尿液蛋白质组学在肾小球疾病研究中的应用

近几年来，蛋白质组学研究越来越多地应用于各个医学领域，各种功能蛋白质不仅是发挥机体正常生理作用的重要活性物质，也是与机体病理状态最具直接关系的物质。有研究显示，只有约2％的疾病仅与基因序列有关，而98％的疾病与蛋白质的表达有关。蛋白质组学的研究在肾脏病领域也已经广泛开展，肾脏病蛋白质组学研究主要包括肾组织不同结构，如肾小球、血管、肾小管、肾间质和足细胞蛋白质组学、尿液蛋白质组学以及肾脏替代治疗时透析液或超滤液的蛋白质组学等。

肾脏缺血再灌注损伤E-钙粘附素的表达研究

目的探讨肾脏缺血再灌注损伤时E-钙粘附素(E-cadherin)的变化。方法2006年1月至6月对解放军肾脏病研究所暨肾病重点实验室利用ATP耗竭剂抗霉素A建立的犬集合管上皮细胞(MDCK)缺血模型进行体外实验;体内实验使用双侧肾动脉钳闭法建立大鼠缺血再灌注损伤模型。PAS染色了解肾脏病理改变;E-cadherin免疫组化了解E-cadherin的定位和表达;Western bolt检测E-cadherin的蛋白表达。结果正常MDCK细胞E-cadherin在细胞膜表达,ATP耗竭4hE-cadherin表达极性消失,主要在细胞质表达。肾组织免疫组化显示,假手术组E-cadherin主要表达在肾小管上皮细胞基底膜侧;缺血肾脏组E-cadherin的表达极性消失,空泡变性的肾小管上皮细胞基底膜侧E-cadherin表达明显减少,主要在细胞质表达;而在脱落的肾小管上皮细胞只表达于细胞质。肾组织Western bolt显示,假手术组E-cadherin为120ku条带,缺血45min120ku条带减弱,出现明显的80ku条带,缺血60min120ku条带几乎检测不出,而主要表现为80ku条带。结论体内体外实验均证实,肾脏缺血再灌注损伤时E-cadherin的定位、蛋白表达量发生明显变化,并出现时间依赖性E-cadherin降解,使上皮细胞的极性和细胞间连接受损,部分解释了肾脏缺血再灌注损伤时上皮细胞脱落的原因。