线粒体融合蛋白2的结构与功能研究进展

线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)位于线粒体外膜上,是线粒体外膜融合的重要蛋白之一。研究发现,它不仅参与调控线粒体形态结构,还与细胞代谢、增殖、凋亡密切相关。近年来资料提示,Mfn2参与调控内质网应激、自噬、线粒体自噬等方面。由于Mfn2作用复杂,生理状态下细胞内必定存在精细的调控网络以使其保持在稳定水平。本文概括介绍了Mfn2结构、功能及其调控机制新进展。

应激诱导蛋白Sestrin2研究进展

Sestrins是一类高度保守的应激诱导蛋白,通过多种机制保护细胞免受应激、老化等病理生理因素损伤。Sestrin2(Sesn2)是Sestrins蛋白亚型,缺氧、氧化应激等可诱导其表达,Sesn2参与代谢相关性和年龄相关性疾病的病理过程,也参与细胞生长和代谢的调节,与细胞功能密切相关。细胞免疫功能紊乱是严重创(烧)伤感染、脓毒症发病机制中的重要病理生理过程,是目前研究的热点问题之一。本文主要阐述Sesn2功能及其在机体免疫反应中的潜在意义。

线粒体自噬中pink1-parkin途径调控机制的研究进展

线粒体是调节细胞能量平衡和细胞死亡的重要细胞器,在内外环境影响下,受损、衰老的线粒体会对细胞生存造成严重的威胁。线粒体自噬(mitophage)是指细胞选择性清除受损、衰老的线粒体,从而维持细胞内环境稳定。在帕金森病(Parkinson's disease,PD)的研究中发现,pink1-parkin途径参与膜电位降低引起的线粒体自噬的发生,对线粒体整个网络的功能完整性有着举足轻重的作用,然而其确切调控机制尚未明确。本文重点综述了近年来线粒体自噬中pink1-parkin途径调控机制及其病理生理意义的研究进展。

脓毒症治疗新策略:免疫调理研究新认识

脓毒症的发病率不断攀升,病死率仍然居高不下。研究发现,脓毒症的病理生理机制十分复杂。随着疾病进展,机体免疫系统调节机制失衡,易于出现免疫抑制状态。这是造成患者二次机会感染以及死亡的重要原因。近年来,人们日益重视针对机体紊乱状态的免疫调理治疗,开展了以各类免疫细胞为调节靶点的基础和临床研究。多种重组细胞因子、抗体及制剂等表现出良好的生物学活性,部分药物现已经进入临床试验阶段,并且在改善脓毒症患者免疫状态等方面取得初步疗效。因此,免疫调理治疗具有重要研究前景和临床意义。

胰高血糖素样肽-1的神经内分泌效应研究进展

胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是肠黏膜L细胞分泌的肠促胰素,可血糖依赖性地促进胰岛素分泌,从而减少低血糖的发生。作为一种脑肠肽,GLP-1的神经内分泌作用越来越受到关注。外周或中枢给予GLP-1可激活下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)、交感和副交感神经系统,进而广泛参与神经内分泌调节,包括应激反应、物质和能量代谢,甚至神经、心理等脑的高级功能。本文拟阐述GLP-1的神经内分泌效应和作用机制,旨在为临床肠促胰素类药物的应用提供理论指导。

脓毒症免疫紊乱及其临床意义

脓毒症主要由机体免疫功能紊乱导致,即由对感染、创伤等致病因素过度的炎症反应发展至免疫麻痹或抑制。细胞免疫应答在脓毒症发生、发展过程中发挥重要作用。在过度炎症期,诸多免疫细胞被病原相关分子模式(PAMPs)、损伤相关分子模式(DAMPs)激活并分泌大量促炎细胞因子;在免疫麻痹期,过度凋亡导致免疫细胞数量减少伴随功能下降,调节性免疫细胞亚群逐步占据优势并分泌抑制性细胞因子。监测脓毒症中机体免疫功能的变化及其转归是制定免疫调节治疗方案的基础及依据,但目前尚缺乏能应用于临床并综合评价整体免疫功能状态的指标体系。

脓毒症发病机制最新认识

脓毒症及脓毒性休克是ICU常见的危重症,其病死率高且严重影响患者的生活质量。脓毒症发病机制复杂,涉及机体多个器官功能改变,对其发病本质的探索一直是全球的研究热点。文中将总结分析近年来脓毒症发病机制的研究进展,分别从炎症反应失衡、免疫功能紊乱、凝血异常以及神经-内分泌-免疫网络、线粒体损伤、内质网应激、细胞自噬、基因多态性等方面分析脓毒症的病理生理过程,为其临床防治提供理论依据。

拮抗高迁移率族蛋白B1对烫伤小鼠白细胞介素-35表达及T淋巴细胞免疫功能的影响

目的观察特异性拮抗高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对烫伤小鼠白细胞介素-35（IL-35）表达及T淋巴细胞免疫功能的影响。方法选择成年雄性BALB／e小鼠30只，按随机数字表法分为正常组、假伤组、烫伤组、Abox干预组，正常组6只，其余各组每组8只。将小鼠背部皮肤置于97℃恒温热水中6s造成约15％体表面积烫伤模型，Abox干预组小鼠烫伤后2h和12h腹腔注射HMGBl特异性拮抗剂Abo×300ug。烫伤后24h处死小鼠，取心、肝、脾、肺等组织，用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组织中HMGBl和IL-35含量；用实时荧光定量反转录一聚合酶链反应（qRT-PCR）分析IL-35亚基p35和EB病毒诱导基因3（EBB）的mRNA表达水平；由脾脏提取单个核细胞检测HMGBl和IL-35分泌水平，分离脾脏淋巴细胞检测效应T细胞增殖活性及IL-2、γ-干扰素（IFN-γ）、IL-4分泌水平。结果与烫伤组比较，Abox干预后，各器官HMGBl含量和脾脏单个核细胞HMGB1分泌水平显著降低[心脏（mg／g）：65．78±4．42比110．49±11．19，肝脏（mgCg）：50．90±3．72比117．77±8．10，脾脏（mg／g）：83．34±3．90比149．84±11．93，肺脏（mg／g）：125．15±8．75比236．20±17．51，脾脏单个核细胞（ug／L）：34．57±0．69比73．66±19．03]；各器官组织p35和EBl3的mRNA表达[相对定量（RQ）值]及IL-35蛋白水平均有不同程度下降[p35mRNA（r{Q值）：心脏为0．91±0．62比19．74±18．05，肝脏为0．42±0．19比14．85±8．39，脾脏为1．99±1．12比21．94±6．90，肺脏为0．50±0．21比5．15±3．46；EB13mRNA（RQ值）心脏为0．63±0．61比74．25±15．19，肝脏为0．64±0．09比56．59±19．99，脾脏为1．24±0．48比32．72±3．34，肺脏为0．30±0．06比2．41±1．43；IL-35蛋白（ug，g：心脏为142．40±19．95比241．64±12．40，肝脏为272．68±14．90比409．76±21．60。脾脏为66．94±9．60比92．28±8．82，肺脏为235．88±15．65比193．50±27．06；均P〈0．05），脾脏T淋巴细胞增殖活性增强（A值：1．26±0．26比1．03±0．05）及IL-2分泌水平也显著升高（ng／L：153．48±26．64比101．77±34．55），IFN-γ／IL-4比值显著增加（7．44±1．70比0．33±0．07），差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论特异性拮抗HMGB1可显著下调烧伤小鼠重要组织IL-35表达水平，有效促进脾脏T细胞增殖及Th1功能极化，从而有助于改善严重烧伤后免疫抑制状态。

黄芪甲苷在体内对高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T淋巴细胞免疫表型的作用

目的进一步明确晚期炎症介质高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在体内对小鼠调节性T细胞(Treg)免疫表型的影响,同时观察不同剂量黄芪甲苷(AST)对HMGB1介导的Treg细胞功能变化的作用。方法采用清洁级BALB/c小鼠,予实验当天早、晚各腹腔注射10μg重组HMGB1,并于注射后第2、4、6天腹腔注射生理盐水或黄芪甲苷。实验分组:将120只小鼠随机分为6组(每组20只)。(1)正常对照组:动物麻醉后活杀;(2)HMGB1攻击组:单纯注射重组HMGB1;(3)HMGB1+NS组:HMGB1+生理盐水治疗;(4)HMGB1+AST组Ⅰ:HMGB1+AST(10 mg/kg)治疗;(5)HMGB1+AST组Ⅱ:HMGB1+AST(20 mg/kg)治疗;(6)HMGB1+AST组Ⅲ:HMGB1+AST(30 mg/kg)治疗。以上6组再各分为4个亚组(每组5只),于实验第1、3、5、7天将动物处死,提取其脾脏Treg细胞。采用流式细胞术检测Treg细胞Foxp3蛋白表达水平,ELISA法检测Treg细胞孵育上清中IL-10及TGF-β表达水平。结果 HMGB1攻击组动物Foxp3表达水平在1~7d明显降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),在攻击后第3天为最低值,细胞培养上清中IL-10及TGF-β表达水平呈现与Foxp3相同变化趋势;HMGB1+NS组动物Foxp3、IL-10及TGF-β表达水平与HMGB1攻击组比较差异无统计学意义(P>0.05);而HMGB1+AST组Ⅲ及HMGB1+AST组Ⅱ组Foxp3表达水平在给药后均较HMGB1+NS组明显升高(P<0.01~0.05),细胞培养上清中IL-10及TGF-β表达水平亦呈现与Foxp3相同变化趋势。结论 HMGB1在体内可抑制小鼠Treg细胞免疫抑制功能的发挥,而AST可针对性拮抗HMGB1对Treg细胞免疫功能的抑制效应,显示其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。

Sestrin2对高迁移率族蛋白B1诱导树突细胞凋亡的保护作用

目的探讨Sestrin2(SESN2)在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导树突细胞(DC)凋亡中的作用。方法将培养的小鼠树突细胞DC2.4分为正常对照组及HMGB1 8、24、48h组(n=4),HMGB1各亚组加入10ng/ml HMGB1培养相应时间;另将DC2.4细胞分为正常对照组及HMGB1组,HMGB1组设1、10、100ng/ml亚组(n=4),予以不同浓度HMGB1刺激48h。采用Western blotting检测各组细胞SESN2、cleaved-caspase-3、Bcl-2蛋白的表达水平,共聚焦激光显微镜检测SESN2在细胞中的定位及表达,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。将载有过表达空载体NC、沉默空载体NS、过表达病毒载体SESN2 LV-RNA及沉默病毒载体SESN2 si RNA转入DC2.4细胞中(n=4),以100ng/ml HMGB1刺激48h,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并检测凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、Bcl-2的表达水平。结果与正常对照组比较,10ng/ml HMGB1刺激24、48h后,以及1、10、100ng/ml HMGB1刺激48h后,DC2.4细胞中SESN2的表达水平均显著上调,差异有统计学意义(P<0.05)。10、100ng/ml HMGB1刺激48h后,DC2.4细胞的凋亡率(分别为17.02%±4.85%、17.48%±4.04%)明显高于正常对照组(7.35%±1.33%,P<0.05,P<0.01),而10ng/ml HMGB1刺激8h后DC2.4细胞凋亡率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在不同转染组中,100ng/ml HMGB1刺激48h后,SESN2 si RNA组DC2.4细胞凋亡率(65.96%±2.50%)明显高于空载体组(50.01%±2.07%),同时凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3表达明显升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);而SESN2 LV-RNA组细胞凋亡率(35.57%±1.69%)明显低于空载体组(49.04%±4.87%),cleaved-caspase-3表达明显下降,Bcl-2表达明显升高(P<0.05)。结论 SESN2在HMGB1诱导DC2.4细胞的凋亡过程中具有一定保护作用。

烧伤创面脓毒症的防治对策

烧创伤破坏皮肤连续性及完整性,影响机体免疫反应,甚至诱导免疫抑制。感染是重度烧伤患者常见、严重甚至致死的并发症。创面脓毒症是创面严重感染导致的全身性炎症反应,是烧伤患者主要死因之一。创面脓毒症的治疗重在预防。对创面及时、有效的处置是防治创面脓毒症的基础及关键。在传统抗感染治疗策略基础上,探索抗感染治疗的新方向、新制剂对于缓解抗菌药物耐药、改善创面脓毒症患者预后具有重要意义。针对创面脓毒症病原菌的免疫治疗亦具有广阔的临床应用前景。

胰高血糖素样肽-1的免疫调节作用及机制

肠促胰素是一种肠道分泌的降血糖激素,可作用于胰岛β细胞促进胰岛素分泌,降低血糖。胰高血糖素样肽-1（Glucagon-like peptide-1,GLP-1）是首先在小肠黏膜L细胞发现的一种肠促胰素,在进食等血糖升高情况下其释放增加。由于GLP-1的血糖依赖性降血糖特性,糖尿病患者服用后不易发生低血糖事件,因此作为一种新型降血糖药物GLP-1类胰泌素在临床得到广泛应用[1]。天然GLP-1在体内极易被二肽基肽酶Ⅳ（Dipeptidyl peptidaseⅣ,DPP-Ⅳ）广泛快速降解.

线粒体-内质网结构偶联与细胞免疫功能障碍

线粒体-内质网结构偶联(mitochondria-associated endoplasmic reticulum membrane,MAM)是线粒体和内质网发生交互作用功能平台。研究发现有几十种蛋白质富集于两细胞器外膜之间,与钙信号传导、脂质代谢、内质网应激和细胞凋亡等密切相关,影响病生理状态下免疫细胞的增殖、活化和凋亡。细胞免疫功能障碍是严重创(烧)伤感染、脓毒症发病机制中的重要病生理过程,本文综述MAM功能异常研究进展及其在免疫细胞功能障碍中的意义。

毒胡萝卜素诱导内质网应激对小鼠调节性T细胞免疫功能的影响

目的探讨内质网应激(ERS)特异性诱导剂毒胡萝卜素(TG)体外刺激对小鼠调节性T细胞(Treg)免疫功能及ERS相关信号通路的影响。方法采用免疫磁珠分离法分选BALB/c小鼠脾脏Treg,流式细胞术检测其分选纯度。采用流式细胞术检测Treg叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)及细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)表达的时间及剂量效应关系。Western blotting检测细胞ERS信号通路相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、真核细胞转录起始因子2α(e IF2α)、磷酸化e IF2α(p-e IF2α)、转录激活因子4(ATF4)表达/活化水平。将Treg单独或与效应T细胞(Teff)共培养,采用流式细胞术检测Teff的增殖活性,ELISA法检测Treg白细胞介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β生成以及共培养上清中IL-2、IL-4、干扰素(IFN)-γ水平。结果磁珠分选Treg的纯度为91.0%。依据Treg Foxp3及CTLA-4表达的时效-量效关系,选定TG 0.1μmol/L和12h为实验刺激浓度和时间。0.1μmol/L TG刺激12h后,Treg中ERS信号通路相关分子GRP78、磷酸化e IF2α、ATF4等表达/活化水平明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,TG刺激组Treg IL-10和TGF-β分泌量明显增加,其对Teff增殖活性抑制能力明显增强,与Teff共培养上清中IL-4/IFN-γ比值明显升高,IL-2水平明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TG能够有效地活化Treg中ERS相关信号通路,进而显著增强Treg介导的免疫抑制反应。

组织工程支架材料对固有免疫反应的影响及调控效应

组织工程生物材料支架作为促进机体组织损伤修复与再生的工具,在临床上已经使用多年。生物材料植入机体后不可避免地诱发宿主反应,过度的宿主反应会影响材料植入的成功率,直接影响损伤修复效果。如何调控宿主反应是组织修复过程中的关键问题。材料诱发的宿主反应主要由机体免疫系统参与调控,特别是固有免疫系统,同时固有免疫反应也是组织修复与再生过程中不可或缺的重要因素。近年来,生物材料对免疫功能的影响日益受到关注,许多资料表明组织工程材料参与固有免疫调控过程,材料成分,表面化学、理化特性,以及降解产物等均不同程度地影响固有免疫细胞的功能。本文对固有免疫在组织修复中的作用以及组织工程支架材料特性对固有免疫反应的影响作一综述。

生物材料对树突状细胞免疫功能影响及其调控途径

树突状细胞(DC)是目前所知体内最强的专职抗原提呈细胞,系连接固有免疫与适应性免疫的主要桥梁。新近的研究提示,生物材料对DC免疫功能的效应是决定生物材料发挥作用的重要因素。本文重点介绍生物材料物理化学特性对DC免疫功能的影响及其受体途径、信号通路,为深入理解生物材料与机体免疫系统的相互作用提供理论依据,并为生物材料的设计及选择开辟新途径。

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8的生物学效应及其临床价值

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(tumor necrosis factor alpha induced protein-8,TNFAIP8)作为TNFAIP8家族的成员之一,被认为是一种具有抗凋亡和促肿瘤效应的蛋白分子,在细胞的存活和死亡中发挥重要作用。本文重点介绍TNFAIP8的发现过程、结构功能、生物学效应及其临床意义,并对其可能的作用机制进行概述。

Exendin-4调控烧伤小鼠炎性反应及多器官损害的交感神经机制

目的探讨胰高血糖素样肽(GLP-1)的长效类似物Exendin-4(Ex-4)对烫伤小鼠生存率、炎性反应和器官损伤的影响及其交感神经调控机制。方法 BALB/C小鼠随机分为烫伤组和假伤组,分别行93℃15%总体表面积(TBSA)的Ⅲ度烫伤和37℃假伤。烫伤前30min腹腔注射β2肾上腺素能受体阻断剂普萘诺尔(prop,30mg/kg),伤后30min立即腹腔注射Ex-4(2.4nmol/kg)。24h后处死动物留取肺脏和血清,生化法检测肝肾功能,ELISA法检测外周血及肺部炎性因子TNF-α、MCP-1和IL-10水平;分离脾脏单个核细胞,观察核蛋白NF-κB p65蛋白表达;此外,烫伤小鼠随机分组观察Ex-4对动物72h存活情况的影响。结果 Ex-4处理的烫伤小鼠病死率有增加趋势。Ex-4对假伤组肺组织炎性细胞因子没有显著影响,但可显著增加烫伤动物肺脏TNF-α、MCP-1和IL-10水平,且此效应可被prop阻断。Ex-4可抑制假伤小鼠血清TNF-α、IL-10水平,而促进烫伤组血清TNF-α、MCP-1、IL-10水平(P<0.05),且烫伤组prop干预后,反而增强了Ex-4的促细胞因子分泌作用。Ex-4可显著增加烫伤小鼠肝肾功能损伤指标AST/ALT和UR/Cr(P<0.05),并能被prop阻断;而对假伤组无明显影响。Ex-4能显著上调烫伤小鼠脾脏细胞核NF-κB p65蛋白表达(P<0.05),且此效应可被prop阻断。结论 Ex-4可通过交感神经机制促进局部组织器官的炎性反应以及器官损伤,Ex-4和激活的肾上腺素能受体共同激活c AMP-PKA-NF-κB信号转导途径,进而调节全身炎性反应。

创伤失血性休克诊治中的病理生理机制

创伤失血性休克是指创伤造成机体大量失血所致有效循环血量减少、组织灌注不足、细胞代谢紊乱和器官功能受损的病理生理过程。创伤失血性休克是一个复杂的病理反应过程，临床救治困难，其发病与微循环、氧代谢、炎症、免疫及凝血等有关，并涉及机体多器官、多系统的异常改变。

脓毒症研究若干重要科学问题的思考

近年来，尽管在严重脓毒症及脓毒性休克的液体复苏、创面处理、抗感染治疗策略、器官支持治疗等方面已取得显著进展，但病死率仍居高不下，临床救治十分困难。因此，脓毒症的研究已成为现代急危重症医学十分活跃的前沿领域之一，许多重大科学问题亟待解决，只有深刻厘清脓毒症的根本发病过程和有效干预途径，才可能取得脓毒症及多器官功能障碍防治理念上的新突破。严重脓毒症的致病因素很多，且发生机制涉及炎症失控、免疫紊乱、凝血异常及组织损害等基本科学问题，并与机体多系统、多器官病理生理改变密切相关。