单克隆抗体技术在兽医细菌学诊断中的应用

1975年k(?)hler 和 Milstein 创立淋巴细胞杂交瘤技术以来,单克隆抗体(McAb)已在生物学和医学领域显示了极其广阔的应用前景。目前 McAb的应用主要集中在动物疾病的诊断、治疗、预防、理论性研究以及纯化和鉴定抗原等方面,临床应用尚有一定困难。近年 McAb 技术在兽医细菌学诊断方面取得了很大进展,有些 McAb 诊断试剂已应用于临床,并获得了重大经济效益。一、在产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)诊断中的应用ETEC 是引起幼畜和婴儿腹泻的主要病原体。ETEC 的致病性取决于它们在宿主小肠上皮细胞上定居的能力和产生肠毒素的能力,两者缺一不可。ETEC 产生的肠毒素有两种:耐热性肠毒素(ST)和不耐热性肠毒素(LT);其中 ST 又分为 STa 和STb 两种。ETEC

狂犬病毒微量滴定法的实验研究

由于狂犬病毒在普通细胞培养过程中无明显细胞病变,因此,对其毒力的滴定较为困难。本研究通过间接的手段建立的狂犬病毒微量滴定法,解决了狂犬病毒毒力的滴定,此法与经典的小鼠脑内接种法比较、特异、敏感、经济、持续周期短,重复性好,并且与半微量蚀斑法具有一定相关性。(一)材料与方法1.病毒株:鹿8202狂犬病毒株由侯世宽等人分离,见《兽医大学学报》1986年6(4):341～346;SAD狂犬病毒株由国外引进。

抗独特型抗体及其在寄生虫方面的研究进展

现代免疫学的飞速发展,使人们对疾病的认识不断受到启发,有些已付诸实践。如根据澳大利亚诺贝尔奖获得者Bunnet 关于动物体对侵入抗原所产生的抗体具有克隆选择性学说,由Kohler 和Milstein 在1979年创建的单克隆抗体(McAb)及其技术,不仅从理论上对抗体应答的持异性、免疫记忆、免疫耐受等现象作了较为满意的解释。

纤维素酶作为饲料添加剂的国内外研究进展

自1906年 Seilliere 在蜗牛的消化液中发现能分解天然纤维素的纤维素酶后,纤维素酶的研究和应用越来越受到世界各国的普遍关注.这主要是由于:纤维素酶是由内切β-葡聚糖酶(Cx)、外切β-葡聚糖酶(C_1)和β-葡萄糖苷酶三部分组成,三者协同作用可以把世界上产量最高、被人类所废弃的高纤维素类物质分解为易被动物所消化和吸收的低分子化合物和葡萄糖等.另外,纤维素酶在分解纤维素的同时,使细胞壁结构受到破坏,使细胞壁内容物溶解出来,提高了这些物质的利用率,从而全面地提高动物的生产性能.目前。

马(骡)体内伊氏锥虫循环抗原与抗体的相互关系研究

本文利用抗伊氏锥虫表膜抗原的单克隆抗体ELISA双抗体夹心法,对健康、人工接虫及先用伊氏锥虫弱毒株免疫后用强毒株攻击马(骡)血清的循环抗原(CAg)进行了追踪检测,同时用常规ELISA法检测了相应的循环抗体(CAb),结果为:CAg与CAb不全呈平行关系;部分免疫马(骡)首次攻虫前CAg即可呈现阳性,CAb为阴性;免疫马(骡)攻虫后大多经1～3个CAg高峰而后健活,CAg逐渐转阴,CAb则上升较慢,上升后则一直维持在较高水平:人工接虫马(骡)接虫后经1～2个CAg高峰而死,濒死前4/5动物CAg呈现阳性,而CAb在濒死前只有1/5呈现阳性;人工接虫马(骡)的CAg水平高于免疫马(骡),二次攻虫后的CAg水平高于首次。

驽巴贝西虫补反抗原的制造及应用研究

驽巴贝西虫病在我国每年均有不同程度的发生和流行,有的马场发病率可高达30%,死亡率10%左右,危害较大。本病的诊断,目前国内、外主要沿用临床症状观察、流行病学分析及虫体镜检等方法综合判定。

CDV疫苗毒在Vero细胞内包涵体形成规律的研究

采用Vero细胞生产CDV(犬瘟热)弱毒疫苗是目前国内外生产CDV疫苗的主要方法。若提高CDV疫苗的效价,必须掌握细胞株的选择、培养方法、收毒时间、疫苗的保存及疫苗的使用时机。为了把好疫苗的培养及收毒时间关,我们进行了CDV疫苗毒在Vero细胞内生长规律的试验。CDV病毒可在细胞内产生包涵体,用G和HE染色后在普通显微镜下即可进行检查。本试验结果表明,CDV疫苗毒在Vero细胞中生长。

人尿胰蛋白酶抑制剂工艺研究

报道了人尿胰蛋白酶抑制剂的提取新工艺。新鲜男性尿碱化除去沉淀,调 pH 4.0,用 PolyerdeⅣ搅拌吸附,吸附剂经抽滤、洗涤、NH_4HCO_3洗脱。冼脱液经硫酸铵沉淀、透析、冻干得产品。活性回收率为60～68%,比活为515～660 u/mg。

人尿促性腺激素生产新工艺研究

报道由绝经期妇女尿中提取、纯化人尿促性腺激素(HMG)的新工艺。尿液经乙酸酸化,Polyer-de-2吸附,10%乙酸铵-40%乙醇冼脱,乙醇沉淀,再经碱性离子交换层析纯化,所得初步纯化产物不含热原,FSH 活性为20 IU/mg,活性回收率为64～69%。

准备配种期公貂蛋白质需要量的研究

选用成年公貂44只,体重1.736±0.136公斤,随机分成5组,分别喂以蛋白质水平为34.2％、30.2％、25.2％、19.8％及11.4％的日粮,以探讨准备配种期公貂对蛋白质的需要量及氮沉积量与氮食入量的回归关系。试验结果表明,准备配种期公貂对蛋白质的维持需要量为7.5克/公斤,日粮蛋白质水平为17.4％;适宜需要量为11.0克/公斤,日粮蛋白质水平为25.2％;适宜蛋能比及动植物蛋白比为15.6及3.2。氮沉积景与氮食入量极其相关(P<0.01),相关系数为0.82。

人尿胰蛋白酶抑制剂与激肽释放酶联产及纯化的研究

本文探讨了采用Polyerde-3吸附剂,从男性尿中提取HUTI-HUKN粗品,再依次经抑肽酶-琼脂糖4B亲和层析、胰蛋白酶-琼脂糖4B亲和层析,将HUTI和HUKN分离并纯化。每20升尿液得精品HUTI50mg,比活1,250u/mg;HUKN3mg,比活666u/mg。活性回收率分别为41％和50％。

水貂流行性卡他性胃肠炎研究概况

水貂流行性卡他性胃肠炎(ECG)是以胃肠卡他性炎症为主要特征的传染病。本病首次报道于美国犹他州,又叫犹他州肠炎。随后加拿大、斯堪的纳维亚、苏联、丹麦等国亦相继报道了本病的发生。我国自1987年以来,由于从上述国家引进种貂,已在许多貂场暴发本病,给养貂业造成很大经济损失。目前世界许多国家正在对本病进行研究,并取得了一定进展,现就本病目前的研究情况概述如下。

马中毒性肠炎的病理学研究

马中毒性肠炎(急性结肠炎)是马属动物的一种急性致死性疾病。病的发生多与应激因素有关。在临床上依据患畜的体征和发展经过,分为轻症、重症和剧症三种类型。对轻、重症的救治,较易获得成功,对剧症多归于失败。在新发病地区,由于发现不及时,常导致误诊误治。本文仅就1983—1986年,从河南与吉林省发病地区。

鸡痘病毒载体研究进展

由于重组痘苗病毒在应用时存在着潜在的危险性,如散毒、发生接种并发症等,使其一直难以投入实际应用之中。于是,人们又发展了其它具有宿主特异性的痘病毒载体,如兔痘病毒、羊痘病毒和鸡痘病毒载体等。特别是近几年来,对鸡痘病毒的某些分子生物学特性进行了较多的研究,并构建了多种重组鸡痘病毒,为鸡痘病毒载体的应用奠定了基础,展现了良好的发展和应用前景。

鸡新城疫病毒V_4株对榛鸡的安全性与免疫原性研究

新城疫(Newcastle diease,ND)是鸟类的重要传染病,已经发现有19个目的鸟类可以感染,其中鸡型目鸟类是易感的宿主,这将对养禽业造成严重的损失。过去我们曾采用国内现行的鸡新城疫弱毒疫苗Ⅱ系、Ⅲ系。

鼻疽杆菌单克隆抗体的研究进展

鼻疽是由鼻疽杆菌引起的一种人畜共患的烈性传染病,而且又可能被用来制各生物战剂,因此,对它的研究十分必要。然而,由于过去传统方法的局限性,在鼻疽杆菌免疫学研究方面一直没有取得重大进展。近年来,在生物学各研究领域中广泛应用了淋巴细胞杂交瘤技术,该技术所产生的单克隆抗体具有高纯度。

人尿促性腺激素生产新工艺研究

新工艺采用新型专用吸附剂Pol-yerde-2从绝经期妇女尿中一步提取平均6.7iu/mg的HMG粗品,每升尿提取32-42iu。纯化工艺采用Amberlite IRA-400和DEAE-Cellulose柱层析,得到20iu/mg以上的精品,无热原。由粗品纯化至精品,活性回收率为64～66％。

大肠杆菌诊断的研究进展

大肠杆菌是肠道中最常见的一类细菌,依据它的致病性可分为产毒素性大肠杆菌(ETEC)、肠道致病性大肠杆菌(EPEC)、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、出血性大肠杆菌(ETEC)、尿道致病性大肠杆菌(UPEC)五大类。其中EHEC是引起幼畜腹泻的主要病原体,它的致病性取决于ETEC在宿主小肠上皮细胞上定居的能力和产生肠毒素的能力,两者缺一不可。

单克隆抗体对鼻疽和类鼻疽病原抗原及其血清学鉴别诊断的实验研究

应用抗鼻疽杆菌和抗类鼻疽杆菌的单克隆抗体(McAb),以间接 ELISA,IFA 以及免疫组织化学(下简称免疫组化)等技术方法,对来自不同地区的鼻疽杆菌(Ps.mallei)和类鼻疽杆菌(ps.pseudomallei)的表面抗原进行了分析。在此基础上,又对鼻疽(Malleus)和类鼻疽(Melioidosis)之间的血清学鉴别诊断等问题进行了研究。试验结果表明:(1)鼻疽杆菌和类鼻疽杆菌各自表达了不同的表面抗原反应类型,其间并有一定的交叉关系;(2)鼻疽杆菌和类鼻疽杆菌各株均与 McAb 2D4发生反应,说明表位2D4很可能为二菌所共有;(3)McAb4D4和1A9的类似抗体在鼻疽和类鼻疽血清都表现了较高的出现频率,说明其可能为二种血清的共有抗体成份;(4)McAb 3A1是仅同类鼻疽杆菌各株发生反应的特异性抗体。应用该 McAb,以相应的实验技术,有可能解决长期以来存在的鼻疽和类鼻疽菌体间和血清间的免疫学鉴别诊断问题。

猪瘟病毒反义cDNA片段的化学合成及克隆

猪瘟是猪最严重的传染病,流行于世界上许多国家和地区,并造成严重的经济损失。反义核酸对多种病毒增殖的抑制作用已被证实。为了探索反义核酸途径在抗猪瘟基因工程育种中的应用前景,我们化学合成和克隆了猪瘟病毒(Hog cholera virus)反义cDNA片段,现将结果报告如下。