遗传性耳聋资源的收集、保存及利用——综合系统的建立

20世纪最激动人心的伟大创举之一就是和曼哈顿原子弹计划"、"阿波罗人类登月计划"一起被誉为20世纪科学史上三个里程碑的人类基因组计划(Human Genome Project HGP).

以突发听力下降为首发症状的遗传性耳聋病例分析

目的探讨以突发性听力下降为首要症状的患者中,遗传性耳聋患者的诊治及转归。方法对我院2011年1月-12月耳内科病房诊治的以突发听力下降为主诉患者,进行了详细的病史和家族史询问,听力学检查,包括纯音测听,声导抗,畸变耳声发射,听觉脑干诱发电位和言语测听;以及影像学检查,包括颞骨CT,颅脑MRI等;根据病史及辅助检查,对高度怀疑遗传性聋的患者施行常见耳聋基因筛查,包括GJB2、SLC26A4和线粒体DNA 12SRNA 1494及1555位点。对3例确诊为不同致病基因的遗传性耳聋患者的临床资料进行系统性分析,归纳总结该病临床特征及转归。结果 3例不同基因致病的患者中,1例为GJB2基因c.109G>A纯合突变,表现为单侧突发听力下降,经治疗后,听力明显改善;1例为SLC26A4基因c.919-2A>G纯合突变导致的大前庭水管综合征,表现为单侧突发听力下降,治疗后听力有效改善;1例为线粒体12S rRNA 1555 A>G突变,表现为双侧突发听力下降,治疗后无改善。结论以突发性下降为首发表现的患者中存在一定比例的遗传性耳聋。对伴有遗传性耳聋可疑因素的患者,在进行治疗的同时,可进行常见致聋基因筛查,以进行早期诊疗。

用耳鸣动物模型评价药物治疗耳鸣效果

目的 建立动物耳鸣的行为学模型 ,确认动物是否感觉到了耳鸣 ,并用该模型评价药物治疗效果。方法 雄性健康Wistar大鼠 6 0只 ,平均分为 10组 :第Ⅰ、Ⅱ组为水杨酸组 ,皮下注射水杨酸钠每日 35 0mg kg体重 ;第Ⅲ、Ⅳ组为生理盐水对照组 ;第Ⅴ、Ⅵ组为纯音组 ,用 8kHz、6 5dBSPL的纯音代替水杨酸 ;第Ⅶ、Ⅷ组为尼莫地平组 ,注射水杨酸后再皮下注射尼莫地平每日 1mg kg体重 ;第Ⅸ、Ⅹ组为骨参舒耳片组 ,注射水杨酸后给予骨参舒耳片剂 5g kg体重。第Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ组是从条件反射建立前开始给予药物或纯音 ,第Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ、Ⅹ组从条件反射建立后开始给予药物或纯音。将禁水后非常渴的动物置于隔声室内进行条件反射训练。持续背景白噪声强度 5 5dBSPL ,背景噪声随机停止为条件刺激 ,电击为非条件刺激。训练时给动物供水并记录吸水次数。经强化训练后形成“背景噪声停止 吸水减少或停止”的条件反射。不再给电击 ,观察条件反射的消除时间。结果 各组的消除时间分别为 :第Ⅰ组 5d ,第Ⅱ组 2d ,第Ⅲ、Ⅳ组均为 4d ,第Ⅴ组 5d、第Ⅵ组 2d ,第Ⅶ组 5d ,第Ⅷ组 4d ,第Ⅸ组 5d ,第Ⅹ组 4d。经双因素方差分析显示 ,各组之间和各训练时间 (d)之间差异具有极显著性意义 (P值均 <0 .0 0 1)。

单侧梅尼埃病患者双侧耳蜗电图检查的意义

目的分析梅尼埃病患者双侧耳蜗电图，以早期发现一侧梅尼埃病对侧耳膜迷路积水的可能性。了解梅尼埃病患者对侧无症状耳内淋巴积水可能的发生率。方法对明确诊断为梅尼埃病的121例患者行双侧耳蜗电图检查，对其中可统计出明确病程的114例比较其双侧耳蜗电图结果与病程的关系。结果可以统计出梅尼埃病病程的114例中，单侧异常46例，平均病程7．42±7．68年（5天-37年）；双侧异常38例，平均病程5．43±5．73年（3个月-20年）；双侧正常者30例，平均病程5．37±4．40年（4个月-12年）。三种情况下，病程与耳蜗电图结果无直线相关（P〉0．05）。在121例行双侧耳蜗电图检查的病例中，双侧耳蜗电图异常者39例。其中9例有双侧耳鸣，占23．1％（9／39），而单侧耳蜗电图异常者51例中，出现双侧耳鸣的仅有1例，占2％（1／51），双侧耳蜗电图异常伴双侧耳鸣的发生率明显高于单侧耳蜗电图异常伴双侧耳鸣的发生率（P〈0．01）。结论耳蜗电图对梅尼埃病诊断的评价应建立在对梅尼埃病动态变化的理解基础之上；耳蜗电图对早期听力正常的梅尼埃病的诊断具有一定的参考价值。

先天性镫骨畸形的外科治疗

目的探讨先天性中耳畸形镫骨手术治疗的远期疗效以及影响疗效的相关因素。方法对解放军总医院耳鼻喉科1984年4月-2002年3月先天性中耳畸形接受镫骨手术58例患者进行随访,对随访半年以上、资料完整的51例(70耳)进行回顾性总结,应用Stata7.0统计软件进行远期疗效分析。语言频率(0.5、1、2kHz)气导听力提高15dB以上为手术成功标准。结果本组患者术前气导最小30dB,最大75dB,平均58.6±6.9dB,听力损失主要为低频为主,多呈上升曲线。半年后复诊气导最小20dB,最大65dB,平均21.6±13.1dB。半年、1年、2年、5年以上手术成功率分别为91.4%(64/70)、93.5%(43/46)、93.5%(29/31)、91.8%(11/12)。手术方式的选择上,镫骨钻孔活塞术(Teflon小柱)、镫骨切除术(自体或异体骨柱)、镫骨撼动术半年后成功率为92.3%(36/39)、81.3%(13/16)、80.0%(12/15)。远期疗效主要影响因素(按影响力大小)依次为:镫骨足板病变、手术并发症、砧镫关节畸形、患者年龄。结论镫骨手术是治疗先天性镫骨畸形有效的手术方法,其远期听力效果比较稳定。与镫骨切除术和撼动术相比较,镫骨钻孔活塞术后听力增进较好。

耳蜗型与前庭型梅尼埃病的诊断

目的结合4例典型病例,探讨两类不典型梅尼埃病的临床表现与诊断。方法结合纯音测听和前庭诱发肌源性电位的甘油试验,回顾分析4例耳蜗型和前庭型梅尼埃病的临床表现与临床演变。结果4例患者中,2例为蜗型梅尼埃病,表现为复发性、波动性听力下降,甘油试验阳性,而无眩晕;1例患者为前庭型梅尼埃病,表现为复发性眩晕和平衡障碍,前庭双温试验异常,前庭诱发肌源性电位甘油试验阳性;1例由蜗型梅尼埃病转变为典型梅尼埃病。结论不典型梅尼埃病是客观存在的,在临床上有些病例为蜗型梅尼埃病,有些患者可为前庭型梅尼埃病,也有的患者可从蜗型梅尼埃病向典型梅尼埃病转变。在鉴别诊断中,纯音测听、前庭诱发肌源性电位与甘油试验结合可以提高检出率。

遗传性耳聋家系线粒体DNA 961delT/insC(n)突变的致病性分析

目的探讨线粒体DNA 961delT/insC(n)突变与氨基甙类药物性耳聋的相关性。方法对一个耳聋家系11个成员采集氨基甙类抗生素用药史、进行听力学检查、表型分析,采集外周静脉血样本,从白细胞中提取DNA,用聚合酶链反应扩增线粒体DNA(mtDNA)全序列,对扩增片段进行DNA测序,对发现的基因突变与耳聋表型进行分离分析。结果参与研究的所有9例母系成员均检出mtDNA 961delT/insC(n)突变。有明确氨基甙类抗生素用药史的4例中只有2例耳聋患者,其中1例为用药之前出现的先天性聋,另1例为用药后38年出现的轻度耳聋。突变不与耳聋共分离。结论本研究不支持mtDNA 961delT/insC(n)突变是该家系耳聋的致病突变,mtDNA 961位点附近可能是一个多变异的区域,mtDNA 961delT/insC(n)可能是一个与氨基甙类药物性耳聋不明确相关的多态。

常染色体显性遗传性耳聋家系的遗传学特征分析

目的 听力损失是中国人群中的常见的感觉障碍性疾病。为了解遗传因素在中国听力损失病人中的作用,对两个中国耳聋大家系进行了遗传特征的分析。方法:家系中的先证者在解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科就诊,诊断为感音神经性耳聋。通过先证者对家系成员进行调查并绘制系谱图。对调查的家系成员进行病史、体检、纯音测听及听性脑干诱发电位检查。一些家系成员进行了颞骨CT扫描检查以排除听觉系统的其他病变。结果:两个中国耳聋家系,命名为Z002及F013家系,表现为一种代代相传的中度及中重度听力掘失。遗传方式考虑为常染色体显性遗传方式。在Z002家系的听力表型表现为一种高频听力损失,而在F013家系表现为低频听力损失。结论:本文报道了两个特征为非综合征型的常染色体显性遗传的中国耳聋家系。系谱图分析提示两个家系均为常染色体显性遗传方式。这两个家系适合于进一步的连锁分析及定位克隆研究以便寻找到相应的耳聋相关基因。

内耳Connexin缝隙连接的功能与耳聋机理

缝隙连接对于维持正常听觉功能有着重要的作用,编码组成缝隙连接蛋白的Connexin基因突变可引起严重的听力损失,占整个新生儿耳聋病例的70～80%。此类基因病理变化仅发生于耳蜗内,虽听觉毛细胞上并无缝隙连接或Connexin基因表达,但其支持细胞借助于缝隙连接的耦合作用在内耳联结成一个特殊的网络。本文总结了近年来内耳缝隙连接生物物理学特性方面的研究进展,阐述了耳蜗缝隙连接对于听觉功能的重要性;同时也展望了阐明其功能对治疗因Connexin基因突变所致的遗传性耳聋的前景。

SOX5、SOX6基因在豚鼠耳蜗中的表达及意义

目的探讨SOX5、SOX6基因在豚鼠耳蜗中的表达及该基因对耳蜗发育的影响与作用。方法活体解剖取出豚鼠耳蜗、肝脏、脑、肾脏和心脏等组织,应用Primer 5.0软件设计SOX5、SOX6引物。使用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测SOX5、SOX6基因的表达情况。结果SOX5基因在不同组织中均有表达,耳蜗中的表达相对较弱。SOX5和SOX6基因均在耳蜗组织表达。结论SOX5、SOX6基因的表达具有一定的组织特异性,两者均在耳蜗中的表达提示SOX5、SOX6基因对耳蜗的骨性组织发育可能存在一定作用。

C-fos癌基因表达法及其在听觉中枢研究中的应用

C-fos癌基因表达法是利用神经元受到兴奋性刺激后C—fos基因的表达剧增和FOS蛋白在胞核内 迅速堆积的特点,应用原位杂交或免疫组化的手段对中枢神经系统形态和生理进行研究的方法。本文根据国外有 关文献对其方法的建立加以综述,并着重阐述它在听觉中枢系统(主要是耳蜗核和下丘核)研究中取得的进展。

中国西北地区部分语前聋患者GJB2基因突变的分子流行病学研究

目的在中国西北地区部分语前聋患者中进行GJB2基因突变检测和分子流行病学研究,以初步掌握GJB2基因在该地区语前聋患者中的分布。方法知情同意的前提下对274例聋哑学生进行临床资料的采集,抽取外周静脉血,血样经基因组DNA提取,进行GJB2基因的PCR扩增,PCR产物行双向直接测序,检测GJB2基因突变。结果274例聋哑学生均为非综合征型耳聋,语前聋。GJB2基因检测发现了10种序列改变方式,包括2种多态性改变(79G→A、341A→G)、7种文献中已有报道的致病突变(30delG、94C→T、109G→A、139G→A、176→191del16、235delC、299-300delAT)和一种新的序列改变方式(257C→G)。结论GJB2基因突变在中国西北部语前聋人中的比例很高,占10·95%,开展GJB2基因筛查工作对该地区聋病的早期诊断、遗传咨询具有重要的意义。

大前庭水管综合征的诊治策略研究

目的研究和揭示大前庭水管综合征(LargevestibularaqueductSyndrome,LVAS)的临床诊治策略。方法对2003年5月—2005年12月收集的107例大前庭水管综合征患者进行系统的临床听力学特征分析、影像学分析及SLC26A4致病基因检测分析,以期发现大前庭水管综合征患者的系列特征。临床听力学特征性观察包括纯音听力中低频的气骨导差;听性脑干诱发电位检查时观察特征性的声诱发短潜伏期负反应(acousticallyevokedshortlatencynegativeresponse,ASNR);影像学检查包括对所有患者均行颞骨CT扫描或耳蜗水成像磁共振检查了解前庭水管、内淋巴囊及耳蜗的发育情况;病因学分析包括应用聚合酶链反应(PCR)的方法扩增SLC26A4基因的21个外显子,直接测序,DNAStar及BioEdit序列比对软件分析SLC26A4基因的突变位点。结果70.8%～83.7%LVAS患者在低频500Hz、250Hz存在显著的气骨导差,范围在15～95dBHL。75.7%的LVAS患者在常规ABR测试时发现ASNR,潜伏期为3.26±0.57ms。97.9%的LVAS患者发生了SLC26A4基因的突变,其中双等位基因突变占88.4%,单等位基因和未发现突变的家系分别占9.5%和2.1%。共发现38种突变形式,包括23种国际上尚未报道的突变,15种已报突变(五种仅报道于中国家系)。其中IVS7-2A>G突变是所有突变中最常见的突变,占所有突变者的78.9%,是中国人群中的特征性突变。影像学检查CT及磁共振是诊断LVAS的金标准。结论大前庭水管综合征具有特征性的纯音听力—低频气骨导差;具有特异性的ABR波形—ASNR;CT检查见前庭水管扩大,直径>1.5mm;具有特征性的MRI表现-扩大的内淋巴囊;具有特异和常见的SLC26A4基因突变谱。上述系列特征形成了对大前庭水管综合征的诊断依据。选择积极的治疗方案将有助于患者听力的保护与康复。

国内突发性聋临床诊治研究论文的再评价

目的复习国内近5年来有关突发性聋疗效的报道,分析突发性聋诊断和治疗的现状,重点分析1996年中华医学会耳鼻咽喉科学分会制定的诊断和疗效评定标准的执行情况。方法检索中国生物医学文献数据库和中国期刊网医学专题全文数据库,以突发性聋和治疗为关键词检索2000～2004年发表的有关突发性聋诊治的研究文章。依据国际循证医学标准,进行逐篇分析。结果共检出2000-2004年发表的有关突发性聋诊治的研究文章234篇。其中2000-2002年发表的有关突发性聋诊治的研究文章176篇,有关药物疗效的126篇,在关于药物疗效的文章中,以1996年中华医学会耳鼻咽喉科学会在上海制订的诊断和疗效标准为标准的文章26篇,占20.6%,设有对照试验的89篇,占70.6%,其中符合临床随机对照试验(randomized controlled trials,RCT)的36篇约占28.5%。2003-2004年发表的有关突发性聋诊治的研究文章58篇,其中有关药物疗效的25篇,全部均标明以1996年中华医学会耳鼻咽喉科学会在上海制订的诊断和疗效标准为标准。但全部234篇文章设有空白对照试验的0篇,有长期随访记录的文章0篇,做组间均衡性检验的文章0篇,记有不良反应的文章共为6篇,平均疗效最低60.3%,最高94.5%。结论目前国内治疗突发性聋的报道很多,但对其诊断和疗效的评估标准认识不够统一,1996年制定的标准执行情况不容乐观。有必要进行标准修订,而且应该增加治疗原则的制定,有利于规范治疗,指导临床。多中心RCT研究对突发性聋的临床研究非常重要。

梅尼埃病的病因及发病机制研究进展

梅尼埃病（Meniere’S disease，MD）是耳科的一种常见病，以膜迷路积水为基本病理基础，临床特征为间歇发作性眩晕、波动性听力下降、耳鸣和耳胀满感，目前病因及发病机制未明。随着人类基因组计划的实施以及基因技术的发展，MD的遗传学研究被认为是打开其病因及发生与发展秘密大门的钥匙。本文将就梅尼埃病的病因及发病机制，尤其是遗传学方面的研究进展进行综述。