MI/RI诱导的细胞焦亡有关。

胎盘间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用及机制

目的探讨胎盘间充质干细胞(P-MSCs)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用及机制。方法健康成年雄性SD大鼠36只,采用随机数字表法分为对照组、SAP组与P-MSCs组,每组12只。采用4%牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射法构建SAP大鼠模型。造模后6 h,经尾静脉注射P-MSCs(1×106个/100 g)。P-MSCs输注后12 h和24 h,处死大鼠,收集血清、胰腺组织及肺组织。测定肺湿干重比,显微镜下计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞、白细胞和巨噬细胞数;HE染色评估胰腺组织、肺组织损伤程度并进行病理评分;ELISA法测定血清炎性因子、淀粉酶、脂肪酶浓度;采用髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒测定胰腺组织与肺组织MPO活性;RT-qPCR检测肺组织中TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平;免疫荧光染色观察肺巨噬细胞极化情况。结果与SAP组比较,P-MSCs组大鼠肺湿干重比明显下降,BALF中中性粒细胞、白细胞与巨噬细胞数均明显减少(P<0.001)。HE染色结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组胰腺组织、肺组织病理损伤明显减轻(P<0.001)。ELISA检测结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组血清淀粉酶、脂肪酶浓度以及IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显降低,IL-10水平明显升高(P<0.001)。MPO活性测定结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组胰腺组织与肺组织MPO活性均明显降低(P<0.001)。RT-qPCR检测结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组肺组织中TNF-α、IL-1βmRNA表达水平明显降低(P<0.001)。免疫荧光染色结果显示,P-MSCs组肺组织中M1巨噬细胞数明显减少,M2巨噬细胞数明显增加。结论P-MSCs可减轻SAP大鼠肺组织炎性损伤,其保护机制可能与诱导肺巨噬细胞向M2型极化有关。

腹腔穿刺引流对重症急性胰腺炎大鼠胰腺细胞焦亡的影响及其意义

目的探讨腹腔穿刺引流(APD)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠caspase-1介导的胰腺细胞焦亡的影响及其意义。方法将48只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAP组及APD组,每组16只。采用5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管构建大鼠SAP模型,APD组在SAP组的基础上于右下腹放置引流管引流。于造模后12 h收集大鼠血清及胰腺组织。采用全自动生化分析仪检测血清脂肪酶及淀粉酶活性,HE染色观察胰腺损伤情况,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清炎性因子的变化,RT-PCR及Western blotting检测胰腺组织caspase-1介导的焦亡相关基因及蛋白的表达变化,透射电镜观察胰腺腺泡细胞超微结构变化及焦亡的特征性改变。结果与SAP组比较,APD组的胰腺组织病理损伤明显减轻,病理评分明显降低,血清脂肪酶、淀粉酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);SAP组胰腺组织焦亡通路蛋白核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)、caspase-1、cleaved-caspase-1、gasdermin家族蛋白D(GSDMD)及cleaved-GSDMD表达水平明显高于假手术组,经APD治疗后,胰腺组织焦亡通路蛋白表达均明显降低,胰腺组织IL-1β及IL-18 mRNA及蛋白表达水平也明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);透射电镜观察显示,SAP组出现明显的内质网及线粒体扩张,核染色质凝聚,以及焦亡的特征性改变即细胞膜上膜孔的形成,而APD组内质网及线粒体扩张明显减轻,核染色质凝聚明显减少。结论Caspase 1介导的焦亡在SAP中被激活;早期实施APD能够减轻SAP的严重程度,并明显抑制caspase-1介导的焦亡激活,从而减轻局部及全身炎症反应。

CaMKⅡ在小鼠重症急性胰腺炎胰腺损伤中的作用

目的观察钙调素依赖蛋白激酶(CaMKⅡ)在重症急性胰腺炎(SAP)小鼠胰腺组织中的表达情况,并探讨其抑制剂KN93对SAP胰腺损伤的保护作用和机制。方法36只健康雄性C57小鼠随机分为假手术组、SAP组、KN93组、SAP组+KN93组,9只/组。于造模后24 h收集血清和胰腺组织;采用HE染色观察胰腺组织病理改变;Elisa检测血清脂肪酶、淀粉酶活性以及炎性因子变化情况;免疫印迹法检测CaMKⅡ、p-CaMKⅡ、p-NF-κB、MAPK、p-MAPK在小鼠胰腺组织中的表达变化。结果与假手术组比较,SAP组p-CaMKⅡ、p-NF-κB、p-MAPK表达水平升高(P<0.05)。KN93干预后,SAP小鼠胰腺组织病理损伤减轻,血清脂肪酶、淀粉酶以及炎性因子(TNF-α、IL-6)水平降低(P<0.05),同时NF-κB、ERK和MAPK蛋白磷酸化也降低(P<0.05)。结论CaMKⅡ蛋白在SAP疾病胰腺组织活性升高,CaMKⅡ抑制剂KN93能有效减轻SAP小鼠胰腺损伤和炎症程度,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关。

龙胆苦苷对大鼠腹膜纤维化的抑制作用及其机制研究

目的:观察龙胆苦苷对腹膜透析大鼠腹膜纤维化组织氧化应激反应和转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路的影响,探讨龙胆苦苷防治腹膜纤维化的作用机制。方法:通过4.25%高糖腹膜透析液(100 mL/kg;每天1次)联合脂多糖(0.6 mg/kg;第1、3、5、7天注射)构建大鼠腹膜纤维化模型。将30只雄性SD大鼠随机分为5组:生理盐水组、模型组及低、中、高剂量(30、60和120 mg/kg)龙胆苦苷组,每组6只。透析28 d后行1 h腹膜功能试验:测定超滤量、初始腹透液与透出液葡萄糖比值、透析液与血浆尿素氮比值及葡萄糖转运量。取大鼠壁层腹膜进行腹膜病理形态学观察,计算腹膜厚度。取腹主动脉血检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。免疫组化检测各组大鼠腹膜组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮钙黏素(E-cadherin)和I型胶原(COL I)的表达情况。Western blot检测各组大鼠腹膜组织中TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的表达。结果:透析28 d后,经腹腔注射4.25%高糖腹膜透析液及脂多糖建立的腹膜纤维化大鼠模型腹膜功能显著降低(P<0.05),腹膜厚度显著增加(P<0.01),并可见炎症细胞浸润、纤维细胞及血管增生明显增多;大鼠血清中MDA含量显著增多,SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.01);免疫组化显示,α-SMA和COL I蛋白表达显著增加,E-cad⁃herin蛋白表达显著降低(P<0.01);Western blot显示,TGF-β1和Smad3蛋白表达显著增加,Smad7蛋白表达显著降低(P<0.01)。龙胆苦苷干预能够显著降低氧化应激水平,抑制TGF-β1和Smad3蛋白的表达,提高Smad7蛋白表达水平,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:龙胆苦苷可减轻高糖腹透液联合脂多糖诱导的腹膜纤维化模型大鼠的腹膜纤维化病变程度,其机制与抑制氧化应激反应及腹膜间皮-间充质转化进程有关。

腹腔穿刺引流对重症急性胰腺炎大鼠肠道TLR4表达的影响及意义

目的探讨早期腹腔穿刺引流(APD)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠道Toll样受体4(TLR4)表达的影响及意义。方法雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、SAP组和APD组,每组15只。采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法建立SAP大鼠模型,在此基础上于大鼠右下腹置入引流管建立APD模型。建模后24h采集血样、小肠和胰腺组织,HE染色观察小肠组织和胰腺组织的病理学变化,采用全自动生化仪检测血清淀粉酶和脂肪酶活性,鲎试剂法检测血清内毒素水平,紫外比色法检测血清二胺氧化酶(DAO)活性,ELISA法检测小肠组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平以及血清D-乳酸水平,TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡情况,RT-PCR检测小肠组织TLR4 mRNA的表达水平,免疫组化和Western blotting检测TLR4信号通路关键分子和凋亡相关蛋白的表达。结果与SAP组比较,APD组大鼠小肠和胰腺组织病理损伤明显减轻,病理评分明显降低(P<0.05),血清淀粉酶、脂肪酶和DAO活性以及TNF-α、IL-6、D-乳酸和内毒素水平也明显降低(P<0.05)。与SAP组比较,APD组小肠组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)p65、TNF-α和IL-6的表达明显降低(P<0.05)。此外,APD组小肠黏膜上皮细胞凋亡指数、cleavedcaspase-3和Bax的表达较SAP组明显降低,Bcl-2的表达明显升高(P<0.05)。结论早期实施APD能显著降低SAP大鼠肠道TLR4的表达,抑制下游炎症信号通路的激活,进而减少肠黏膜上皮细胞凋亡的发生,发挥肠道保护作用。

高原肺水肿动物模型研究进展

高原肺水肿(high altitude pulmonary edema,HAPE)是指在高原缺氧条件下发生的急性呼吸衰竭,至今发生机制不明确,尚无标准动物模型。HAPE动物模型是研究HAPE病理机制及寻找有效诊疗手段的基础,其制备方法包括低张性缺氧暴露、缺氧暴露联合疲劳诱导、转基因技术等。该文梳理了近七十年国内外HAPE模型发展历程,并概括总结了HAPE动物模型的制备方法、评价指标,力争为科研和医务工作者提供有益参考。

细胞外基质水凝胶协助干细胞移植治疗的优势及不足分析

自1980年发现成体干细胞的可塑性后,大量研究表明干细胞在促进组织、器官愈合与再生中发挥重要作用[1-2]。为此,人们追求研究各类干细胞,主要包括间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)、神经干细胞(neural stem cells,NSCs)和多能干细胞(pluripotent stem cells,PSCs)[3]。目前,基于干细胞的疗法已在骨骼重塑、心肌损伤、帕金森病、糖尿病和眼底病变等多个疾病中研究报道,并普遍被认为是安全、有效的[4-6]。尽管干细胞在组织修复、功能重建和器官再造等方面极具潜力,但干细胞治疗还存在若干不足。通过将细胞外基质(extracellular matrix,ECM)制备成细胞外基质水凝胶(extracellular matrix hydrogel,ECMH),为克服干细胞移植治疗中的不足带来了希望。在此,笔者主要探讨ECMH在干细胞移植治疗中的优势和不足。

军队新入职文职人员焦虑、抑郁情况调查分析

目的调查分析军队新入职文职人员的心理状况及影响因素。方法2022年5月29日至7月21日对新疆某部新入职军队文职人员进行问卷调查,主要采用焦虑自评量表(SAS)和抑郁量自评量表(SDS)。一般资料调查表包括性别、年龄、婚姻状况、来源地、训练压力、是否应届毕业、有无部队经历、有无子女、学历、岗位、饮食适应、气候适应等变量,根据各变量特点分别进行分组,并比较每个变量下各组之间SAS、SDS的得分情况;最后,将所有因素纳入二元logistic回归分析模型,筛选出抑郁发生的危险因素。结果共收到206份有效问卷,其中焦虑和抑郁检出率分别为1.9%、8.3%;地域差异(长江南北)、训练压力、饮食适应、气候适应各因素组内在SDS得分上差异均有统计学意义(均P<0.05);训练压力与气候适应各因素组内在SAS得分上差异均有统计学意义(均P<0.05);不能适应驻地气候(OR=3.667,P<0.05)是抑郁发生的危险因素。结论军队新入职文职人员存在一定比例的焦虑和抑郁情绪,其中,抑郁情绪发生更高;此外,环境和气候的不适应可能是新入职文职人员产生抑郁的危险因素。

胎盘间充质干细胞移植对脓毒症肝损伤小鼠的保护作用

目的探讨胎盘间充质干细胞(P-MSCs)移植对脓毒症肝损伤小鼠的保护作用。方法将24只雄性C57小鼠随机分为对照组、模型组和实验组,每组8只。对照组小鼠仅开腹游离盲肠后还纳入腹腔,其他2组小鼠用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症模型。对照组和模型组均于术后1 h经尾静脉注射0.9%NaCl 0.1 mL;实验组于术后1 h经尾静脉注射P-MSCs 2×105个。术后24 h处死所有小鼠。用酶联免疫吸附试验法检测血清中炎症因子的浓度,用实时荧光聚合酶链反应法检测肝组织中炎症因子基因的表达水平。结果实验组、模型组和对照组血清中肿瘤坏死因子-α含量分别为(568.83±66.39),(776.06±56.14)和(423.85±8.88)pg·mL^(-1),白细胞介素1β(IL-1β)含量分别为(156.24±13.77),(207.88±27.39)和(138.25±19.67)pg·mL^(-1),IL-6含量分别为(181.88±10.42),(214.29±23.49)和(133.65±4.64)pg·mL^(-1),IL-10含量分别为(519.33±28.19),(390.46±11.32)和(321.31±7.70)pg·mL^(-1)。实验组和对照组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。肝组织炎症因子基因结果趋势与血清一致。结论体外输注的P-MSCs能够显著减轻脓毒症肝损伤小鼠的炎性损伤。

间充质干细胞移植对脓毒症小鼠肠道损伤的保护作用与机制的初步探讨

目的探讨胎盘间充质干细胞(placental-derived mesenchymal stem cells,P-MSCs)移植对脓毒症小鼠肠道损伤的保护作用与机制。方法将24只小鼠随机均分为3组:假手术(Sham)组、脓毒症(CLP)组与胎盘间充质干细胞治疗(CLP+P-MSCs)组。假手术组小鼠仅开腹游离盲肠后还纳,其余2组采用盲肠结扎穿孔法(CLP)构建脓毒症模型。Sham组和CLP组均于术后1 h经尾静脉注射0.9%NaCl 0.1 mL,CLP+P-MSCs组于术后1 h输注P-MSCs 2×105个。P-MSCs移植24 h后收集各组小鼠肠道和血液样本。肠道组织经HE染色后进行病理评估,酶联免疫吸附法对血清D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、内毒素、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-β浓度进行检测,实时荧光聚合酶链式反应法对小肠组织中相关炎性因子基因表达水平进行测定。蛋白免疫印迹法测定肠道中ZO-1与occludin蛋白的表达情况,免疫组化法对小肠巨噬细胞的浸润程度进行检测,免疫荧光法对巨噬细胞的极化情况进行检测。结果外源性移植的P-MSCs可在脓毒症小鼠损伤肠道中定植。相比CLP组,CLP+P-MSCs组肠道损伤明显减轻;血清D-乳酸、DAO、内毒素、IL-1β、IL-6、TNF-α浓度降低(P<0.05),IL-10、TGF-β升高(P<0.05);肠道组织中IL-1β、TNF-α、IL-6基因表达水平降低(P<0.05),IL-10、TGF-β升高(P<0.05);肠道中ZO-1与occludin蛋白表达量也升高(P<0.05)。同时,CLP+P-MSCs组肠道组织中巨噬细胞分布显著减少,巨噬细胞有向M2型极化的趋势。结论外源性P-MSCs移植可显著减轻脓毒症肠损伤小鼠的炎性损伤、改善肠屏障功能。减少巨噬细胞的浸润、促使巨噬细胞由M1型向M2型极化可能是其减轻炎症反应的机制之一。

腹腔穿刺引流减轻重症急性胰腺炎相关肝损伤:历史性队列研究

目的 探讨腹腔穿刺引流(abdominal paracentesis drainage,APD)对早期重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关肝损伤(pancreatitis-associated liver injury,PALI)的治疗效果。方法 选取2015年1月至2021年1月期间西部战区总医院收治的符合纳入和排除标准的114例SAP患者作为研究对象,根据是否进行APD治疗将患者分为APD组(61例)和非APD组(53例);分析比较2组患者的基线资料、住院死亡率、肝功能相关指标、炎症相关指标、病情严重程度评分等。结果 APD组住院死亡率低于非APD组(8.2%比22.6%,P=0.031);APD组病情严重程度评分(APACHEⅡ评分、Ranson评分和改良Marshall评分)及炎症相关指标(超敏C反应蛋白、白细胞介素-1、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α)均低于非APD组(P<0.05)。在肝功能相关指标方面,2组治疗后的丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,GGT)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)和直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)水平均较治疗前明显降低(P<0.05),APD组治疗后的ALT、AST、TBIL和DBIL水平均低于非APD组(P<0.05),而前白蛋白和白蛋白水平高于非APD组(P<0.05);2组间治疗后GGT、碱性磷酸酶和5′-核苷酸酶水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 对于伴有腹腔积液的SAP患者,尽早行APD治疗可减轻PALI的程度并可改善患者的肝功能。

早期腹腔穿刺引流治疗重症急性胰腺炎有效性和安全性的Meta分析

目的 系统评价早期腹腔穿刺引流(APD)治疗重症急性胰腺炎(SAP)的疗效与安全性。方法 计算机检索PubMed、Cochrane Library、Web of Science、CNKI、WanFang Data和VIP数据库,搜集APD治疗SAP的随机对照试验与队列研究,检索时限均为建库至2022年12月10日。由2位研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Rev Man 5.4和Stata 17.0软件进行Meta分析。结果 最终纳入18项研究,共2 685例患者。Meta分析结果显示:与保守治疗相比,早期APD可降低SAP患者死亡率[OR=0.49,95%CI(0.35,0.69),P<0.01]、多器官功能衰竭发生率[OR=0.56,95%CI(0.45,0.71),P<0.01]、ARDS发生率[OR=0.54,95%CI(0.41,0.71),P<0.01]、进阶治疗率[OR=0.54,95%CI(0.42,0.69),P<0.01]及感染并发症[OR=0.72,95%CI(0.57,0.92),P<0.01],同时也能缩短器官功能衰竭持续时间、住院时间及ICU入住时间,降低住院总费用(P<0.05)。在肺炎、菌血症、脓毒血症发生率方面,两组差异无统计学意义。结论 早期APD治疗SAP可降低多器官功能衰竭发生率,改善患者预后,降低死亡率,并且不会增加感染相关并发症的发生风险,具有较好的临床推广价值。但受纳入研究数量和质量的限制,未来需要更多高质量研究验证。

间充质干细胞治疗脓毒症的研究进展

脓毒症是一种严重的、威胁生命的炎症反应综合征,目前仍以对症支持治疗为主。因此,亟需寻找一种新的治疗策略以改善脓毒症患者预后。间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)因其独特的生物学特性,备受生命科学及医学领域研究者青睐。近年来,多项研究表明MSCs可通过调节免疫状态、平衡炎症反应、降低细菌负荷、改善器官功能等途径,进而提高脓毒症机体的生存率,这表明MSCs有望成为脓毒症治疗新策略。本文就MSCs在脓毒症临床前与临床研究中的最新进展作一综述。