脂肪间充质干细胞来源外泌体对施万细胞增殖功能及早期神经再生特征影响的研究

背景施万细胞是神经系统的重要构成部分,为促进轴突再生和诱导靶神经再生提供必要的信号和空间线索。脂肪间充质干细胞来源广泛,在再生医学方向效果明确,外泌体作为神经系统细胞间的重要信息媒介,在调节再生方面发挥着重要作用。目的探索脂肪间充质干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cells-derived exosomes,ADSCs-exos)对施万细胞增殖功能及早期神经再生特征的影响。方法提取ADSCs-exos进行鉴定;利用显微镜和流式细胞学对ADSCs鉴定,通过超速离心法提取ADSCs来源外泌体并通过透射电镜拍摄图片;将ADSCs-exos与大鼠施万细胞进行直接共培养,观察ADSCs-exos对施万细胞增殖的影响;取雌性SD大鼠8只,Matrigel基质胶搭载ADSCs-exos注入商用硅胶管构建神经移植物为外泌体组,Matrigel搭载PBS注入商用硅胶管为空导管组(Hollow),每组4只。构建坐骨神经1 cm缺损模型,将神经移植物缝合于近端和远端神经残端之间,缝合伤口后放回笼中安置。3周取出神经移植物评价轴突再生情况。结果成功提取ADSCs,能够表达间充质干细胞表面标记蛋白CD73、CD90、CD105。成功提取ADSCs-exos,能在透射电镜下观察到磷脂双分子层结构。在ADSCs-exos和施万细胞共培养体系中,比较24 h和48 h施万细胞增殖情况,施万细胞增殖与ADSCsexos浓度呈剂量依赖性。动物实验结果表明,外泌体组3周时轴突生长优于Hollow组(P<0.05)。结论ADSCs-exos可以促进施万细胞增殖,负载ADSCs-exo神经移植物的轴突生长长度在3周时即具有优势。

用于烧伤创面治疗的无机敷料

烧伤敷料在烧伤治疗特别是难愈合性烧伤治疗中具有防止创面感染、抑制炎症、促进伤口愈合等作用,因此开发能够高效治疗烧伤的敷料迫在眉睫。烧伤与创面管理是治疗的核心,本文研究了不同种类敷料在烧伤创面愈合中发挥的作用,并详细阐述了在无机敷料中含有单一金属元素或基于纳米技术的敷料,以及异质结结构敷料的应用,为烧伤治疗提供了新的选择,并在此基础上针对烧伤创面敷料的发展方向进行了展望。

双氧水诱导MSCs衰老模型的建立及表型鉴定

目的通过双氧水(H2O2)诱导MSCs构建稳定的细胞衰老模型,并且验证双氧水对MSCs的衰老诱导作用,以此来确定构建了稳定的MSCs衰老模型。方法实验组通过双氧水诱导第3代人的脐带间充质干细胞48 h造模,通过光学显微镜拍照观察细胞形态变化、CCK-8实验绘制细胞增殖曲线、活性氧(ROS)实验检测细胞内ROS含量变化、β-半乳糖苷酶染色检测细胞β-半乳糖苷酶变化、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色和活性测定确定成骨分化能力改变、蛋白质印记电泳(Western blot,WB)检测衰老相关蛋白改变。结果在双氧水的干预下,光学显微镜下可以观察到实验组细胞形态发生改变,细胞扁平化;MSCs细胞增殖率明显下降;ROS含量上升明显;β-半乳糖苷酶染色阳性细胞增加;ALP染色阳性区域减少,ALP活性降低;p16、p21、p53等细胞衰老相关蛋白表达量增加。结论通过对双氧水诱导MSCs衰老进行验证,确认了200μM浓度的双氧水可以构建稳定的细胞体外衰老模型,为探索MSCs衰老机制提供了参考。

双能CT的虚拟去钙技术对非创伤性股骨头坏死周围骨髓水肿的检出价值

目的以MRI为参考标准,评价双能CT的虚拟去钙(VNCa)技术对非创伤性股骨头坏死(ONFH)周围骨髓水肿(BME)的检出价值。方法前瞻性纳入2022年10月至2023年5月解放军总医院第四医学中心非创伤性ONFH患者,分析其MRI及双能CT图像。以MRI图像的评价结果作为参考标准,计算两名放射科医师在VNCa彩色编码图像上主观判断ONFH周围BME的诊断效能。比较VNCa图像和MRI显示的BME范围的差异,并比较正常骨髓和BME的传统CT值及VNCa CT值的差异。对于差异有统计学意义的CT值勾画受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),找出区分正常骨髓和BME的阈值,评价诊断效能。结果共纳入ONFH患者30例,男24例,女6例,年龄(39±12)岁;其中双侧髋关节18例,单侧髋关节12例,共48个髋关节,其中34个髋关节在MRI上显示BME。两名医师在VNCa彩色编码图上主观检出BME的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)和准确度分别为97.1%(33/34)和97.1%(33/34)、92.9%(13/14)和71.4%(10/14)、97.1%(33/34)和89.2%(33/37)、92.9%(13/14)和90.9%(10/11)、95.8%(46/48)和89.6%(43/48),差异均无统计学意义(均P>0.05)。VNCa彩色编码图像与MRI对BME范围的显示差异无统计学意义(P=1.160)。两名放射科医师测量的传统CT值和VNCa CT值的一致性较好,组内相关系数(ICC)分别为0.948(95%CI:0.908~0.971)、0.982(95%CI:0.969~0.990)。正常骨髓的传统CT值为(400.7±82.8)HU,BME的传统CT值为(443.7±65.7)HU,差异无统计学意义(P=0.062);正常骨髓的VNCa CT值为(-103.1±27.8)HU,BME的VNCa CT值为(-32.9±25.7)HU,差异有统计学意义(P<0.001)。基于VNCa CT值区分正常骨髓和BME的AUC为0.958(95%CI:0.857~0.995),最佳截断值为-74.5 HU,当VNCa CT值>-74.5 HU时,诊断BME的灵敏度、特异度、PPV、NPV和准确度分别为97.1%、92.9%、97.1%、92.9%和95.8%。结论双能CT的VNCa技术对非创伤性ONFH周围BME的检出效能较高,且能准确显示BME的范围。

3D打印技术在脊柱畸形教学中的应用

目的初步探索 3D 打印技术在脊柱畸形领域研究生教学中的应用。方法选取 2018 年在解放军医学院就读的外科硕士研究生共 52 名作为研究对象,在进行脊柱畸形小班课教学时随机将学生分为传统教学组和 3D 打印教学组。传统教学组依照教学大纲进行传统教学方法教学,3D 打印教学组在传统教学基础上利用 3D 打印模型更加直观强化对疾病的认识,加深理解和记忆。在课程结束后和 1 年后分别进行相关知识测试。结果与传统教学组相比,3D 打印教学组在课程结束学年测试平均分 78.3±7.7,总体高于传统教学组的 75.1±8.0,但差异无统计学意义 (t=0.921,P>0.05),1 年后 3D 打印教学组测试评分 70±8.9,高于传统教学组评分 61±10.8,差异有统计学意义 (t=2.369,P<0.05)。结论 3D 打印辅助教学模式在引入较为抽象的脊柱畸形教学实践中,能够使研究生更好地掌握相关教学内容,特别是有利于形成较好的长时记忆。