关节痛,另有隐情

55岁的李老师连续3个月感觉双下肢酸痛无力,双膝关节和踝关节处也疼痛不已,甚至走路都有点难。所有人都认为,这个年龄有点关节老毛病理所当然。由于痛得厉害,李老师去风湿病科和骨科做了关节拍片及抽血化验,结果却没有发现异常。一番针灸、外贴膏药和服用止痛药后,疼痛有些好转,不过没持续多久。此后那些不适起起伏伏,且逐渐加重,原来有效的方法也逐渐失效。给李老师莫名的关节痛“正名”的,却是后来体检做的胸部X片结果:右上肺有一个鸡蛋大小的阴影。进一步检查发现,竟是肺癌。幸而肿瘤并没有远处转移,医生马上为李老师做了手术。术后两三个星期,李老师的关节肿痛也奇迹般地缓解了。

肾细胞癌中端粒酶活性及其临床意义

目的 研究端粒酶活性与肾细胞癌之间的关系。方法 采用 TRAP- PCR- EL ISA法及 TRAP- PCR银染法对肾细胞癌组织和癌旁正常肾组织中端粒酶活性进行检测。结果 5 1例肾癌组织中 ,端粒酶阳性 48例 ,阴性3例 ;5 1例癌旁正常肾组织中 ,端粒酶阳性 2例 ,阴性 49例 ,二组阳性率差异有显著性 (P<0 .0 0 1) ,肾癌端粒酶活性与其恶性程度无相关性。结论 肾癌组织中端粒酶阳性率极高 ,可作为肾癌诊断的分子水平标志物。

肾细胞癌MN/CA9蛋白的表达及其生物学意义

目的 :研究MN/CA9蛋白的表达和肾细胞癌的关系 ,探讨MN/CA9蛋白在肾细胞癌诊断研究中的应用。方法 :应用免疫组化和免疫印迹的方法 ,对正常肾组织、良性肾损害和肾细胞癌组织的MN/CA9蛋白的表达进行了分析。结果 :正常人肾组织和良性肾损害均为MN/CA9阴性 ,而在 30例肾癌中却有 2 8例为MN/CA9阳性 ,尤其是 2 6例富糖原型RCC均呈现MN/CA9强阳性。结论

肺小病灶穿刺诊断同步实时跟踪X线立体定位系统的研究

目的研制新型的用于肺小病灶穿刺诊断的同步实时跟踪 X 线立体定位系统。方法采用 X 线电视影像技术及 X 线准直技术,结合双 C 臂双管 X 线机,从垂直向和水平向2个不同平面同步实时获取图像,经计算机图像处理和计算机视觉处理,确定并动态跟踪肺小病灶和穿刺细针的三维空间位置。结果垂直和水平向同时相交成像的两束 X 射线之间没有干扰,可以完成两路图像的同步实时采集,实现正常呼吸状态下肺部小病灶和穿刺细针空间位置的同步实时跟踪。组建的 X 线立体定位系统的平均定位误差为0.5 mm 左右,最大定位误差为1.0 mm 左右,实时显示速度为5帧/s。结论建立一种新型的双 C 臂双管同步实时跟踪 X 线立体定位系统是可行的,为肺小病灶同步实时跟踪立体定位穿刺肺癌早期诊断提供了可能。

CDKN2/p16基因5′-CpG岛SmaI位点甲基化与肺癌的关系

目的 研究CDKN2 /p16基因 5′端调控序列CpG岛甲基化的状态与肺癌发生发展的关系。方法 采用对甲基化敏感的核酸内切酶SmaⅠ ,酶切基因组DNA的方法 ,对 89例肺癌标本和 10例正常肺组织的CDKN2 /p16基因进行Southern杂交分析。结果 89例肺癌中 ,CDKN2 /p16基因甲基化者 15例 ,甲基化频率为 16 .9%。 42例p16蛋白阴性的肺癌患者中 ,有 12例发生甲基化 ,甲基化频率为 2 8.6 % ;另有 47例p16蛋白阳性患者中仅有 3例发生甲基化。 10例正常肺组织中均未发现CDKN2 /p16基因有甲基化现象。结论 CDKN2 /p16基因 5′端CpG岛甲基化是该基因失活的重要机制 ,是肺癌细胞区别于正常细胞的分子事件之一 。

液相芯片技术检测非小细胞肺癌多基因突变

目的建立基于高通量液相芯片技术、可同时检测p53、p16、视网膜母细胞瘤（Rb）和表皮生长因子受体（EGFR）基因热点突变的方法，并探讨其在非小细胞肺癌（NSCLC）分子诊断中的意义。方法针对p53、p16、Rb和EGFR基因热点突变位点，分别设计正常序列和突变序列探针，将探针固定于标记不同比例荧光物的微球上。分别提取65例NSCLC患者（Ⅰ期23例，Ⅱ期20例，Ⅲ期22例）癌组织标本和其中20例患者癌旁正常组织标本基因组DNA，PCR扩增p53、p16、Rb和EGFR基因。将PCR产物与含寡核苷酸探针的微球混合后用Luminex100多功能流式点阵仪进行流式荧光检测分析。结果单独检测p53、p16、Rb和EGFR基因突变时，NSCLC标本突变检出率分别为53．8％（35／65）、20．O％（13／65）、7．7％（5／65）和35．4％（23／65）；癌旁正常组织标本为5．0％（1／20）、5．0％（1／20）、0和0。而四基因联合检测，敏感性为81．5％（53／65），特异性为90．0％（18／20），准确性为83．5％（71／85）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期NSCLC标本突变检出率分别为78．3％（18／23）、80．0％（16／20）和86．4％（19／22）。结论成功建立了具有较高敏感性和特异性、可同时检测临床NSCLC标本多基因突变的液相芯片检测方法，该方法有助于提高NSCLC分子诊断的效率，并可能有助于NSCLC的早期诊断。

数字化肺癌细胞病理诊断系统的研制和临床应用

目的探讨数字化肺癌细胞病理诊断系统在临床肺癌细胞病理诊断中的应用效果。方法自动提取涂片上的细胞图像,运用 B 样条和改进 deBoor-Cox 方法对重叠细胞区域进行分离和可视化重构;运用基于强化学习技术的图像分割法将细胞区域从背景中分离出来,实现对目标图像的正确提取分割预处理;将细胞病理专家知识数字化用以提取较精确的细胞特征信息;运用决策树、支持向量机、贝叶斯等先进的分类算法,使系统拥有高精度和强分类能力,能同时进行癌与非癌的判断、肺癌细胞的分类(鳞癌、腺癌、小细胞癌及未分类癌)及核异型细胞评估。结果初步研制的数字化肺癌细胞病理诊断系统运行顺利,判断较为快速准确,随机应用于临床120例肺部病灶穿刺所得224幅细胞学涂片,肺癌识别诊断准确率92.3%,肺癌细胞的分类诊断符合率82.5%,核异型细胞判断识别率71.6%。结论数字化肺癌细胞病理诊断系统操作可行、对肺癌细胞学涂片判断准确率高,克服了重叠细胞识别率低、涂片染色差异和不良以及背景杂质等干扰因素,提供了相对客观统一的肺癌细胞病理学诊断策略,可用于肺部病灶穿刺细胞学识别分类诊断,为肺癌的早诊早治提供了一个重要的科学手段。

CDKN2/p16^(INK4a)基因克隆、探针制备及其在肺癌基因诊断中的应用

目的 克隆p16基因 ,制备探针 ,研究p16基因在人肺癌中的变化。 方法 制备总RNA ,逆转录PCR ,构建p16质粒 ,进行基因组DNASouthern杂交 ,检测了 46例人肺癌组织标本和 3例正常肺组织、6例癌旁组织、3例肺癌转移的淋巴结标本中p16基因的情况。 结果 EcoRI酶切进行基因组DNASouthern杂交 ,3例正常组织和 6例癌旁组织标本在 4 3kb处呈阳性杂交带 ,46例肺癌标本有 8例在 4 3kb处缺失 ,缺失率为 17 4%。 结论 p16基因缺失可能在肺癌的发生、发展中起一定作用。

CDKN2/p16基因存在状态与肺癌

目的 研究CDKN2 /p16基因缺失和蛋白丢失在肺癌发展中的作用。方法 采用免疫组化和改良标本处理的PCR技术 ,对 89例肺癌病人手术标本CDKN2 /p16基因第 1、2外显子纯合缺失和P16蛋白表达丢失情况进行分析对比研究。结果 CDKN2 /p16基因第 1或 (和 )第 2外显子总缺失率为2 5 8% (2 3/ 89) ,P16蛋白丢失率为 47 2 % (4 2 / 89) ,基因的缺失和蛋白的丢失集中发生于非小细胞肺癌(NSCLC) ,并与转移和分期有关。结论 CDKN2 /p16基因的异常可能是NSCLC区别于小细胞肺癌(SCLC)的特有的分子事件 。

必须重视肺癌术前病理学诊断

肺癌病理学诊断是肺癌诊断的金标准。循证医学要求肺癌化疗、放疗、手术治疗前必须要获得准确的肺癌病理学诊断。新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NAC)1982年Frei首次提出,1985年NAC用于局限期小细胞肺癌。南京八一医院全军肿瘤研究中心在小细胞肺癌术前病理学诊断、NAC、肺癌术后多学科综合治疗方面连续探索研究20多年,结合国内外临床研究逐步形成一种实用有效的小细胞肺癌"链式治疗"新模式——先明确病理学诊断+NAC(指有手术指征和手术条件者)+手术根治切除及纵隔淋巴结清扫+术后辅助化(放)疗+预防性全脑照射(PCI)+中医中药及免疫生物治疗等,使得肿瘤学行为特殊恶性程度极高的小细胞肺癌患者也能获得存活10年以上甚至27年的较为满意长期生存的好结果,由此有力印证:努力做好肺癌术前病理学诊断是必须的,也是有望做到的。

基于代价敏感图像层的肺癌细胞病理诊断系统

将代价敏感方法引入肺癌细胞图像识别,建立基于代价敏感图像层的肺癌细胞病理诊断系统(Cost-sensitive Image-level Lung Cancer Diagnosis System,CILCDS),并研究其临床应用价值。与既往方法比较,CILCDS在癌与正常细胞的判断以及癌细胞的分类识别诊断过程中取得了最低的错误分类代价0.37%以及更高的组织病理结果符合率97.61%。基于代价敏感图像层技术能够有效减少肺癌细胞病理诊断过程中的假阳性结果,有可能为肺癌细胞病理诊断提供一个更为有效的检测手段。