miR-223-3p通过靶向TGFBR3促进LncRNA ADAMTS9-AS2表达上调抑制肺癌细胞的增殖和迁移作用

目的:探讨miR-223-3p通过靶向转化生长因子-βⅢ型受体(TGFBR3)促进长链非编码RNA(LncRNA)ADAMTS9-AS2表达上调抑制肺癌细胞增殖和迁移的作用及可能机制。方法:采用RT-PCR检测肺癌H1299细胞中miR-223-3p和TGFBR3 mRNA表达水平,Western blotting检测TGFBR3的蛋白表达水平,RT-qPCR检测LncRNA ADAMTS9-AS2的表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力。采用脂质体转染miR-223-3p模拟物(过表达组)、抑制剂(抑制组)、对照质粒(对照组)于H1299细胞中,比较各组转染前后miR-223-3p、TGFBR3、LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平、细胞增殖能力、细胞迁移能力。结果:与转染前比较,过表达组转染后的H1299细胞中miR-223-3p、LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平均升高(P<0.05),TGFBR3蛋白和mRNA表达水平均降低(P<0.01和P<0.05),细胞增殖和迁移能力下降(P<0.05);抑制组转染后的细胞中miR-223-3p和LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平均降低(P<0.05),TGFBR3蛋白和mRNA表达水平均升高(P<0.01和P<0.05),细胞增殖和迁移能力均增加(P<0.05)。转染72 h后,TGFBR3蛋白表达水平及mRNA的表达水平细胞增殖与迁移能力:抑制组>观察组>过表达组(P<0.01)。3组miR-223-3p、LncRNA ADAMTS9-AS2 mRNA表达水平逐渐降低,抑制组<对照组<过表达组(P<0.01)。结论:miR-223-3p抑制肺癌H1299细胞的增殖和迁移,靶向下调TGFBR3和上调LncRNA ADAMTS9-AS2表达可能为其作用机制。

肺转移瘤的外科治疗进展

肺是除肝脏以外肿瘤最常见的转移部位,肺转移瘤切除术也是目前胸外科常规手术之一。然而肺转移瘤切除术的临床效果尚存争议,但就目前的临床经验,无瘤间隔时间长、原发肿瘤恶性程度低、转移瘤可被完全切除的肺转移瘤患者行肺转移瘤切术获益最大。本文就肺转移瘤的外科治疗进展进行综述回顾。

肺癌中VEGF-C、VEGFR3表达与预后的关系及意义

在目前已知的血管内皮生长因子(VEGF)家族成员中,VEGF-C与其受体3(VEGFR3)的生物学效应得到越来越广泛的关注。VEGF-C与VEGFR3不仅是调控淋巴管生成过程中最重要的信号通路,也是影响预后的重要因素。研究显示,肺腺癌中VEGF-C、VEGFR3高表达可能伴有更高的淋巴结转移率,并与微淋巴管密度成正相关,患者生存率低、预后差。因此,抑制VEGF-C和VEGFR3在肺腺癌中高表达能有效地减少肿瘤淋巴管生成和转移。但在针对肺鳞癌的研究中,VEGF-C与VEGFR3的表达与预后的关系存在争议。本文探讨VEGF-C与VEGFR3在不同病理类型的肺癌中表达与预后的关系,为后期治疗提供思路。

机器人手术在胸外科的应用进展

随着微创理念与技术的发展,达芬奇机器人在外科领域的应用越来越普遍。2009年中国第1例达芬奇机器人胸外科手术开始,至今已有12年。目前,在胸外科常见的肺癌、食管癌、纵隔肿物等手术治疗方面,达芬奇机器人手术的独特优势逐渐凸显出来。本文主要对达芬奇机器人在胸外科手术中的应用、优缺点进行阐述,同时对达芬奇机器人的未来发展进行展望。

细胞因子与非小细胞肺癌手术患者预后关系的研究进展

肺癌新发病例及病死病例数位居恶性肿瘤之首,其中非小细胞肺癌(NSCLC)具有复发率高、侵袭性强的特点,多数患者术后生存率较低,预后相对更差。NSCLC病情进展与炎症反应、免疫功能等有关,众多细胞因子参与其中,如白细胞介素(IL)类细胞因子(IL-6、IL-17、IL-33)、T淋巴细胞可通过相应机制参与NSCLC进展过程,从而影响病情转归。但由于细胞因子种类较多,且不同细胞因子在NSCLC进展过程中的作用机制具有多样性,明确各因子的作用机制及其与NSCLC的关系,有利于改善NSCLC患者病情和预后。

肺腺癌组织血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)高表达与患者预后不良正相关

目的研究肺腺癌组织血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)的表达及意义,通过敲低A549细胞VEGFR3水平研究对其生物学行为的影响及机制。方法用免疫组织化学法检测78例肺腺患者组织,35例癌旁组织中VEGFR3的表达并分析与临床病理指标的关系。利用TCGA数据库分析血管内皮生长因子C(VEGF-C)和VEGFR3与肺腺癌患者预后的关系。利用RNA干扰技术抑制A549肺癌细胞中VEGFR3的表达并给予VEGF-C刺激,采用CCK-8法检测A549细胞的增殖,TranswellTM实验检测A549细胞侵袭和迁移,Western blot法检测蛋白激酶B(AKT)信号通路蛋白水平。结果肺腺癌组织中VEGFR3的表达明显高于癌旁组织。肺腺癌组织VEGFR3的表达与恶性程度、TNM分期、淋巴结转移呈正相关,VEGFR3高表达的患者生存率显著低于VEGFR3低表达的患者。敲低VEGFR3水平抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移。外源性VEGF-C能够促进VEGFR3的表达,激活AKT信号通路。沉默VEGFR3可降低VEGF-C对AKT通路的激活效应。结论肺腺癌组织VEGFR3高表达与预后不良正相关。沉默VEGFR3阻断AKT信号通路抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移。

hsa-miR-221调控非小细胞肺癌分子网络的生物信息学分析

目的应用生物信息学的方法研究hsa-miR-221在非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)中的分子调控网络。方法运用UCSC基因组浏览器、人类miRNA疾病数据库、TF-miRNA结合数据库、miRNA靶基因预测数据库、GeneCards数据库、肺癌相关因子整合数据库和转录因子结合谱数据库等,研究hsa-miR-221上游转录因子、下游靶基因及与其有相互作用的lncRNA的多个调控途径,绘制hsa-miR-221在NSCLC中分子调控网络。利用GEO数据库验证关键基因。结果UCSC数据库显示hsa-miR-221位于X染色体,在多个物种中保守。hsa-miR-221与多种癌症包括NSCLC相关。分析表明hsa-miR-221受6个与NSCLC相关的转录因子如MYC、MYCN等的调控,同时又调控下游基因PTEN、RB1和BCL2等26个基因。另外,lncRNA基因GAS5、HOTAIR和TUG1及其转录因子Snail、n-MYC、ARNT和SOX5等也可能参与调控hsa-miR-221,从而构成一个以hsa-miR-221为核心的调控网络,在NSCLC的发生和发展中起重要作用。通过对GEO数据库hsa-miR-221高表达NSCLC细胞系差异基因分析,最终验证了5个基因。结论用生物信息学的方法预测hsa-miR-221的分子调控网络,为阐明其调控NSCLC的发病机制提供指导。

miR-200c通过下调TUBB3基因表达逆转老年肺癌患者顺铂耐药性的机制

目的探讨miR-200c逆转肺癌细胞顺铂耐药性的作用机制。方法miR-200c模拟物转染肺癌A549细胞后,采用实时定量PCR法检测miR-200c的表达;采用细胞活力测定(MTS)法检测miR-200c对肺癌A549细胞顺铂耐受性的影响。采用流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡率的变化。采用Western blotting检测肿瘤细胞耐药蛋白survivin和Bcl-2蛋白的表达。通过生物信息学分析发现miR-200c下游靶分子TUBB3表达存在差异后,构建TUBB33′UTR的野生型和突变型荧光素酶报告载体,然后利用双荧光素酶活性分析miR-200c对TUBB3基因表达的结合位点和调控作用。通过Western blotting检测miR-200c对TUBB3蛋白表达的调控作用以及Bcl-2蛋白和肿瘤细胞耐药蛋白survivin的表达。采用SPSS 19.0统计软件分析实验数据。结果与对照组相比,miR-200c转染肺癌细胞株后,肺癌细胞对顺铂的敏感性呈明显增加趋势[IC50分别为(37.3±3.1)和(15.3±3.3)μmol/L,P<0.01]。过表达miR-200c的A549/DDP组的细胞凋亡率明显高于NC组(P<0.01)。而肿瘤耐药相关基因Bcl-2和survivin蛋白表达降低。转染miR-200c mimics的A549/DDP细胞中TUBB3蛋白和mRNA的表达均下调(P<0.01)。双荧光素酶活性分析显示miR-200c对TUBB3基因表达具有调控作用(P<0.01)。这些结果均证实TUBB3为miR-200c的下游靶基因。pcDNA-TUBB3质粒转染后,过表达miR-200c的A549/DDP细胞株survivin和Bcl-2蛋白表达较miR-200c mimics组上调。结论miR-200c可通过下调TUBB3基因的表达逆转肺癌顺铂耐药细胞的耐药性。

可手术的非小细胞肺癌患者TUBB3基因mRNA表达与预后相关性

目的探讨可手术的非小细胞肺癌人群中TUBB3基因mRNA表达水平和预后的相关性。方法通过分支-DNA液相芯片技术定量检测92例非小细胞肺癌患者TUBB3基因mRNA表达,持续随访60个月,用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,进行多因素分析。结果在92例肺癌患者中,与不吸烟者相比,吸烟者的TUBB3基因mRNA表达水平明显更高(P=0.017)。随访结果显示:TUBB3 mRNA低表达的患者中位总生存期为48.7个月,长于高表达患者的生存期(35.8个月),差异有统计学意义(P=0.011,HR=1.56,95%CL:1.45~2.56)。TUBB3 mRNA低表达患者中位PFS为35.7个月,长于高表达患者中位PFS(23.5个月),差异有统计学意义(P=0.001,HR=1.33,95%CL:1.06~2.32)。结论TUBB3 mRNA表达是可手术的非小细胞肺癌的预后因子。

胸腔镜辅助下滑石粉注入治疗恶性胸腔积液并发症发生情况的荟萃分析

滑石胸膜融合术是治疗恶性胸腔积液的有效方法。本研究旨在评估胸腔镜下滑石粉充填术的并发症发生率。方法:通过电子数据库检索相关文献,对胸腔镜下滑石粉充填治疗恶性胸腔积液患者并发症发生率进行荟萃分析。结果:26项研究(4482例患者;平均年龄62.9岁[95%置信区间(CI):61.5,64.4];50%[95%CI:43,58]女性)被纳入。术中、围术期、30天和90天的死亡率分别为0%[95%CI:0,1]、2%[95%CI:0,4]、7%[95%CI:3,13]和21%[95%CI:5,43]。各种并发症的发生率[95%CI]为:疼痛(20%[1,2]),发热(14%[3,4])、呼吸困难(13%[5,6]),气胸(6%[7,8]),肺炎17(4%[0,12]),肺气肿(3%[3,7]),长期漏气(3%[0,7]),长期胸水(3%[9,10]),血栓栓塞(3%[9,11]),肺损伤(2%[7,12]),呼吸衰竭(2%[0,5]),再次向肺水肿扩张(1%[0,3]),脓胸(1%[0,2]),呼吸衰竭(0%[0,1]),急性呼吸窘迫综合征(ARDS;0%[0,1])。结论:胸腔镜下滑石粉注入最常见的并发症是疼痛和发热,ARDS发生率较低。气胸、肺炎、肺气肿、长时间漏气、肺栓塞、心律失常、扩张性肺水肿和脓胸是胸腔镜下滑石粉注入的重要并发症。

MicroRNA-510 靶向PTEN激活Wnt/β-catenin调节非小细胞肺癌细胞NCI-H1650及多西他赛耐药研究

探究MicroRNA(miRNA)-510 靶向人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)激活Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路调节非小细胞肺癌NCI-H1650细胞增殖与侵袭以及多西他赛(docetaxel,Doc)耐药的机制。方法 网站预测和荧光酶素报告实验验证mi-510靶向PTEN。人NSCLC细胞系NCI-H1650分为4组;通过转染miR-510 mimic或PTEN pcDNA以上调miR-510或PTEN的水平;通过CCK-8法和Transwell法检测和比较各组细胞活力、侵袭情况;NCI-H1650细胞分为5组;检测和比较各组细胞活力,通过Western blot检测PTEN、糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、β-catenin蛋白的水平。结果 双荧光霉素实验结果显示了在NCI-H1650细胞中miR-510靶向PTEN。过表达miR-510可显著抑制PTEN,并促进NCI-H1650细胞增殖和侵袭,而上调PTEN水平可部分逆转miR-510促进细胞增殖和侵袭。上调miR-510水平可以显著缓解Doc对NCI-H1650细胞抑制作用,而过表达PTEN会部分逆转miR-510促进多西他赛耐药的作用。过表达miR-510会促进GSK-3β和β-catenin蛋白表达水平,而PTEN会部分逆转miR-510对Wnt/β-catenin信号通路的促进作用。结论 miR-510可通过靶向PTEN调节Wnt/β-catenin信号通路,进而促进NSCLC细胞系NCI-H1650增殖、侵袭以及Doc耐药。

非小细胞肺癌TUBB3基因表达调控的生物信息学分析

目的应用生物信息学的方法研究β-微管蛋白亚型TUBB3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其分子调控机制。方法通过GEO数据集(GEO profile)、转录因子和miRNA调控关系数据库(TransmiR)、综合型的miRNA靶基因数据库(miRWalk)、转录因子结合位点搜索(ConSite)等,研究TUBB3上游转录因子、共表达基因及与其有相互作用的miRNA等,阐明NSCLC中TUBB3表达的分子调控机制及其可能的作用。结果TUBB3的启动子存在Snail、n-MYC等多个与NSCLC相关的转录因子结合位点。其在转录后水平受到miR-200家族、miR-342-3p、miR-410等miRNA的调控,这些miRNA与NSCLC的增殖与侵袭有关。TUBB3与HDGF、GMPS、MRPL9、PMAIP1和SLBP有共表达行为,受转录因子Snail共同调控。其中SLBP、PMAIP1及转录因子Snail与细胞周期和细胞凋亡存在一定的联系。结论NSCLC中TUBB3的表达受到多个层面的调控,其可能参与了细胞周期和凋亡,同时与NSCLC细胞增殖与侵袭存在一定的联系。

下调LncRNA DLX6-AS1通过miR-144调控FBXW7表达影响食管癌Eca-109细胞的增殖、侵袭和EMT进程

目的:评估长非编码RNA远端少同源盒6反义1(lncRNA DLX6-AS1)在食管癌发生发展中的作用及其潜在的机制。方法:采用qRT-PCR检测lncRNA DLX6-AS1和miR-144、FBXW7在食管癌组织及癌旁正常组织中的mRNA表达。分别敲低lncRNA DLX6-AS1和miR-144、FBXW7在Eca-109细胞中的表达后,采用CCK-8法检测细胞生长活性,细胞克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测E-cadherin、Vimentin和GAPDH的表达。采用miRanda、TargetScan和双荧光素酶报告基因检测验证lncRNA DLX6-AS1和miR-144、miR-144和FBXW7之间的靶向关系。结果:食管癌组织中lncRNA DLX6-AS1和FBXW7表达显著高于癌旁正常组织,miR-144表达与癌旁组织对比明显下调。lncRNA DLX6-AS1、FBXW7表达下降后,Eca-109细胞增殖、侵袭与EMT能力也明显下调;LncRNA DLX6-AS1与miR-144、miR-144与FBXW7呈靶向负调控关系;miR-144表达下降后,Eca-109细胞增殖、侵袭与EMT能力显著上调;上调LncRNA DLX6-AS1靶向miR-144促进Eca-109细胞增殖、侵袭与EMT。结论:Lnc RNA DLX6-AS1在食管癌中表达上调且通过miR-144/FBXW7轴促进Eca-109细胞增殖、侵袭和EMT。