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HGF非融合蛋白真核表达载体的构建及其在骨骼肌细胞中的表达
1
作者
郭亮
陈剑秋
+1 位作者
孙晋津
陈传贵
《临床军医杂志》
CAS
2007年第1期4-6,共3页
目的构建以HGF为目的基因、以EGFP为报告基因的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,并观察HGF基因在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中的表达。方法利用BamH 1单酶切质粒peDNA3-HGF,得到HGF基因片段,将其正向插入到真核表达载体pCMV...
目的构建以HGF为目的基因、以EGFP为报告基因的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,并观察HGF基因在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中的表达。方法利用BamH 1单酶切质粒peDNA3-HGF,得到HGF基因片段,将其正向插入到真核表达载体pCMV-IRES-EGFP的CMV后方BamH 1的单克隆位点。脂质体介导转染至原代培养的大鼠骨骼肌细胞,在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并用ELISA法检测HGF的表达情况。结果构建了HGF的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF—IRES—EGFP,转染原代培养的大鼠骨骼肌细胞24—72h后,见30%的细胞表达EGFP。ELISA检测细胞培养液证实转染后第1天即有HGF的表达,第4天HGF浓度为(5402.0±227.9)ng/L。结论成功构建了非融合蛋白真核表达载体pCMV—HGF—IRES—EGFP,其在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中能有效表达。
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关键词
肝细胞生长因子
细胞转染
骨骼肌细胞
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职称材料
题名
HGF非融合蛋白真核表达载体的构建及其在骨骼肌细胞中的表达
1
作者
郭亮
陈剑秋
孙晋津
陈传贵
机构
解放军军事交通学院卫生处
天津医科大学第二医院外科
出处
《临床军医杂志》
CAS
2007年第1期4-6,共3页
文摘
目的构建以HGF为目的基因、以EGFP为报告基因的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,并观察HGF基因在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中的表达。方法利用BamH 1单酶切质粒peDNA3-HGF,得到HGF基因片段,将其正向插入到真核表达载体pCMV-IRES-EGFP的CMV后方BamH 1的单克隆位点。脂质体介导转染至原代培养的大鼠骨骼肌细胞,在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并用ELISA法检测HGF的表达情况。结果构建了HGF的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF—IRES—EGFP,转染原代培养的大鼠骨骼肌细胞24—72h后,见30%的细胞表达EGFP。ELISA检测细胞培养液证实转染后第1天即有HGF的表达,第4天HGF浓度为(5402.0±227.9)ng/L。结论成功构建了非融合蛋白真核表达载体pCMV—HGF—IRES—EGFP,其在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中能有效表达。
关键词
肝细胞生长因子
细胞转染
骨骼肌细胞
Keywords
hepatocyte growth factor
gene transfection
skeletal muscle
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HGF非融合蛋白真核表达载体的构建及其在骨骼肌细胞中的表达
郭亮
陈剑秋
孙晋津
陈传贵
《临床军医杂志》
CAS
2007
0
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职称材料
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引证文献
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