中度烧伤小鼠大脑免疫细胞的浸润及神经细胞凋亡

目的 观察中度烧伤小鼠大脑免疫细胞的浸润情况以及神经细胞凋亡.方法 BALB/C雄性小鼠随机分为烫伤组（n=15）和假伤组（n=15）,其中烫伤组按照15%总体表面积（total body surface area,TBSA）浸于94℃热水中8 s造成深Ⅱ度烫伤,假伤组动物浸于37℃水中.烫伤后24 h经心脏对各组中12只小鼠大脑进行生理盐水灌注,冲去脑血管内血液,Percoll梯度离心法分离脑内单个核细胞,以CD3＋CD45 high标记T细胞,CD11b＋CD45 high标记单核细胞,CD11b＋CD45int为激活的小胶质细胞,进行流式细胞染色和分析.每组剩余3只小鼠,大脑经4%多聚甲醛固定和蔗糖脱水后进行冰冻切片,免疫荧光法标记脑内免疫细胞,TUNEL法检测细胞凋亡.用含DAPI的抗荧光淬灭剂封片,共聚焦显微镜拍照.结果 烧伤组小鼠脑组织中CD45＋CD3＋T细胞所占比例较假伤组明显增高[（1.103 ±0.674）% vs.（0.385 ± 0.109）%,P〈0.05].烧伤组CD45int CD11b＋较假伤组比例增高[（1.017±0.35）% vs.（0.502±0.358）%,P〈0.05],提示烧伤组大脑中小胶质细胞激活程度较假伤组增高.免疫荧光染色可见烫伤组血管周围及脉络丛处有免疫反应阳性的T细胞、CD45high细胞,假伤组未见阳性.此外,烧伤小鼠与假伤组相比,在大脑皮层和脑室周围的脑实质中可见到明显增多的凋亡细胞.结论 中度烧伤后24 h大脑即可出现免疫细胞的浸润及神经细胞凋亡,可能和此后出现的神经精神障碍有关.