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高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡的机制研究
被引量:
1
1
作者
马玉香
白光辉
+3 位作者
白雪源
李作祥
冯哲
傅博
《青海医学院学报》
CAS
2009年第3期150-159,176,共11页
目的探讨高血糖对人肾小管上皮细胞活性氧(ROS)产生及凋亡的影响。方法将人近端肾小管上皮细胞(HKC)分别以不同时间在含有5.5 mM D(右旋)-葡萄糖(正常糖对照组)、25 mMD-葡萄糖(高糖组)和20 mML(左旋)-葡萄糖+5.5 mMD-葡萄糖(渗透压对照...
目的探讨高血糖对人肾小管上皮细胞活性氧(ROS)产生及凋亡的影响。方法将人近端肾小管上皮细胞(HKC)分别以不同时间在含有5.5 mM D(右旋)-葡萄糖(正常糖对照组)、25 mMD-葡萄糖(高糖组)和20 mML(左旋)-葡萄糖+5.5 mMD-葡萄糖(渗透压对照组)的DMEM培养基中培养。用化学发光法特异性检测细胞内H2O2水平。将细胞用荧光染料CM-H2DCFDA标记后用激光共聚焦显微镜检测活细胞中总ROS水平。用荧光染料Hoechst33258对细胞染色后在荧光显微镜下计数细胞凋亡率。用AnnexinV-FITC/碘化丙锭双染后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。在高糖组中同时加入30 mM的抗氧化剂牛磺酸,观察其对细胞凋亡的影响。结果化学发光法检测和共聚焦显微镜检测显示高糖可明显促进肾小管上皮细胞内活性氧的产生,与其他两对照组比较有显著差异(P<0.01);Hoechst33258染色法检测和流式细胞仪检测分析显示高糖可明显诱导肾小管上皮细胞的凋亡发生,与其他两对照组比较有显著差异(P<0.01);流式细胞仪检测分析显示抗氧化剂牛磺酸可明显抑制高糖诱导的肾小管细胞凋亡,与高糖组比较有显著差异(P<0.01)。结论高糖可通过促进细胞内生成过量ROS而诱导肾小管细胞凋亡发生,抗氧化剂可阻断高糖诱导的肾小管细胞凋亡。
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关键词
高糖
肾小管
活性氧
凋亡
牛磺酸
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职称材料
NaDC3过表达对人肾小管细胞能量代谢和活性氧产生的影响
被引量:
1
2
作者
马玉香
白雪源
+3 位作者
汪扬
冯哲
傅博
陈香美
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期150-153,共4页
目的:研究三羧酸循环中间代谢产物转运蛋白-高亲和力钠依赖性二羧酸转运蛋白(NaDC3)基因过表达对人肾小管细胞能量代谢与活性氧(ROS)产生的影响。方法:用重组NaDC3逆转录病毒载体感染人肾小管上皮细胞HKC。用Western blotting检测细胞...
目的:研究三羧酸循环中间代谢产物转运蛋白-高亲和力钠依赖性二羧酸转运蛋白(NaDC3)基因过表达对人肾小管细胞能量代谢与活性氧(ROS)产生的影响。方法:用重组NaDC3逆转录病毒载体感染人肾小管上皮细胞HKC。用Western blotting检测细胞中外源性NaDC3蛋白的表达水平。通过液体闪烁法测定细胞内同位素[3H]标记琥珀酸(NaDC3的转运底物)的浓度。分别用Clark电极法和反相高压液相法测定细胞内氧耗量和ATP含量。分别用荧光探针JC-1和CM-H2DCFDA处理细胞后通过激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位和细胞内ROS含量。结果:Western blotting结果显示导入外源NaDC3基因后可使细胞内NaDC3蛋白的表达水平明显增加。转运实验显示NaDC3病毒感染细胞内的[3H]-琥珀酸水平明显高于未感染和对照载体感染细胞。NaDC3病毒感染细胞中的氧耗量和ATP含量明显高于未感染和对照载体感染细胞。激光共聚焦检测显示,与未感染和对照载体感染细胞相比,NaDC3感染细胞的线粒体膜电位和ROS水平明显增加。结论:NaDC3过表达可通过转运过多的三羧酸循环中间代谢产物进入细胞内而加快肾小管上皮细胞能量代谢的速率、增加细胞内ROS的产生水平。
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关键词
三羧酸循环
肾小管
转运蛋白
能量代谢
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职称材料
题名
高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡的机制研究
被引量:
1
1
作者
马玉香
白光辉
白雪源
李作祥
冯哲
傅博
机构
青海大学医学院
解放军总医院肾病科暨全军肾病研究所
出处
《青海医学院学报》
CAS
2009年第3期150-159,176,共11页
基金
国家自然科学基金(No.30870920)
文摘
目的探讨高血糖对人肾小管上皮细胞活性氧(ROS)产生及凋亡的影响。方法将人近端肾小管上皮细胞(HKC)分别以不同时间在含有5.5 mM D(右旋)-葡萄糖(正常糖对照组)、25 mMD-葡萄糖(高糖组)和20 mML(左旋)-葡萄糖+5.5 mMD-葡萄糖(渗透压对照组)的DMEM培养基中培养。用化学发光法特异性检测细胞内H2O2水平。将细胞用荧光染料CM-H2DCFDA标记后用激光共聚焦显微镜检测活细胞中总ROS水平。用荧光染料Hoechst33258对细胞染色后在荧光显微镜下计数细胞凋亡率。用AnnexinV-FITC/碘化丙锭双染后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。在高糖组中同时加入30 mM的抗氧化剂牛磺酸,观察其对细胞凋亡的影响。结果化学发光法检测和共聚焦显微镜检测显示高糖可明显促进肾小管上皮细胞内活性氧的产生,与其他两对照组比较有显著差异(P<0.01);Hoechst33258染色法检测和流式细胞仪检测分析显示高糖可明显诱导肾小管上皮细胞的凋亡发生,与其他两对照组比较有显著差异(P<0.01);流式细胞仪检测分析显示抗氧化剂牛磺酸可明显抑制高糖诱导的肾小管细胞凋亡,与高糖组比较有显著差异(P<0.01)。结论高糖可通过促进细胞内生成过量ROS而诱导肾小管细胞凋亡发生,抗氧化剂可阻断高糖诱导的肾小管细胞凋亡。
关键词
高糖
肾小管
活性氧
凋亡
牛磺酸
Keywords
High Glucose Renal tubule Reactive oxygen species (ROS) Apoptosis Taurine
分类号
Q493.8 [生物学—生理学]
Q735 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
NaDC3过表达对人肾小管细胞能量代谢和活性氧产生的影响
被引量:
1
2
作者
马玉香
白雪源
汪扬
冯哲
傅博
陈香美
机构
北京大学首钢
医院
肾内科
解放军总医院肾病科暨全军肾病研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期150-153,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30870920
No.30270505
No.30070288)
文摘
目的:研究三羧酸循环中间代谢产物转运蛋白-高亲和力钠依赖性二羧酸转运蛋白(NaDC3)基因过表达对人肾小管细胞能量代谢与活性氧(ROS)产生的影响。方法:用重组NaDC3逆转录病毒载体感染人肾小管上皮细胞HKC。用Western blotting检测细胞中外源性NaDC3蛋白的表达水平。通过液体闪烁法测定细胞内同位素[3H]标记琥珀酸(NaDC3的转运底物)的浓度。分别用Clark电极法和反相高压液相法测定细胞内氧耗量和ATP含量。分别用荧光探针JC-1和CM-H2DCFDA处理细胞后通过激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位和细胞内ROS含量。结果:Western blotting结果显示导入外源NaDC3基因后可使细胞内NaDC3蛋白的表达水平明显增加。转运实验显示NaDC3病毒感染细胞内的[3H]-琥珀酸水平明显高于未感染和对照载体感染细胞。NaDC3病毒感染细胞中的氧耗量和ATP含量明显高于未感染和对照载体感染细胞。激光共聚焦检测显示,与未感染和对照载体感染细胞相比,NaDC3感染细胞的线粒体膜电位和ROS水平明显增加。结论:NaDC3过表达可通过转运过多的三羧酸循环中间代谢产物进入细胞内而加快肾小管上皮细胞能量代谢的速率、增加细胞内ROS的产生水平。
关键词
三羧酸循环
肾小管
转运蛋白
能量代谢
Keywords
Tricarbexylic acid cycle
Renal tubular
Transporter
Energy metabolism
分类号
Q493.8 [生物学—生理学]
Q735 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡的机制研究
马玉香
白光辉
白雪源
李作祥
冯哲
傅博
《青海医学院学报》
CAS
2009
1
下载PDF
职称材料
2
NaDC3过表达对人肾小管细胞能量代谢和活性氧产生的影响
马玉香
白雪源
汪扬
冯哲
傅博
陈香美
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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