脓毒症小鼠肝窦内皮细胞细胞因子的基因表达

目的 探讨肝窦内皮细胞细胞因子表达在脓毒症小鼠肝损伤中的作用。方法 采用盲肠结扎穿孔(CLP)制造小鼠脓毒症模型,假手术组(Sham)接受同样的手术操作但不行CLP。分别在致伤后3,12h分离肝窦内皮细胞,用RT-PCR的方法定量检测肝窦内皮细胞中肿瘤坏死因子α(TNFα),白细胞介素1β(IL1β)及白细胞介素6(IL6)的基因表达。结果 肝窦内皮细胞TNFα,IL1β基因表达在CLP后3h即明显增高,至12h时虽有所降低但仍明显高于Sham组;IL6基因的表达在CLP后3h明显增高,至CLP后12h仍维持在高水平。结论 肝窦内皮细胞是脓毒症时肝组织中细胞因子的重要来源之一。

筛选适宜于构建工程化肝组织的凝胶材料支架

目的使用不同可注射性凝胶支架体外进行新生大鼠肝细胞立体培养,为后期体内植入筛选相容性较好的支架材料。方法使用胰酶冷消化法分离新生大鼠肝细胞。将肝细胞分别与纤维蛋白胶、壳聚糖凝胶、鼠尾胶原、透明质酸钠支架材料复合,形成工程化肝组织凝胶,接种于培养板中,并通过定期光镜来观察大鼠肝细胞,四唑盐(MTT)比色法评价细胞活性。溴甲酚绿法测上清白蛋白含量,脲酶比色法测定上清尿素含量。结果四组均可形成三维生长的工程化类肝样组织。培养第4天,生物蛋白胶及壳聚糖组的培养上清液中尿素含量达到高峰,分别为培养第1天的1.31倍和1.28倍,随后含量缓慢下降。培养第7天,新生大鼠肝细胞在纤维蛋白凝胶及壳聚糖凝胶中密集生长,同时MTT显示细胞活性及白蛋白分泌达到高峰,OD值分别为培养初期的1.11倍和1.17倍,上清白蛋白含量分别是初期的1.13倍和1.15倍。而在透明质酸钠及鼠尾胶原凝胶中则细胞生长缓慢,白蛋白及尿素含量持续下降。结论 4种可注射性支架中,壳聚糖和生物蛋白胶对于新生大鼠肝细胞生物相容性较好,透明质酸和鼠尾胶原较差,前两者更适合用于工程化肝组织的构建。

结肠癌肺转移小鼠高调节性T细胞浸润模型的建立与鉴定

本研究旨在建立小鼠结肠癌肺转移高调节性T细胞（Tregs）浸润模型，现报道如下。一、材料与方法1．动物模型构建：经尾静脉注射BALB／C小鼠结肠癌高转移细胞株（C126），建立结肠癌肺转移模型。2．病理组织学检测：用Bouins液对小鼠肺组织进行固定、染色，对肺转移灶结节进行分级及计数。