HIV-1 Gag蛋白在重组痘苗病毒中的高效表达及其特性分析

在构建3株人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV－1）Gag基因重组痘苗病毒的基础上，实现了Gag蛋白的高效表达，3株重组病毒在感染细胞中表达量分别为14．7、6．0和4.5μg／106细胞／20h，接近杆状病毒的表达水平。表达的重组蛋白可形成病毒样粒子（VLP），并可诱导小鼠产生抗HIV抗体。

HIV-1长末端重复序列对重组痘苗病毒表达Gag蛋白的影响

将系列缺失的ＨＩＶ１长末端重复序列（ＬＴＲ）和全长的ｇａｇＯＲＦ置于痘苗病毒载体中，经同源重组和血球吸附试验，成功地构建了６株重组痘苗病毒。免疫印迹和免疫酶试验检测均表明，６株重组病毒的Ｇａｇ蛋白表达量因ＬＴＲ不同而有明显差异，表明ＨＩＶ１的ＬＴＲ及其下游基因置于痘病毒启动子控制下，在痘苗病毒中表达时有下述特点：（１）不同的痘苗病毒启动子与全长ＬＴＲ相互作用，对ｇａｇ基因表达有显著不同的调控效果；（２）ＮＲ序列对Ｇａｇ蛋白表达没有明显影响；（３）ＥＮ序列不能被重组痘苗病毒表达系统识别；（４）ＴＡＲ序列可提高Ｇａｇ蛋白的表达量；（５）Ｕ５区及下游非翻译序列不影响Ｇａｇ蛋白的表达。