柱前衍生化RP-HPLC法鉴别及测定麻黄中的生物胺类成分

目的：从中药麻黄所含阿魏酰组胺和麻黄根碱的结构以及可能的生源关系推测其尚有未被发现的组胺、腐胺、亚精胺和精胺等成分,建立柱前衍生化RP-HPLC法测定麻黄及麻黄根中11种生物胺。方法：药材样品经1 mol·L-1盐酸提取,正丁醇-二氯甲烷（1∶1）萃取富集,以丹磺酰氯为柱前衍生试剂进行衍生化,RP-HPLC法测定。采用Shimadzu C18色谱柱（200mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈（A）-水（B）为流动相,梯度洗脱（0-7 min,45%A→50%A;7-25 min,50%A→90%A;25-35min,90%A;35-40 min,90%A→45%A）,流速为0.8 m L·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果：甲胺、尸胺、组胺、亚精胺与精胺的线性范围为0.10-10.00 mg·L-1（r〉0.999）,色胺、腐胺的线性范围为0.10-50.00 mg·L-1（r〉0.999）,2-苯乙胺、5-羟色胺、酪胺与多巴胺的线性范围为0.25-10.00 mg·L-1（r〉0.999）,平均回收率在75.6%-101.1%之间。麻黄中含有甲胺、色胺、腐胺、尸胺、组胺、亚精胺、多巴胺与精胺。麻黄根中含有甲胺、腐胺、尸胺、组胺、亚精胺与精胺。结论：经方法学验证,该方法可用于测定麻黄中甲胺、色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、5-羟色胺、酪胺、亚精胺、多巴胺与精胺11种生物胺类成分。这是首次发现在麻黄中含有生物胺类成分,同时也证实了麻黄中存在组胺、腐胺、精胺和亚精胺的推测,并为其生源关系提供了证据。该研究方法也可用于其他中药或天然药物化学成分的深入研究。

4种地衣提取物抗氧化和抗肿瘤活性研究

本研究初步评估了4种药用地衣(太白茶、金刷把、黑石耳、红石耳)不同溶剂提取物的抗氧化活性及其粗多糖的抗肿瘤活性。通过测定清除DPPH自由基、羟基自由基和还原能力,对4种地衣不同溶剂提取物进行体外抗氧化活性评价,结果表明,金刷把和黑石耳的甲醇提取相清除DPPH自由基能力高于其它溶剂提取相,其IC50值(半抑制浓度)分别为0.7847 mg/mL和0.5595 mg/mL;黑石耳甲醇提取相(IC50=0.5747 mg/mL)清除羟基自由基能力优于阳性对照物Vc(IC50=0.6126 mg/mL);黑石耳氯仿提取相、金刷把乙酸乙酯提取相和太白茶甲醇提取相清除羟基自由基能力与Vc相当;4种地衣甲醇提取相还原能力均较强,且与其浓度呈较好的量效关系。利用MTT法分析4种地衣多糖对HeLa、A375和Hep G2细胞体外生长增殖的抑制作用,结果显示黑石耳粗多糖对Hep G2细胞的抑制作用较为突出(IC50=0.2567 mg/mL),而金刷把抑制HeLa细胞的生长增殖作用最强,其IC50值为0.4332 mg/mL。