聚合酶链反应(PCR)鉴定马肉方法的建立及应用

依据马卫星DNA序列设计了1对引物,建立了PCR鉴定生、熟马肉的方法。应用本方法特异地扩增出预期的马186bpDNA片段,其检测敏感度对生马肉达28.6fgDNA;对熟马肉和高压马肉为0.254pg。运用该引物仅可扩增出马DNA的单一片段,而对牛、绵羊、山羊、骆驼、驴、骡、猪等12种动物肉的DNA扩增则呈阴性。利用本方法对54份生、熟马肉进行鉴定,正确鉴定率为100％,对各种样品检测,均可在6h内完成。

聚合酶链反应(PCR)鉴定羊肉方法的建立及应用

应用自行设计合成的羊DNA引物特异性地扩增出羊1.714卫星DNA序列中277bP的DNA片段,建立了扩增羊DNA片段鉴定生熟羊肉的PCR方法。本法检测的敏感度为:生羊肉为38.48fg全基因组DNA;熟羊肉和高压羊肉分别为0.364Pg和0.361Pg的全基因组DNA。设计合成的羊DNA引物可以扩增出绵羊、山羊、滩羊、细毛羊、羯羊五种羊肉DNA的同一目的DNA片段,而对牛、马、驼、鹿、猪等十五种动物DNA无扩增效果。利用本法对40份生、熟羊肉样品进行鉴定,其阳性率为100％。对各种肉类样品的检测均可在6h内完成。

人α-卫星DNA特异性片段的体外扩增

本研究依据α-卫星DNA序列,经计算机辅助PCR引物分析和设计软件处理,10对引物,从中优选出5对,进行引物内聚体、二聚体分析,选出最优引物1对,用DNA合成仪合成:引物Ⅰ:5′-ATTAGCCAACTGTTTCC-CTGC-3′,合成浓度2.145/μg/μl;引物Ⅱ:5′-GTCTTGCTTCTTTCAAAGCGC-3′,合成浓度3.135μg/μl;设计扩增长度157 bp。

聚合酶链反应鉴定马肉方法的建立及应用

依据马卫星DNA序列设计了1对引物,建立了PCR鉴定生、熟马肉的方法。引物Ⅰ 5′-GTTGTGCCTTTCAGCTCTAGG-3′,合成浓度2.64μg/μl;引物Ⅱ 5′-ACAGCATCTTG-CATCCAGC-3′,合成浓度2.97μg/μl,设计扩增长度为186bp。PCR扩增体系为50μl,循环参数为94℃ 40s、49.5℃ 50s、72℃ 60s,35个循环后72℃保温延伸7min,产物经3％琼脂糖凝胶电泳鉴定。应用本方法可以从生鲜马肉、煮熟马肉、高压马肉的全基因组DNA中扩增出186 bp的目的DNA条带,而对牛、羊、猪、驼、鹿等15种动物的DNA扩增则呈阴性反应。

东北地区黄牛不同组织中HBsAg.HBeAg分布情况调查

用ELISA方法检测43头东北黄牛血清、肝脏和肌肉中乙型肝炎的HBsAg和HBeAg结果表明,同一动物不同组织中两种抗原分布不同,HBsAg阳性:肝脏27.9％、肌肉9.3％、血清2.3％;HBeAg阳性:肝脏11.6％而肌肉和血清均为阴性。实验结果说明:在检测动物乙型肝炎时,应测试两种指标,在动物与人类乙型肝炎相关性研究中,动物肝脏应当引起人们的高度警觉。

中国人血小板生成素基因的克隆

从5mo龄水囊引产胎儿肝脏中分离提取mRNA，经反转录PCR方法扩增出中国人全长血小板生成素（TPO）cDNA，然后将该cDNA片段重组入pGEM3Zf载体，并进行了限制性内切酶鉴定与序列分析，该cDNA全长1059bP，编码353个氨基酸。为开展TPO在真核细胞中的表达打下了基础。

肉压汁中蛋白质含量及分子量与肉品质量关系的试验研究

肉品在贮存过程中,随时间的推移,肉中的许多物质会发生各种复杂的生物化学变化。本研究利用双缩脲法及聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳测定压汁中蛋白质含量和分子量的变化。结果表明:随着肉品僵直、解僵、成熟、自溶和腐败的发展,肉压汁中蛋白质含量和分子量也呈现规律性变化。

“苯猪肉风波”及苯猪肉的检测

1992年上半年,四川成渝地区由于有个别肉贩非法出售含有有毒化学物质苯的猪肉而酿成波及全省乃至全国的“苯猪肉风波”。 据调查,在前一时期,由于胆红素紧俏,一些人纷纷投入到从猪胆汁中提取胆红素的行列中来。而一些急于发财者则采用活猪引流胆汁的方法。