铜螯合纳米磁珠结合MALDI-TOF／TOF MS分析人尿液中多肽组分的方法初探

目的:利用铜螯合纳米磁珠(MB-IMAC-Cu2+)系统联合基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)建立一套稳定、可行的技术路线,对尿液中相对分子质量(Mr)<10000的多肽进行系统研究,包括从样品的采集、存放、提取、检测在内的各个步骤。方法:分析了8名健康男性和8名健康女性的尿液标本。针对样本采集、存放、不同提取方法以及实验整个系统稳定性的问题设计不同组,分别检测各组尿液多肽谱并对结果进行评价。结果:在本系统中,观察到健康人尿液Mr<10 000范围内平均有85个信号峰,不同性别组间尿液多肽谱未见明显差异。以MALDI-TOF/TOF检测得到的出峰情况来评价各种可能因素对实验体系的影响,铜螯合纳米磁珠(MB-IMAC-Cu2+)提取多肽效果比较满意;整个实验体系稳定、可靠,重复性好,选择其中所观察的10个峰,变异系数均在10%以内,具有良好的可操作性;室温或者4℃保存最好不超过12 h;5次以内有限冻融对出峰没有影响。结论:本实验所探索、建立的方法为下一步研究尿液多肽组学提供了参考。