CD基因在结肠癌细胞表达的分子成像研究

目的:研究CD基因在结肠癌细胞表达的分子成像分析。方法:通过逆转录病毒介导方法,将编码大肠杆菌的CD基因转染到人结肠癌细胞系SW1116。通过19F-NMR波谱分析CD基因在人结肠癌细胞中的表达状况,MTT方法检测5-FC的细胞毒作用。结果:19F-NMR波谱分析显示,转导CD基因细胞在774μmol/L5-FC浓度培养24h后的样品,在δ-91.7和δ-93.3显示了2个双峰,分别是5-FC和5-FU的19F-NMR的信号,提示5-FU是SWCD2细胞内的CD酶催化5-FC的代谢产物。转基因的肿瘤细胞SWCD2中表达了CD基因,对前药5-FC的敏感性较亲本肿瘤细胞SW1116明显增高,50%细胞生长抑制率(IC50)为66μmol/L,而SW1116细胞IC50为16000μmol/L。结论:CD基因表达的代谢产物不但对结肠癌细胞恶性生长具有抑制作用,而且CD基因具有分子成像标记基因的功能。

CD基因表达诱导结肠癌细胞的凋亡作用

目的:研究胞嘧啶脱氨酶(cytosinedeaminase,CD)基因表达是否具有诱导结肠癌细胞凋亡的作用。方法:用不同浓度的5氟胞嘧啶(5flurocytosine,5FC)加至CD基因阳性人结肠癌细胞株SW1116培养,MTT法检测5FC药物对结肠癌细胞生长抑制作用。AnnexinV/PI法分析细胞凋亡率,用透射电镜观察细胞结构改变。结果:与未导入基因的SW1116细胞相比,CD基因阳性细胞对5FC的敏感性明显增加,50%细胞生长抑制率(IC50)浓度由SW1116细胞的16000μmol/L降低到SWCD2的66μmol/L。CD基因导入细胞能够增加5FC诱导的细胞凋亡率。SW1116细胞凋亡率:未加药为2.52%,加药24h为4.61%,48h为2.25%,72h为8.41%;而SWCD2的凋亡率:未加药为4.81%,加药后24h为4.73%,48h为20.78%,72h为32.92%,细胞凋亡率的增加与给药时间成正比。电镜下可见明显的凋亡细胞形态特征。结论:CD基因表达对人结肠癌细胞生长的抑制作用涉及肿瘤细胞凋亡机制。