大鼠骨髓间充质干细胞培养的首次换液模式

背景:细胞的培养时间、数量及纯度是影响干细胞移植的关键因素,优化体外细胞培养模式可以提高移植的成效。目的:观察不同的首次换液模式、相同的后期换液条件对大鼠骨髓间充质干细胞培养时间及生物学特性的影响。方法:全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,按首次换液方式分为以下6组:24h半量换液组、24h全量换液组48h半量换液组、48h全量换液组、72h半量换液组、72h全量换液组,以后每4h全量换液。记录各组第0～3代培养时间及细胞纯度。结果与结论:各组培养总时间比较差异有显著性意义(F=46.455,P<0.05),48h全量换液组最短,24h全量换液组最长与其他组比较差异均有显著性意义(P<0.05)。24h全量换液组各代细胞纯度均最高,72h半量换液组各代细胞纯度均最低与其他组比较差异均有显著性意义(P<0.05)。所获细胞CD29、CD90阳性,CD34、CD45阴性,可以向成骨、成脂诱导分化。结果显示首次换液方式能影响大鼠骨髓间充质干细胞的培养周期及其纯度,48h半量换液为最佳首次换液方式。

不同首次换液模式对大鼠骨髓间充质干细胞培养的影响

目的探讨不同首次换液模式对大鼠骨髓间充质干细胞培养的影响。方法全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,按首次换液方式分为以下6组：A.24 h半量换液;B.24 h全量换液;C.48 h半量换液;D.48 h全量换液;E.72 h半量换液;F.72 h全量换液,以后每48 h全量换液。记录各组P0~P3培养时间及细胞纯度,流式细胞仪及成骨、成脂诱导鉴定,MTT法检测细胞增殖能力。结果各组培养总时间比较差异具有统计学意义（F=46.455,P〈0.05）,D组最短（16.61±1.61）d,B组最长（21.50±1.70）d,B、D组与各组间差异均具有统计学意义（P〈0.05）。B组各代纯度均最高,P3纯度达（90.84±2.19）%。E组各代细胞纯度均为最低,P3纯度为（76.04±3.21）%。P3代纯度比较,B、E组与其他各组差异有统计学意义（P〈0.05）。所获细胞CD 29、CD 90阳性、CD 34、CD 45阴性,向成骨、成脂诱导分化,MTT检测显示细胞增殖能力良好。结论首次换液方式能影响大鼠骨髓间充质干细胞的培养周期及其纯度,48 h半量换液为最佳首次换液方式。

功能磁共振成像与弥散张量成像联合监测视觉通路异常在高压氧治疗前后的结构及功能变化

目的:联合应用血氧依赖功能磁共振成像(BOLD-fMRI)和弥散张量成像技术评价视觉通路异常高压氧患者在康复过程中脑功能和解剖结构的重组特点。方法:①临床资料:选择2006-01/2007-05解放军南京军区福州总医院收治的因视觉通路病变致单侧或双侧视觉障碍的16例患者为病变组,均接受2个标准大气压高压氧治疗3个疗程。以性别、年龄与病变组大致匹配的正常视力者12例作为正常对照组。②磁共振扫描及分析:两组以相同条件,采用黑白棋盘格变化刺激双眼,应用Signa xcite HD 1.5T双梯度16通道磁共振成像系统进行测试。BOLD-fMRI数据处理采用AFNI软件包进行,弥散张量成像应用日本东京大学影像计算和分析实验室开发的Volume-one 1.64下的dTV.II.R1软件进行数据处理。③观察指标:病变组高压氧干预前后BOLD-fMRI激活体数和弥散张量成像表现,并与正常对照组比较。结果:28例受试者均进入结果分析。①BOLD-fMRI激活体数值:病变组高压氧治疗前视皮质激活体数低于正常对照组(P<0.01),高压氧治疗后视皮质激活体数与正常对照组比较差异不显著(P>0.05),但高于高压氧治疗前(P<0.05)。②弥散张量成像示视放射部分各向异性值:病变组高压氧治疗前部分各向异性值低于正常对照组(P<0.05),高压氧治疗后与正常对照组比较差异不显著(P>0.05),且显著高于高压氧治疗前(P<0.05)。病变组中的6例视神经病变患者视放射显示完整,康复前后的视放射部分各向异性值与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05),10例枕叶视中枢病变患者视放射纤维部分中断,视放射各向异性值低于视神经病变患者(P<0.05)。结论:BOLD-fMRI联合弥散张量成像能从功能和结构方面探讨视觉通路病变的发生、发展及康复过程,为脑功能的康复提供较为可靠的治疗依据。

胰岛细胞移植磁共振扫描活体示踪的序列优化

背景:细胞移植领域仍缺乏有效的方法活体示踪观察细胞移植后体内的转归,随着分子影像学的发展使磁共振移植细胞活体示踪技术成为可能。目的:对胰岛细胞移植磁共振成像活体示踪的扫描序列和参数进行优化,提高胰岛细胞移植磁共振扫描活体示踪结果的可靠性。方法:通过SD大鼠门静脉输注超顺磁氧化铁纳米颗粒菲立磁标记的胰岛细胞,固定于7cm小动物专用线圈,在临床1.5TMR上分别采用SET1W、FSET2W、FGRE、SPGR对移植前后大鼠肝脏进行扫描,观察输注胰岛细胞前后研究部位的信号变化,并比较不同序列SPIO标记胰岛细胞与周围肝脏组织的对比度噪声比。结果与结论:FGRE和SPGR都可以较好地克服腹部呼吸运动伪影,敏感地显示超顺磁氧化铁纳米颗粒菲立磁标记的胰岛细胞。标记胰岛细胞在SD大鼠肝脏MRI图像上表现为斑点状的信号减低区,广泛分布于肝脏各部位。结果显示磁共振扫描可以对肝内胰岛移植物进行有效示踪,序列的选择至关重要。