去细胞神经移植物重建面神经缺损的研究进展

面神经损伤是较常见的周围神经损伤类型之一,面神经缺损的重建是亟待解决的重要问题。作为近年新兴的神经修复材料,去细胞神经移植物已应用于面神经修复的研究中,并取得了一系列进展。去细胞神经保留的基膜结构和细胞外基质除支撑作用外,还可以招募细胞或诱导细胞分化。去细胞技术的改进可以使神经移植物具有更好的生物活性和组织相容性。本文对去细胞技术和去细胞神经在面神经修复中的研究进展进行综述,以期为今后该领域的研究提供基础。

脂肪干细胞向软骨细胞方向诱导的初步研究

目的 :研究脂肪干细胞的分离及向软骨方向定向诱导的方法。方法 :从成年兔颈后部或腹股沟处脂肪组织取材 ,酶消化法分离、培养脂肪干细胞 ;免疫荧光测定CD3 4 抗原的表达 ;流式细胞仪测定CD3 4 抗原百分比 ;分别用15 %牛血清、少血清 (5 % )及无血清诱导培养基定向软骨细胞方向诱导 ;组化及免疫组化鉴定软骨细胞特性。结果 :从兔脂肪组织中能分离出生长旺盛的干细胞 ,CD3 4 抗原表达阳性 ,表达百分比与骨髓干细胞无明显差异 ;定向诱导后表现出软骨细胞的特性 ,诱导效果无血清诱导培养基效果最好。结论 :从兔脂肪组织中能分离出干细胞 ;生物学特性与骨髓干细胞相似 ;能向软骨细胞方向诱导 ;无血清诱导培养基效果最好。

体外冲击波促进兔ACL重建后腱骨愈合的实验研究

[目的]观察采用体外冲击波(extracorporeal shock waves,ESW)治疗对ACL重建后腱骨愈合的影响。[方法]采用趾长伸肌肌腱建立兔ACL重建动物模型,2～3个月龄雌雄不限健康新西兰大白兔18只随机分为2组,ESW组ACL重建术后24h给予冲击波治疗,对照组ACL重建术后不给予冲击波处理,术后2、4、8周处死动物取标本做HE和Masson三色染色观察组织愈合病理学改变,血管墨汁灌注观察愈合组织新生血管含量。[结果]ESW组术后4周腱骨界面成纤维细胞和成软骨细胞增生活跃,胶原纤维合成明显增多、排列规则。术后8周腱骨界面由致密结缔组织连接,胶原纤维大量合成,呈垂直纵向规则排列,部分区域出现胶原纤维-纤维软骨组织-骨组织的移行带改变,形成类似韧带直接止点样结构。腱骨界面组织愈合较对照组迅速。术后4周和8周腱骨界面新生血管的含量ESW组显著高于对照组(P=0.028,P=0.008)。[结论]体外冲击波治疗可显著促进兔ACL重建后早期腱骨愈合。

凉血活血中药治疗放射性肺损伤的实验研究

Objective To investigate the effect of blood-cooling and promoting drugs (BCPD) on the dynamic changes of collagens and the expressions of interleukin-6 (IL-6)and transforming growth factor beta (TGF-β) in lung tissue of rats with radiation-induced lung injury (RILI) to explore the effects and action mechanism of BCPD in preventing and treating RILI. Methods One hundred and sixty Wistar female rats were randomly divided into the radiation group, the treatment group, the blank control group and the drug control group. The rats in the first two groups received right hemithoracic fractionated radiation, and those in the treatment group were given BCPD. Rats in the other two groups were not irradiated and BCPD was given to rats in the drug control group. The rats were sacrificed in batches (8 of each group in every batch) at the 3rd, 5th, 8th, 12th and 26th week of the experimental period, and their lung was taken for observing the dynamic changes and distribution of collagen and the expressions of IL-6 and TGF-β with HE staining, picrosirius red staining and immunohistochemical staining respectively. Results The fibroblast proliferated obviously from the 3rd week after the first radiation in the radiation group, and the type Ⅰ collagen and the proportion of type Ⅰ and Ⅲ collagen were significantly elevated along the time going and the radiation dose increasing, became significantly higher than those in the treatment group at all the time points (P<0.01). In the radiation group the expression of IL-6 and TGF-β reached their peaks at the 8th and 12th week, respectively, and the levels was significantly lower in the treatment than that in the radiation group at any detecting time points (P<0.01). Conclusion BCPD applied in the early stage of radiation can suppress the inflammatory and fibrogenic cytokine expressions, inhibit the synthesis of collagens and adjust the proportion of type Ⅰ and Ⅲ collagen, so as to relieve the early-stage inflammatory reaction and the anaphase lung fibrosis in RILI rats.

骨髓基质细胞与关节软骨细胞生物学特性的比较研究

目的 观察兔骨髓基质细胞 (MSCs)诱导和基因修饰后的主要生物学特性 ,并与关节软骨细胞进行比较。 方法 抽取成年雄性新西兰大白兔髂骨骨髓 ,密度梯度离心获得骨髓基质细胞 ,培养传至第 5代 ,按处理方法分为常规培养液组 (A组 )、条件培养液组 (B组 )及重组缺陷型腺病毒携带肝细胞生长因子 c DNA转染组 (C组 )。条件培养液为常规培养液中含转化生长因子 - β1 (10 ng/ml)、碱性成纤维细胞生长因子 (2 5 ng/ml)和地塞米松 (10 - 7mol/L)。切取兔膝关节软骨 ,3mg/ml 型胶原酶消化传代培养至第 3代 (D组 )。观察原代 MSCs及第 5代 MSCs(体外培养 8～ 10周后 )细胞形态 ,对第 5代 MSCs及第 3代软骨细胞进行 、 型胶原免疫组织化学染色 ,MTT法检测细胞增殖情况。阿利新蓝法检测细胞培养上清液中糖胺多糖 (GAG)含量。提取各组培养细胞总 RNA,RT- PCR检测 、 型胶原表达。 结果 原代 MSCs为短梭形、簇状生长 ,传代细胞呈长梭形、旋涡样生长。A组细胞爬片 型胶原免疫组织化学染色阳性 , 型胶原免疫组织化学染色阴性 ,GAG含量低 ,与 D组比较 ,差异有统计学意义 (P<0 .0 5 )。B组细胞爬片 、 型胶原免疫组织化学染色阳性 ,GAG含量升高 ,与 D组比较差异无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;C组转染后第

血管修复材料的一维拉伸实验研究

目的:从生物力学的角度筛选适合进行血管修复的生物材料。方法:选择兔的深筋膜、腹膜,和去抗原处理的脱细胞颈动脉、冷冻干燥颈动脉和经过戊二醛处理的犬股动脉、腹膜等进行一维力学拉伸实验,以兔正常的颈动脉、静脉作为对照。结果:所有组材料的力学强度都明显大于静脉对照组,深筋膜和腹膜组又显著大于其他组;伸长率、伸长比、Lagrange张应变检测值以静脉对照组和脱细胞组最大,经过戊二醛处理组的最小;经过戊二醛处理的组织材料,滞后环变化小且不明显,伸展性降低,脆性增加,但对破坏载荷和Lagrange张应力影响不大。结论:脱细胞、冻干颈动脉的力学性质和粘弹性最接近于正常血管,正常深筋膜组次之,而经过戊二醛处理的组织材料,力学强度虽好,但粘弹性较差。

补肾活血颗粒改善帕金森病患者生活质量的随机安慰剂对照临床研究

背景:帕金森病(Parkinson disease,PD)以静止性震颤、肌强直和动作迟缓等运动障碍为主要临床表现,目前缺乏有效的治疗手段,严重影响患者的生活质量。我们既往运用补肾活血法治疗PD取得了较好疗效。目的:研究补肾活血颗粒对帕金森病患者生活质量的影响。设计、场所、对象和干预措施:采用随机双盲、安慰剂对照临床试验方法,将在解放军总医院就诊的120例PD患者用在线随机系统分成治疗组60例和对照组60例。其中治疗组服用补肾活血颗粒,对照组服用安慰剂,2次/d,均以美多巴等西药为基础治疗。前3个月为治疗观察期,疗程结束后带药随访6个月。主要结局指标:采用统一帕金森病评定量表第3版第二部分、帕金森病生存质量量表、帕金森病睡眠量表从几个方面分别评定患者治疗前后生活质量的变化。结果:补肾活血颗粒组治疗不同时间后统一帕金森病评定量表第3版第二部分评分、生存质量量表及睡眠量表评分在治疗观察期及随访观察期中均较安慰剂组改善(P<0.05,P<0.01)。研究过程中未发现不良反应。结论:补肾活血颗粒可明显改善PD患者生活质量。

补肾活血颗粒对帕金森病患者运动功能的影响:多中心、随机、双盲、安慰剂对照研究

背景:帕金森病(Parkinson's disease,PD)以静止性震颤、肌强直、动作迟缓等运动障碍为主要临床表现,目前缺乏有效治疗手段,严重影响患者的生活质量。我们既往运用补肾活血法治疗PD取得较好疗效。目的:评价补肾活血颗粒改善PD患者运动功能的有效性。设计、场所、对象和干预措施:采用多中心、随机双盲、安慰剂对照临床试验方法,共纳入120例PD患者,分别来自解放军总医院、广东省中医院、西安西京医院和唐都医院门诊及部分北京地区的干休所和社区。将其随机分为补肾活血颗粒组和安慰剂组,两组均以西药治疗为基础,补肾活血颗粒组加服补肾活血颗粒,安慰剂组加服安慰剂。由于补肾活血颗粒组有5例脱落,安慰剂组有1例因违反治疗方案而被剔除,还有8例脱落,最终完成治疗观察者共106例,其中治疗组55例,对照组51例,疗程均为3个月。主要结局指标:从运动量表、运动试验及肌张力检测等方面全面评价临床疗效,每个月随访1次。结果:补肾活血颗粒组治疗后不同时间UPDRSⅢ评分、10米折返运动试验中起立时间及静息状态肌张力检测指标与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且时间因素与处理因素存在交互作用(P<0.05,P<0.01)。记时运动试验及10米折返运动试验中折返行走及转弯时间等指标,补肾活血颗粒组治疗后不同时间与治疗前比较,差异均无统计学意义(P>0.05),时间因素与处理因素也不存在交互作用(P>0.05)。与安慰剂相比,补肾活血颗粒降低患者UPDRSⅢ的评分,缩短患者起立时间及改善患者肌张力的疗效更明显。研究过程中未发现明显不良反应。结论:补肾活血颗粒加西药在缓解PD患者运动功能障碍方面的效果优于单用西药治疗。

周围神经损伤与再生:新型修补材料的应用研究与进展

背景:虽然自体神经移植是当前治疗大段神经缺损的金标准,但因其应用受到诸多限制,因此科学家从未放弃探索新型神经修补材料。目的:回顾近年来周围神经损伤领域产生的新观点、再生过程中的关键细胞及新型神经导管的应用。方法:由第一作者检索2001至2016年Pub Med数据库收录的与组织工程神经支架材料相关的文献,检索词为"peripheral nerve injury,peripheral nerve regeneration,nerve scaffold",按纳入、排除标准最后共纳入文献76篇进行综述。结果与结论:周围神经的修复主要集中在如何让再生的神经长得"快"与长得"准"上,未来除了应继续拓展开发生物相容性更好的材料外,还应优化设计,在分子细胞和组织层面多层次模拟神经再生微环境,模拟建立取向纳米结构、化学组分、生物信号时空分布等多重仿生神经移植物。应明确的是,神经导管不应只是简单的力学支撑,还应具有一定功能,如导电、细胞因子梯度缓释等。仿生也不应只局限于形态学上,还应拓展到如细胞因子的时空变化、细胞生物电刺激等方面上来。

经皮神经电刺激预防失神经肌萎缩的实验研究

目的:观察经皮神经电刺激(TENS)在减轻失神经肌肉萎缩和提高神经端侧缝合侧枝萌出率中的作用。方法:18只成年新西兰白兔,随机分为A、B、C3组,切断双侧腓神经后与外膜开窗的胫神经端侧缝合。左后肢为实验侧,给予TENS,持续6周。右后肢为对照侧,不给电刺激。分别于术后3、6、16周取材,进行大体观察、神经肌肉组织学、神经电生理、肌湿重和透射电镜检查。结果:各组实验侧胫前肌湿重和肌纤维截面积,腓神经有髓纤维数、传导速度和振幅均高于对照侧(P<0.05),A组两侧肌湿重及C组腓神经潜伏期差异无显著性(P>0.05)。结论:TENS在减轻失神经肌肉萎缩和提高神经端侧缝合侧枝萌出率方面有积极作用。

白细胞介素-12临床应用研究进展

白细胞介素-12(IL-12)最初称作自然杀伤细胞刺激因子(NKSF)或细胞毒性淋巴细胞成熟因子(CLMF),是一种异二聚体细胞因子。直接使用重组蛋白IL-12或转基因载体都有显著的抗肿瘤作用,它通过诱发NK,NKT和T细胞增殖活化而介导主动和被动免疫保护反应。除此之外,通过趋化因子IP-10诱生IFN-γ阻止肿瘤血管发生。在动物肿瘤模型中,IL-12对移植瘤、化学诱变瘤及自发肿瘤均有明显治疗作用。IL-12可以刺激抗原特异性免疫反应而促进Th1和CTL的消瘤作用。大量的临床治疗肿瘤试验表明,IL-12在抗肿瘤方面效果明显。治疗中出现的不良反应应引起重视,需要制定合理的治疗方案以降低毒副反应确保临床效果。

表面改性TiNi记忆合金棒的回复力学实验研究

采用直径为6～7mm钛铌涂层TiNi记忆合金棒与未经表面改性的TiNi记忆合金棒。相变温度平均为33．0℃．低温下在三点弯卡具上进行预弯．挠度分别为5．0、10．0、15．0和20．0mm，保持位移恒定．分别在37℃及50℃的生理盐水溶液恒温水浴箱中测量其三点弯回复力变化特性。结果表明，TiNi记忆合金棒的回复力随回复温度、棒直径、变形量增加而增加；经钛铌表面喷涂后6mm及6．5mm棒的回复力有一定降低，但7mm棒回复力没有显著性差异。依照以上数据可以为临床设计脊柱侧弯矫形棒提供参考。

乳鼠心肌细胞的体外培养及生物学特性研究

目的探讨乳鼠心肌细胞的体外培养方法并对其生物学特性进行观察。方法1～3日龄新生SD大鼠10只,用无酶消化法行含血清培养基原代心肌细胞培养,连续观察细胞生长及传代情况40天。α-横纹肌肌动蛋白抗体标记培养细胞,以流式细胞仪行心肌细胞纯度鉴定,Giemsa染色观察培养心肌细胞形态,吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法检测培养细胞活性。记录培养心肌细胞总数,计算单个乳鼠心脏细胞产量。结果原代组织块和单个心肌细胞在接种后24～48h贴壁,其中部分出现搏动并持续至观察期末。培养细胞群鉴定心肌细胞纯度为94.1%,活细胞比例95.3%,95%可信区间(CI)为91.6%～99.0%。平均每个乳鼠心脏单细胞产量为3.3×106个,95%CI为2.1×106～4.5×106个。结论无酶消化法培养的乳鼠心肌细胞纯度、活力及产量能够满足心肌细胞研究的需要。

冠状动脉痉挛机制研究概况

冠状动脉痉挛(coronary artery spasm,CAS)是多种缺血性心脏病发生的共同病理基础,是心绞痛、心肌梗死、猝死等严重心血管事件的重要病因。其发生机制已成为当前研究的热点和难点。目前认为冠状动脉痉挛的发生机制主要包括:血管内皮细胞功能障碍、植物神经功能紊乱、内源性血管收缩及舒张物质平衡破坏、血管平滑肌细胞收缩敏感性升高、Mg2+与H+的作用、氧化应激、慢性炎症以及心理应激等。

中医药治疗失眠症作用机理研究进展

中医药对于失眠症的治疗,具有疗效好、副作用少等优势。本文从调节神经递质、影响睡眠相关因子、改善中枢神经结构等方面对中医药治疗失眠症的作用机理进行综述。中医药主要通过三个方面的机制发挥对失眠的治疗作用:一是调节5-羟色胺、γ-氨基丁酸、前列腺素等抑制性神经递质及谷氨酸、多巴胺、去甲肾上腺素等兴奋性神经递质的含量;二是影响白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α等细胞因子和胆囊收缩素、食欲素及其他睡眠相关因子;三是改善大脑皮层、中缝背核等中枢神经超微结构。中医药治疗失眠症的作用机理研究已取得明显进展,但对于中医药如何发挥多层次、多靶点优势,协调诸多睡眠因子的相互作用从而治疗失眠症,还有待进一步深入研究。

补肾活血颗粒治疗帕金森病的“减毒增效”临床研究

目的:研究补肾活血颗粒治疗帕金森病(PD)的"减毒增效"临床疗效。方法:将120例PD患者随机分成治疗组60例和安慰剂对照组60例。其中治疗组服用补肾活血颗粒,对照组服用安慰剂,均为2次/天,两组均以美多巴等西药为基础治疗。以3个月为治疗观察期,采用双盲设计,之后带药随访6个月观察。以患者治疗前后症状的变化及美多巴的用量为评价指标。结果:补肾活血颗粒可显著减少PD患者汗多、便秘、排尿障碍等症状的发生,减少美多巴用量,减轻美多巴的副作用(P<0.05)。研究过程中未发现明显不良反应。结论:补肾活血颗粒治疗PD可以达到"减毒增效"的效果,且随着治疗时间的延长作用逐渐显现。

和胃安神法治疗亚健康失眠的临床研究

目的探讨和胃安神法对亚健康失眠者的临床症状及睡眠质量的改善效果。方法 148例亚健康失眠者随机分为对照组(73例)与试验组(75例),分别采用养心安神法与和胃安神法治疗,疗程均为4周,治疗前后应用亚健康中医证候测量量表和匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表进行量表检测评分。结果对照组与试验组的总有效率分别为71.2%与92.0%,两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗前对照组与试验组的症状总分分别为(166.84±19.75)分和(172.73±23.54)分,治疗后两组的症状总分分别为(101.27±14.06)分和(89.61±15.71)分,两组患者症状总积分降低均较显著,但试验组中医临床症状的改善效果优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和试验组的睡眠质量完全改善率分别为64.4%和81.3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前对照组与试验组的PSQI总分分别为(12.00±2.13)分和(12.47±2.68)分,治疗后两组的PSQI总分分别为(10.17±2.26)分和(8.95±1.14)分,两组患者治疗前后PSQI总分的变化均较显著,但试验组PSQI总分降低程度较对照组更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论和胃安神法对亚健康失眠治疗效果明显,能显著改善亚健康失眠者的临床症状和睡眠质量。

软骨细胞形态、表型与胞间通讯研究

目的 探讨体外培养下新生兔软骨细胞的缝隙连接与软骨细胞形态、表型的关系。方法 向 96孔板内的第 5代新生兔膝关节软骨细胞培养基内加入荧光染料 CFDA- AM,激光共聚焦显微镜测量不同形态的单个软骨细胞内的荧光强度 ;以激光淬灭软骨细胞内的荧光后定时测量荧光恢复曲线。将因股骨颈骨折行人工关节置换的人股骨头关节软骨切成 2 0μm薄片 ,同样加入荧光染料后测定激光淬灭前后荧光强度。结果 各种形态的扁平状软骨细胞摄入CFDA- AM后平均荧光强度差异很大平均 83(1～ 2 74 ) ,平均值明显低于单个球形软骨细胞者平均 2 0 5 7(340～ 35 38) ;只有集落中央的球形软骨细胞才有逐渐的荧光恢复 ;但关节软骨陷窝内软骨细胞内的荧光经激光淬灭后可以恢复。结论 软骨细胞的形态影响其荧光染料的摄入量 ;缝隙连接只出现在球形软骨细胞之间 ,与软骨细胞的特有表型同时出现 ;股骨头人关节软骨陷窝内的软骨细胞间有缝隙连接存在 。