人类非嗜肝病毒性肝炎研究进展

人类非嗜肝病毒性肝炎是由非嗜肝病毒感染引起的肝损伤,随着临床检测手段的提高日益得到重视。非嗜肝病毒性肝炎的病原种类多样,临床表现程度不同,部分患者可导致死亡。本文按照非嗜肝病毒性肝炎的病原对其临床特点进行综述。

新型呼肠病毒M片段对核转录因子κB的活性抑制的研究

目的探讨新型呼肠病毒M片段能否抑制核转录因子-κB(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB)的活性。方法构建3个不同中基因节段的重组真核表达质粒,并瞬时转染真核细胞,利用荧光素酶双报告系统检测其对NF-κB激活有抑制效应的基因。结果酶切鉴定3个基因重组质粒均构建成功。其中M3基因表达的蛋白对肿瘤坏死因子α介导的NF-κB激活有较明显的抑制,抑制率达55%。而M1和M2基因表达的蛋白较之于空载体均无明显的抑制效果。结论 M3基因能显著抑制肿瘤坏死因子α介导的NF-κB激活,为研究病毒的致病及免疫调控机制提供了重要理论依据。

1株快速增殖的HAV分离株基因型分析

目的确定1株快速增殖HAV临床分离株HAV302的基因型及其特点。方法提取培养病毒RNA模板,通过反转录-聚合酶链反应技术扩增该病毒编码区基因并行序列测定,随后利用序列分析软件对其进行序列分析和基因型比对。结果 HAV302株VP1/2A区基因序列与Gen Bank中收录的HAVⅠ型中的ⅠB亚型MBB株核苷酸同源性最高(99.4%)。进化树分析显示,HAV302株与MBB株亲缘最近。与MBB株相比,非结构蛋白编码区中的2B和2C区在整个病毒的编码区中变异最大。结论 HAV302株属于HAVⅠ型中的ⅠB亚型,其2B和2C区的变异可能是导致病毒快速增殖的原因之一。

载脂蛋白A-Ⅰ模拟肽对代谢综合征大鼠心功能的可能影响及作用机制

目的探讨载脂蛋白A-Ⅰ模拟肽(L4F)对于代谢综合征(MS)大鼠通过血红素氧合酶1(HO-1)发挥作用的可能机制。方法选取大鼠60只分为对照组(20只)与MS组(40只),分别给予普通饲料与高果糖饲料喂养6周,每组各取10只行心脏超声及血流动力学检测后处死,对照组剩余10只给予碳酸铵缓冲溶液(ABCT);MS组剩余30只大鼠随机分为ABCT组、L4F组及抑制剂组,每组10只,分别给予ABCT、L4F、L4F+抑制剂,继续喂养6周,检测心肌脂联素、HO-1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)表达。结果 MS组血糖、收缩压、舒张压及左心室舒张末期内径显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。与抑制剂组比较,L4F组血压、血糖、左心室舒张末压明显降低;脂联素、p-AMPK、p-Akt、p-eNOS表达显著升高(P<0.05)。L4F组HO-1表达与抑制剂组相近(P>0.05)。结论L4F可能是通过作用于能量代谢通路HO-1、脂联素、p-AMPK、p-Akt、p-eNOS上调HO-1的表达,降低MS大鼠血压和血糖,改善心室顺应性。

新型肠道病毒89型结构蛋白VP1的构建表达及序列分析

目的研究克隆表达新型肠道病毒89型VP1结构蛋白,并进行活性鉴定和序列分析。方法分离肠道病毒89型VP1结构蛋白全基因,克隆入原核表达载体PET-28构建重组质粒pH-VP1,在大肠埃希菌BL21中进行表达,检测表达产物的特异性及活性。将EV89 VP1核酸序列与Genbank数据库中的序列进行比对并建立系统进化树。结果重组质粒在1 mmol/L的IPTG 37℃诱导7 h后可诱导表达得到约33 kD的蛋白,经Western Blot实验检测证明表达的融合蛋白具有EV89抗原的活性。分离的EV89病毒其VP1区核酸序列与Genbank数据库中仅有的3株EV89序列同源性分别为86.4%、85.9%、85.6%。结论成功构建EV89重组蛋白,其表达产物具有良好的特异性及活性,可进一步用于VP1检测方法的研制。进化分析表明,分离的EV89 VP1区与Genbank数据库中其他分离株亲源性较远。