顺铂通过抑制转移抑制基因1-细胞外信号调节激酶及丝氨酸/苏氨酸激酶激活抑制HeLa细胞增殖

目的研究顺铂（DDP）抑制He La细胞增殖的分子机制。方法用顺铂0.02~75μmol·L-1处理He La细胞24或48 h,CCK-8法检测细胞存活,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量PCR（q-PCR）检测转移抑制基因1（MTSS1）基因的表达,Western蛋白质印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶（p-AKT）和转移抑制基因1（MTSS1）蛋白水平。结果不同浓度DDP处理He La细胞24或48 h,可明显抑制He La细胞增殖（P〈0.05）,细胞的半数抑制浓度（IC50）值分别为4.14和11.82μmol·L-1;DDP处理组He La细胞较对照组迁移能力下降（P〈0.05）;DDP使He La细胞周期阻滞于S期;DDP抑制He La细胞MTSS1的基因表达,存在明显的浓度效应关系（r24 h=-0.965,P〈0.01;r48 h=-0.953,P〈0.01）;p-ERK,p-AKT及胞内MTSS1蛋白表达水平均随DDP浓度增加显著下降（pERK：r24 h=-0.875,P〈0.01;r48 h=-0.966,P〈0.01;p-AKT：r24 h=-0.831,P〈0.01;r48 h=-0.863,P〈0.01;MTSS1：r24 h=-0.969,P〈0.01;r48 h=-0.988,P〈0.01）。结论 DDP可能通过下调MTSS1的表达水平并抑制ERK和AKT信号通路的激活而抑制宫颈癌He La细胞增殖和迁移。

高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的意义

目的 比较高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV） E6/E7 mRNA与HR-HPV DNA检测（HC-2、Cervista）方法在宫颈病变中的诊断性能,探讨其在宫颈病变筛查中的作用及意义.方法 选取201 1年10月至2012年12月就诊于解放军总医院妇产科172例妇女,分别做宫颈脱落细胞的液基细胞学检查（TCT）、HC-2、Cervista、HR-HPV E6/E7 mRNA检测,阴道镜检查及宫颈活体组织检查,以组织学证实的高级别宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ或更高（Ⅱ＋）为研究终点.结果 HR-HPV E6/E7mRNA阳性率在未见上皮内病变或恶性（NILM）中为37.9％,在意义不明的非典型鳞状细胞（ASCUS）和低度鳞状上皮内病变（LSIL）中为67.9％（36/53）,在非典型鳞状细胞不能排除高度鳞状上皮内病变（ASC-H＋）中为88.5％ （54/61）.HR-HPV E6/E7 mRNA阳性率在CIN I-中为38.6％,在CINⅡ～Ⅲ为77.4％,在SCC中为92.5％.在CINⅡ＋人群中HR-HPV E6/E7 mRNA检测特异度明显高于HC-2、Cervista（61.4％和54.3％,55.7％,P＜0.05）,并具有更高的阳性预测值（75.9％、74.8％及74.6％）.比较HR-HPV E6/E7 mRNA、HC-2和Cervista的ROC曲线,HR-HPV E6/E7 mRNA曲线下面积最大,诊断效能最佳.结论 HR-HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变筛查中比HC-2和Cervista检测具有更高特异性,为预测宫颈病变进展及宫颈癌筛查分流提供了新思路.

宫颈癌中MTSS1基因的表达及其临床意义

目的检测宫颈正常组织以及不同临床分期宫颈癌组织中转移抑制基因1(metastasis suppressor 1,MTSS1)的表达,分析该基因在各组织中的变化与临床病理因素的关系,并初步探讨该基因在宫颈癌发生发展及转移过程中的作用及分子机制。方法取2011年12月至2014年12月期间采集的103例宫颈组织,病理切片诊断患者宫颈组织类型,判断分化程度,应用实时荧光定量PCR(q-PCR)和Western印迹法检测不同宫颈组织中MTSS1基因及其蛋白的表达水平。结果 q-PCR结果提示,ⅡB-Ⅳ期宫颈癌组MTSS1基因表达量明显高于正常宫颈组及Ⅰ-ⅡA期宫颈癌组,3组间均有明显差异(P=0.000);Western印迹检测MTSS1蛋白在正常宫颈组织中的阳性表达率为23.3%,在宫颈癌组织中为53.3%,两组间差异明显(P=0.002);MTSS1在宫颈癌组织中的表达与年龄、分化以及有无淋巴结转移均无明显相关性(P>0.05),而在临床分期中,ⅡB-Ⅳ期MTSS1蛋白表达率明显高于Ⅰ-ⅡA期的宫颈癌组织(P=0.005)。结论 MTSS1的表达与宫颈癌的临床分期呈正相关趋势,该基因可能在宫颈癌的发生发展中起着重要的作用。