氨基胍对兔缺血-再灌注损伤后视网膜形态学及一氧化氮和一氧化氮合酶表达的影响

背景临床研究表明，多种眼科疾病如青光眼、视网膜中央动脉阻塞、缺血性视神经病变等均可导致视网膜缺血-再灌注损伤（RIRI），严重影响视功能，因而对治疗RIRI药物的研究是非常必要的。目的观察并探讨氨基胍对兔RIRI后形态学的变化，并研究其对一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（iNOS）在视网膜中表达的影响及其机制。方法清洁级日本大耳白兔66只，以随机数字表法分为正常组、RIRI模型组和氨基胍治疗组。用前房灌注生理盐水法升高眼压60min后恢复灌注建立兔RIRI模型，氨基胍治疗组每日在模型兔腹腔内注射氨基胍注射液80mg／kg，而RIRI模型组以同样的方法注射等量生理盐水。RIRI模型组和氨基胍治疗组分别于缺血即时、再灌注后6、24、72h各取2只兔活体行眼底彩色照相及荧光素眼底血管造影（FFA）。各组兔分别于再灌注后1、6、24、72h用空气栓塞法处死并摘除眼球以制备视网膜切片，用TUNEL法检测视网膜组织神经细胞的凋亡变化，通过硝酸还原酶法检测NO浓度，比色法检测iNOS活力。结果各时间点眼底彩色照相及FFA检查结果表明，与RIRI模型组比较，氨基胍治疗组视网膜水肿程度减轻，血管闭塞程度及比例降低，荧光素渗漏量及面积减轻并减少。TUNEL染色凋亡细胞计数检测表明，正常组兔视网膜未见TUNEL阳性细胞，而缺血-再灌注1、6、24、72h后RIRI模型组兔视网膜凋亡细胞计数均明显高于氨基胍治疗组（F分组=2762．37，P=0．00；F时间=894．24，P=0．00）。RIRI模型组和氨基胍治疗组各组内相邻时间点之间TUNEL阳性细胞的差异均有统计学意义（RIRI模型组：q=24．47、36．59、-20．37，P〈0．05；氨基胍治疗组：q=20．94、16．79、-6．92，P〈0．05），再灌注后24h各组TUNEL阳性细胞数量达到高峰。各时间点RIRI模型组兔视网膜NO浓度明显高于氨基胍治疗组（q=3．84、4．01、8．91、3．75，P〈0．05），各组内相邻时间点之间NO浓度的差异均有统计学意义（RIRI模型组：q=4．77、13．40、-10．29，P〈0．05；氨基胍治疗组：q=4．55、9．05、-5．08，P〈0．05），各组24h视网膜中NO浓度达峰值。各时间点RIRI组视网膜iNOS活力均明显高于氨基胍治疗组（q=-3．74、-4．94、-6．53、-3．98，P〈0．05）；各组内相邻时间点间iNOS活力的差异均有统计学意义（RIRI模型组：q=8．43、6．71、-6．39，P〈0．05；氨基胍治疗组：q=4．16、5．08、-3．93，P〈0．05），各组24h iNOS活力达峰值。结论氨基胍对维持RIRI后的视网膜形态和功能起保护作用，其作用机制可能为抑制iNOS的活性，减少NO的生成。