miRNA-224-5p靶向JAG1抑制乳腺癌细胞自噬活性的机制研究

目的探讨miRNA-224-5p靶向JAG1抑制乳腺癌细胞自噬活性的机制。方法收集2017年1月至2018年9月在台州市中心医院接受手术治疗的40例乳腺癌患者(乳腺癌组)及同期性别、年龄相匹配的40例健康体检者(健康对照组)的血清。采用实时定量逆转录-聚合酶链反应检测血清中miRNA-224-5p的表达;采用免疫印迹试验检测乳腺癌细胞MDA-MB-231中miRNA-224-5p的表达与自噬活性的关系。采用生物信息学的软件TargetScan 7.2和MiRDB预测miRNA-224-5p作用的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验对预测的靶基因进行验证。结果乳腺癌组血清miRNA-224-5p相对表达量为188.51±59.26,明显高于健康对照组的41.63±14.29,差异有统计学意义(P<0.05)。在MDA-MB-231细胞中,抑制miRNA-224-5p的表达后自噬活性增加。双荧光素酶报告基因实验验证JAG1为miRNA-224-5p的靶基因。结论miRNA-224-5p在乳腺癌患者血清中高表达,在MDA-MB-231细胞中miRNA-224-5p通过靶向JAG1抑制自噬活性。

环介导等温扩增技术对解脲脲原体的临床检测

目的建立并优化环介导等温扩增(LAMP)技术对解脲脲原体(U.urealyticum)的检测,并应用于临床样本分析。方法针对U.urealyticum的urease基因设计LAMP引物;研究LAMP的最适温度、最佳检测时间及灵敏度和特异度;与传统PCR检测进行方法学比对。结果 LAMP技术检测U.urealyticum的最适温度和最佳时间分别是61℃和60 min,并且具有良好灵敏度和特异度,较普通PCR检测的灵敏度高出1 000倍。临床样本检测中,PCR和LAMP技术达到的灵敏度分别为25.00%和87.50%。两种方法的特异度均为100.00%。结论 LAMP与PCR相比在基层检测和大规模筛查方面有显著的优势和巨大的利用价值。