内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞高迁移率族蛋白B1释放的研究

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在大鼠巨噬细胞中的分布和释放。方法 取正常Wistar大鼠腹腔巨噬细胞 ,培养 3d后以内毒素 (LPS)刺激 ,应用免疫组织化学的方法检测LPS刺激前后HMGB1的表达释放情况 ;分正常、4、8、12、2 4h时间点留取细胞培养上清 ,观察LPS刺激与HMGB1释放的时效关系。结果 大鼠腹腔巨噬细胞的胞核及胞浆内存在HMGB1蛋白表达 ,LPS刺激 10h使之明显增强 ,并分泌至胞外 ;LPS可诱导大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1释放 ,于 8～ 12h达峰值 (正常对照和 12h的积分吸光度值分别为 19.3 99± 1.488、5 9.5 61± 2 .991,P <0 .0 1) ,2 4h后减弱 (积分吸光度值为 2 6.10 4± 2 .671)。结论 HMGB1分布于大鼠腹腔巨噬细胞核及胞浆中 ,LPS可促进HMGB1缓慢释放于细胞外。

内毒素休克大鼠丝裂原活化蛋白激酶p38通路在生物喋呤诱生中的作用及其意义

目的 观察丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)p38信号通路抑制剂SB2 0 35 80对内毒素休克大鼠生物喋呤 (BH4 ) 一氧化氮 (NO)表达的影响及其意义。 方法 采用内毒素休克模型 ,5 6只大鼠随机分为正常对照组 (8只 )、内毒素休克组 (32只 )和SB2 0 35 80拮抗组 (1 6只 )。留取肝、肺、肾组织测定三磷酸鸟苷环水解酶I (GTP -CHI)与诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达 ,同时检测血浆与组织中BH4 和NO水平的变化。 结果 内毒素攻击后 ,各组织GTP -CHI基因表达和BH4 水平明显升高 ,至伤后 2 4h仍持续于较高水平。组织iNOS基因表达和NO水平亦明显升高 ,其中肝、肺改变尤为显著。SB2 0 35 80处理后 ,肝、肺、肾组织GTP -CHImRNA表达分别于 1 2 ,2 4 ,2～ 1 2h受到显著抑制 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ,肝组织BH4 水平 1 2h显著降低 (P <0 .0 5 ) ;同时 ,肝、肺和肾组织iNOSmRNA表达亦有不同程度下调 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ,且肝、肺组织NO水平明显下降。 结论 p38MAPK信号途径参与了内毒素介导BH4 诱生的病理生理过程 ,抑制该通路能明显下调内毒素休克动物多器官BH4 NO系统的表达。

烫伤脓毒症大鼠细胞因子信号转导抑制因子基因表达的改变及其意义

目的 观察烫伤后金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )脓毒症大鼠重要脏器细胞因子信号转导抑制因子 (SOCSs)基因表达的规律及其与细胞因子变化的关系。 方法 采用大鼠 2 0 %体表面积Ⅲ度烫伤后金葡菌攻击致脓毒症模型 ,检测动物肝、肺组织中SOCS1、SOCS2和SOCS3mRNA表达 ,并测定组织中干扰素 -γ(IFN -γ)水平。 结果 烫伤后金葡菌感染大鼠肝、肺组织IFN -γ产生均显著增多 ,分别于伤后 0 .5和 6h达峰值 (P <0 .0 1 )。同时 ,动物肺组织SOCS1、SOCS2和SOCS3mRNA表达均明显上调 ,其中SOCS2和SOCS3mRNA表达改变较为迅速 ,伤后 0 .5h即明显高于对照组 ,2h达峰值。肝组织SOCS1mRNA表达于伤后 2h明显增强 ,2 4h仍维持于较高水平 ;而肝脏SOCS2和SOCS3mRNA表达仅呈现升高趋势。金葡菌肠毒素B单克隆抗体早期干预后 ,随着肺脏IFN -γ产生减少 ,肺组织SOCS1、SOCS2和SOCS3基因表达亦明显降低。 结论 烫伤后金葡菌感染可诱导体内SOCSs表达上调 ,其改变与IFN -γ的“消涨”密切相关 ,提示它们可能参与了金葡菌脓毒症时炎症反应平衡的调节过程。