耳鼻咽喉头颈外科住院总医师在进修生继续教育中的作用

耳鼻咽喉头颈外科的专科特点决定了进修生继续教育的必要性,而耳鼻咽喉头颈外科住院总医师的职责又决定了其在进修生继续教育中的桥梁和纽带作用,主要表现在住院总医师可以更合理的为进修生安排科内讲座;更大程度的激发进修生的学习主动性;更全面的为进修生分配床位、安排一线值班;更好地规范进修生的病历书写;更多的使用手术室数字化多媒体提高进修生的学习效率。实践证明,重视住院总医师在耳鼻咽喉头颈外科进修生继续教育中的作用,对科室的教学和临床工作具有一定的作用,值得推广借鉴。

噪声引起小型猪耳蜗炎症复合体的激活及蛋白质组学研究

目的通过研究炎症复合体及相关通路在猪耳蜗中的激活,探讨噪声介导炎症复合体激活的关键分子机制,为噪声性耳聋的预防和治疗提供新靶点。方法采用小型猪为研究对象,建立噪声性耳聋模型,测试噪声暴露前后动物的ABR阈值,应用蛋白质组学iTRAQ、生物信息学、western blot、荧光实时定量PCR等技术,研究噪声刺激引起耳蜗炎症复合体的激活以及作用机制。结果正常小型猪ABR阈值为35.4±2.6 dB SPL,噪声后一天ABR阈值平均提高到72.1±4.1dB SPL,在4k Hz处听力损失最严重,高频听力损失较低频严重;噪声后七天平均ABR阈值恢复至52.8±4.7dB SPL,4k Hz以上听力恢复较低频稍差。iTRAQ实验共鉴定到蛋白质2158种,噪声暴露后较正常组具有显著差异表达的蛋白质共227个,富集在免疫过程的差异表达蛋白包括:ASC, caspase-1, IL-1 beta,CD59等。富集的KEGG pathway包括:阿尔兹海默病信号通路,帕金森病信号通路,MAPK信号通路,,氧化磷酸化通路等。结论噪声暴露后可能激活耳蜗内NLRP3受体介导的炎症复合体,通过caspase-1活化IL-1β、IL-18,并间接促进TNF-α等炎症因子上调,加剧耳蜗内炎症反应,导致耳蜗内重要结构的损伤,这一机制可能是噪声引起听力损失的重要原因。

常染色体显性遗传非综合征型耳聋致病基因定位研究

耳聋具有高度的遗传异质性,迄今已定位了51个常染色体显性遗传非综合征型耳聋(autosomaldominantnon-syndromicsensorineuralhearingloss,DFNA)基因位点,20个DFNA相关基因被克隆。文章收集了一个DFNA巨大家系,家系中有血缘关系的家族成员共170人,对73名家族成员进行了详细的病史调查、全身检查和耳科学检查,提示39人有不同程度的迟发性感音神经性听力下降,未见前庭及其他系统的异常。应用ABI公司382个常染色体微卫星多态标记进行全基因组扫描连锁分析,将该家系致聋基因定位于14q12-13处D14S1021-D14S70之间约7.6cM(3.18Mb)的区域,最大LOD值为6.69(D14S1040),与已知DFNA9位点有4.7cM(2.57Mb)的重叠区,DFNA9致病基因COCH位于重叠区域内。下一步拟进行COCH基因的突变筛查,以揭示该家系耳聋的分子致病机制。

9型腺相关病毒经圆窗膜转导小鼠耳蜗两种方式的对比研究

目的通过圆窗膜显微注射和完整圆窗膜途径转导小鼠内耳携带GFP的9型腺相关病毒(adeno-asso-ciated virus,AAV),比较两种方式的可行性、转染效率以及对听力的影响。方法 18只C57BL/6小鼠,随机分为圆窗膜显微注射组和完整圆窗膜途径组,术前均行听性脑干反应(auditory brain response, ABR)测听,术后两周行ABR测听后取双侧耳蜗基底膜铺片及冰冻切片观察GFP表达情况。结果两种转导方法对小鼠听力均无显著影响,圆窗膜显微注射组转染耳蜗内毛细胞GFP可见表达,转染效率由底转到顶转逐渐降低,无毛细胞损伤,经完整圆窗膜途径转染耳蜗未见GFP表达。结论 9型AAV难以通过完整圆窗膜,通过显微注射方式能够将目的基因高效转导内耳,对内毛细胞有选择特异性,且对听力影响较小,是一种安全有效的内耳转导方式。

氨基糖苷类抗生素在小鼠耳蜗毛细胞中的分布特征研究

目的研究氨基糖苷类抗生素在耳蜗内外毛细胞中的分布特征,以及这种分布方式对毛细胞功能可能产生的影响。方法采用荧光分子Texas Red标记庆大霉素,以100mg/kg浓度将荧光标记庆大霉素复合分子给予小鼠腹腔注射,持续给药14天,以正常的未给药小鼠作为对照组,分别于给药14天以及停止给药14天(28天)检测小鼠听力水平及庆大霉素在毛细胞中的分布情况。结果与对照组相比,庆大霉素持续暴露14天组ABR结果显示听力阈值有明显上移,共聚焦结果显示荧光标记庆大霉素在外毛细胞中分布于外毛细胞核上区接近纤毛的颈部区域,在内毛细胞核上区及核下区均有明显分布,在内毛细胞胞浆中呈瀑布状,特别是在内毛细胞底部带状突触区域有较为集中的荧光聚集。在停止注射庆大霉素14天后检测,听力并未得到改善且庆大霉素在内外毛细胞的分布情况并未发生显著变化,且毛细胞数量及排列未发生显著差别。结论庆大霉素暴露后可被耳蜗毛细胞显著摄取,其在内毛细胞中分布范围更加广泛,并且摄取的庆大霉素可在毛细胞内长时间存在,但毛细胞数量及排列未受明显影响。

振动声桥在先天性中外耳畸形患者的应用

目的报道振动声桥在先天性中外耳畸形患者(尤其有特殊情况者)的应用,探索其在该类患者的适应症。方法对4例先天性中外耳畸形患者行振动声桥植入术,均为男性,年龄3-18岁(平均13.5岁),3例双耳畸形,1例单耳畸形,均为左侧植入,对具有特殊情况者根据具体情况采用相应措施完成手术。手术径路分为经面神经隐窝径路(3例)和面神经后径路(1例)。振动声桥植入方式分为镫骨振动型(2例)和圆窗振动型(2例)。对比开机前后听力与言语测听结果,及日常交流情况进行评估。结果 4例患者均顺利完成手术,无并发症。开机后,听力改善明显,0.25k-4kHz平均纯音或条件反射测听气导听阈改善35dB(开机前69dB/后34dB),助听后安静环境下65dBSPL语句识别率,双耳畸形者平均为86%(术前0%),单耳畸形者100%(术前100%),但噪声环境(-8dBSNR)下为20%(裸耳0%)。结论振动声桥植入是先天性中外耳畸形患者一种良好的听力解决方案,即便有些特殊情况者。

中国东北地区非综合征性耳聋患者GJB2基因的致聋突变分析

目的分析58例中国东北地区非综合征性耳聋(nonsyndromic hearing impairment,NSHI)患儿GJB2基因突变类型和频率。方法收集吉林省吉林市聋哑学校的58例非综合征性耳聋患儿(分别来自57个家庭)及37例听力正常家属的血样,经聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增GJB2基因编码区,用酶切方法初步分析已知的233-235位点,进一步行DNA测序证实酶切结果并发现新的突变类型;同时对部分家属进行DNA测序,区分并证实致病突变位点或多态性改变。结果58例患儿中发现11例(18.97%)为233-235delC突变,其中7例(12.07%)为233-235delC纯合突变,4例(6.90%)为233-235delC杂合突变;发现1例35delG杂合突变;4例235delC杂合突变及1例35delG杂合突变者均伴有299-300delAT杂合突变。在患儿及听力正常的家属中均发现有G79A杂合及A341G杂合复合变异、G79A纯合及A341G纯合复合变异。结论东北地区NSHI患儿的GJB2突变热点为233-235delC,突变率为18.97%。233-235delC杂合及299-300delAT杂合复合突变、35delG杂合及299-300delAT杂合复合突变为致病突变。G79A杂合及A341G杂合复合变异、G79A纯合及A341G纯合复合变异为多态性改变。

非综合征型耳聋的基因型与表型关系

耳聋是常见的先天性疾病，世界范围内先天性聋的发生率为1／1000，其中遗传性聋占一半以上。

癔病性耳鸣耳聋的治疗

目的提高对癔病性耳鸣耳聋的认识和治疗水平,探讨其治疗模式。方法回顾分析4例癔病性耳鸣耳聋患者的诊治过程及预后。结果4例以耳鸣为第一主诉的患者,经过主观和客观听力学检查以及其他检查均排除了器质性病变,确诊为癔病性耳鸣耳聋,经过耳鼻咽喉科和心理医生的共同治疗,患者均康复,随访8月～4年无复发。结论癔病性耳鸣耳聋的治疗比诊断困难,一旦确诊,不必按突聋进行治疗,需要请心理医生针对心因治疗。

MicroRNA与哺乳动物内耳发育

MicroRNA（miRNA）是一种小的内源性非编码单链RNA分子，大约由21～25个核苷酸组成。这些小的miRNA通常靶向一个或者多个mRNA，通过翻译水平的抑制或断裂靶标mRNAs而调节基因的表达。miRNA在生物体内广泛存在，对多种生物学过程起调控作用，与细胞生长分化，器官发育（如内耳发育）和肿瘤产生等有密切关系。将来，miRNA很可能作为一种新的治疗因子用于恢复听力、再生毛细胞。

谷胱甘肽S-转移酶GSTT1、GSTM1基因多态性与老年性耳聋遗传易感性的关联性分析

目的探讨谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)GSTT1和GSTM1基因多态性是否与老年性耳聋遗传易感性相关。方法在解放军总医院耳鼻咽喉科研究所聋病分子诊断中心样本库中选取本研究的研究对象,提取基因组DNA;利用多重PCR(Polymerase chain reaction,PCR)的方法同时扩增所有研究对象GSTT/GSTM基因编码区并进行GSTM1和GSTT1基因多态性的分型;通过病例-对照关联性分析方法进行统计学分析,明确GSTT1和GSTM1的多态性和老年性耳聋遗传易感性是否相关。结果本研究共选取了224名研究对象,包括110例老年性耳聋病例(平均阈值PTA=51±11dB)及114例相同年龄构成的对照组(PTA=18±4dB);所有研究对象的年龄均在60至80岁之间,病例组(男77人,女33人)的平均年龄为72.93±5.080岁,对照组(男76人,女38人)的平均年龄73.10±5.787岁。通过GSTM1和GSTT1基因多态性分型及统计学分析结果显示:GSTM1、GSTT1基因型阳性率及GSTT1+/GSTM1+、GSTT1+/GSTM1-、GSTT1-/GSTT1+和GSTT1-/GSTM1-不同基因多态性频率在病例-对照组间差异均无显著的统计学意义(P>0.05)。结论中国人群中GSTT1和GSTM1基因的多态性与老年性耳聋之间并不存在较强的关联性。

18个省市聋校学生非综合征性聋病分子流行病学研究(Ⅰ)-GJB2 235delC和线粒体DNA 12SrRNA A1555G突变筛查报告

目的通过统一的调查、标本采取和基因筛查方法进行全国性重度感音性耳聋的分子流行病学调查和研究。方法通过标准化的流行病学调查设计、行政组织、标本采取和GJB2 235delC和线粒体DNA 12SrRNA A1555G筛查方法进行全国18个省市自治区的重度感音神经性耳聋患者的一般情况和常见分子病因学调查。结果收集来自18个省市2065例重度至极重度感音神经性耳聋病例,其中非综合征性耳聋病例2016例,筛查出线粒体 DNA 12SrRNA A1555G突变病例57例,GJB2 235纯合突变148例,GJB2杂合突变157例。调查显示在中国各地, 线粒体DNA 12SrRNA A1555G和GJB2 235delC突变相关性耳聋占有较高的比例,同时各地区间检出率差异较大。结论在中国广大地区的重度神经性耳聋患者中,常见突变引起的遗传性耳聋占有较大的比例,基因筛查方法是进行耳聋病因流行病学调查的有用工具。

60岁以上门诊老年听力障碍患者听力损失分布的初步研究

目的对2017全年来我院行纯音听力检查的所有老年患者的结果进行横断面分析,初步了解现阶段我国局部地区门诊就诊的老年听力障碍患者听力损失的分布特点。方法调查门诊全年内首次就诊的60岁以上(含60岁)老人4794例,男2136例,女2658例,男女比例为1:1.24,平均年龄为68.87±5.80岁,中位数为67岁。按年龄分为三组:年轻老年人组(60～74岁)、老年人组(75～89岁)和长寿老人组(90岁以上),分析所有患者纯音测听结果。按照WHO1997年听力障碍分级标准将受试者每耳的听力进行分析。结果全部年轻老年人组3761例,占总例数78.45%,其中男性1615例(42.9%),女性2146例(57.1%);老年人组1000例,占总例数20.86%,其中男性498例(49.8%),女性502例(50.2%);长寿老人组33例,占总例数0.69%,其中男性23例(69.7%),女性10例(30.3%)。研究数据中听力正常:555例(男169例,女386例),占总例数11.58%;轻度听力损失:1007例(男393例,女614例),占总例数21.01%;中度听力损失:1469例(男694例,女775例),占总例数30.64%;重度听力损失:1020例(男540例,女480例),占总例数21.28%;极重度听力损失:743例(男340例,女403例),占总例数15.50%。结论门诊就医的年轻老年人(60～74岁)的数据量明显高于其他两组,年龄组别越高,就诊检查的患者数量随之减少,男女比例逐渐趋于一致。本文纳入的听力结果以轻度、中度、重度听力下降为主,随着年龄的增长,所患听力疾病的损失程度有向愈加严重的趋势。同时三个年龄组的各频率纯音听阈值在跨组时均有10 dB左右的下降。

老年性聋的基础研究和听觉康复

老年性聋也称为年龄相关性聋，主要是指随着年龄的增加逐渐发生的以高频听力下降为主的感音神经性听力损失。随着人口老龄化的加剧，老年性聋的发生率呈现逐渐增加的趋势，其占单纯听力残疾人口的比例高达51．61％以上。

听性脑干反应各波幅度的测量方法-动物实验研究

目的研究高刺激声强(90dB SPL)下豚鼠听性脑干反应(ABR)波Ⅰ、波Ⅲ、波Ⅴ的波幅测量方法。方法11只(22耳)2-3月龄白毛雌豚鼠,初测听力正常,测量短声(Click)、短纯音(4k、8k、12k、16k、24k、32kHz)下的听性脑干反应,记录反应阈及90dB SPL刺激声强下的基线高度、波Ⅰ、波Ⅲ、波Ⅴ的潜伏期、波间期、波峰高度、波谷高度,比较波幅的两种测量方法,即波峰-基线和波峰-波谷在90dB SPL刺激声强下,波Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ两种测量方法的稳定性,并比较两种测量方法下波Ⅰ波幅与Ⅰ/Ⅴ波幅比的稳定性。结果 90dB SPL声强下ABR波Ⅰ、波Ⅲ、波Ⅴ的波幅两种测量方法,波峰至基线比波峰至波谷所得的数据更集中,离散程度更小;两种方法的波Ⅰ波幅的变异系数均小于Ⅰ/Ⅴ波幅比。结论在豚鼠中,使用波峰-基线的幅度测量方法得到的最高刺激声强下的ABR波Ⅰ、波Ⅲ、波Ⅴ波幅更稳定;在正常豚鼠中判断波Ⅰ波幅有无下降,直接通过比较波Ⅰ波幅,比通过Ⅰ/Ⅴ波幅比的变异度更小。

视觉失匹配负波中的额叶注意机制研究

1研究背景 自动感知环境的变化是注意力的核心部分。失匹配负波（mismatch negativity,MMN）是一种电生理反应,是指在一系列符合规律的感官刺激中引入一个偏差刺激产生的反应,能够反映大脑对感觉信息自动监测的能力。这种偏差刺激的形式可以表现为刺激声特性的偏差如刺激声之间的抽象偏差或一系列对称刺激中的非对称刺激。

先天性中耳畸形的临床分型及其与耳聋的相关性

目的探讨先天性中耳畸形的临床分型,以及不同类型的先天性中耳畸形与耳聋的相关性,以利于术前中耳畸形的诊断和术式的选择。方法回顾性分析解放军总医院1995年3月-2004年5月收治的经手术证实为单纯先天性中耳畸形的病例(64例,82耳)。根据中耳组织胚胎学发育及手术探查中耳畸形情况进行临床分型,统计学检验各型先天性中耳畸形听阈的差异。结果根据中耳结构组织胚胎学的发育,将先天性中耳畸形分为:A1:先天性锤砧骨畸形;A2:先天性砧镫骨畸形;B型:先天性镫骨固定;C型:先天性前庭窗或蜗窗发育不全或闭锁。听力学检查显示A、B、C3组间在语言频率上差异无统计学意义(P=0·1617),而高频(>2KHZ)的听阈B型及C型与A型均具有统计学意义(P<0·05),并且B、C型先天性中耳畸形存在骨导下降及混合聋。结论中耳结构的组织发育来源不同,在临床上不同类型的先天性中耳畸形累及的范围及程度存在很大差异,从而导致不同程度的传导性聋或混合性聋,其听阈不仅决定于听骨链是否完整,还在于畸形的部位和累及的范围。骨导听阈与气导高频听阈有助于鉴别不同类型的先天性中耳畸形。

中国赤峰地区耳聋患者病因分析

目的探讨中国北方赤峰地区的重度、极审度感音神经性聋患者的耳聋病因构成，了解遗传性聋的比例，为建立和完善符合中国耳聋人群遗传特征的基因筛查程序提供参考。方法凋查对象来自内蒙古赤峰地区某特教学校耳聋患者共134例，听力检查全部为重度、极重度感音神经性聋；对照组100例，为中闰北方听力正常者。所有受柃者均采集外周血并提取DNA，进行GJB2、GJB3、G．IB6、SLC26A4、线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）12SrRNA和tRNASer（UCN）编码区全长序列分析，并对携骷SLC26A4突变的个体凹访进行高分辨率颞骨CT检查。结合耳聋病史、家族史、氨基糖甙类药物应用史及基因筛查结果分析该耳聋人群的病因。结果该耳聋人群中与遗传因素有关的耳聋比例为60．45％（81／134），其中病因明确的遗传性聋比例为33．58％（45／134）。GJ82突变是该人群中17．16％（23／134）耳聋患者的病因；与药物性耳聋相关的线粒体基因1555A〉G突变仅占0．76％（1／134）；通过SLC26A4序列分析结合内耳影像学检查，诊断前庭水管扩大和（或）内耳畸形患者20例，占该耳聋人群的14．93％。此外，还有13．43％（18／134）的患者携带GJB2单杂合突变，其耳聋可能与之有关；6．72％（9／134）的耳聋患者携带SLC26A4单杂合突变，这部分患者颞骨CT检查木发现前庭水管扩大或因故未能进行颞骨CT检查，不排除其耳聋与SLC26A4相关的可能；2．24％（3／134）的耳聋患者携带线粒体12SrRNA1095T〉C突变，该突变与药物性耳聋有关，很可能是导致耳聋的病因。GJB3基因突变可能参与了1．49％（2／134）患者的耳聋发病；在该耳聋人群中未检出GJB6基因突变。结论赤峰地区抽样涮A耳聋群体中遗传性聋比例高达60．45％，GJB2突变是陔人群遗传性聋的最常见病因，SLC26A4突变为第二常见病因。

大前庭水管综合征的基因诊断和SLC26A4基因突变分析

目的应用变性高效液相色谱分析和序列分析方法进行大前庭水管综合征患者的SLC26A4(PDS)基因全序列扫描,分析大前庭水管综合征的SLC26A4基因型变化和遗传特征。方法来自35个家庭的38例患者多患中重度感音性耳聋,所有患者颞骨CT均显示前庭水管明显扩大。以高效液相色谱分析结合序列分析进行SLC26A4基因分析。结果共发现32个先证者携带有SLC26A4基因突变,其中纯合突变11例,复合突变9例,单一杂合突变12例,3个先证者未发现突变,在所有受检患者中突变发现率91.4%(32/35)。共发现8种突变类型58个突变,其中IVS7-2A>G突变为中国人最常见的SLC26A4突变,共发现其纯合型10例,杂合突变13例,即有71.9%的患者(23/32)携带此种突变,2168A>G为第二常见突变,共有8名患者携带此杂合突变,另发现1229C>T,IVS15+5G>A,1226G>A,1199-1200insT,946G>T,916-917insG突变形式,后三种突变为国内外尚未报道的新突变。四种复发性突变IVS7-2A>G、2168A>G、1229C>T、IVS15+5G>A在此组病例的30例患者均有出现。三个多发家庭的同胞患者均具有一样的SLC26A4突变。结论大前庭水管综合征是典型的常染色体隐性遗传疾病,SLC26A4基因突变是其明确的致病因素,SLC26A4基因检测是诊断大前庭水管综合征的重要方法之一。

河南省安阳市特教学校非综合征型聋学生SLC26A4基因突变热点区域的分析

目的利用基因诊断方法调查河南省安阳地区聋哑学生SLC26A4基因突变热点区域的基因突变频率。方法对安阳市特教学校151例聋哑学生采集外周血并提取DNA,以序列分析方法检测SLC26A4基因的突变热点区域(包括外显子7+8、19、10、17、15)。结果SLC26A4基因突变热点区域序列分析结果显示31.79%(48/151)患者检测到了SLC26A4基因的突变,包括双等位基因突变者26例(17.22%),单等位基因突变者22例(14.57%)。结论安阳地区耳聋人群的SLC26A4基因突变频率明显高于国内外的报道,提示此地区特有的遗传性致聋病因和此地区人群具有SLC26A4基因热点突变区域的高携带率。