单克隆抗体及醋酸纤维薄膜电泳法在肺癌血清学诊断上的应用

肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。为提高肺癌的诊治率，我们对肺癌血清学的诊断方法不断进行研究、改进，以期建立一种操作简便，结果可信、肺癌检出率高的检查方法。本文采用组合单克隆抗体，经醋酸纤维薄膜电泳法，对７０例肺癌患者血清及１００例正常人血清进行了检测。结果显示，肺癌血清中癌相关抗原的检出率为８３％，正常人血清组的假阳性率为１０％，误诊率小于３０％，故此方法有诊断应用价值。

抗胃肠癌单克隆抗体对胃肠癌普查1801例结果分析

以抗结肠癌及胃癌单克隆抗体组合应用对１８０１例进行胃肠癌普查。普查结果：３２例胃肠癌肿瘤相关抗原阳性，阳性率为１．８％，部分进行胃及肠镜检查，其中１２例做肠镜，３０例做胃镜，结果证实：早期胃癌１例。癌前病变１９例，其中大肠腺瘤５例，伴不典型增生２例，萎缩性胃炎１２例，伴不典型增生７例，浅表性胃炎伴不典型增生１例，老年多发性肠憩室１例。此外，非癌前病变７例，包括浅表性胃炎、急性胃、肠炎等。１７５０例阴性者随访１年以上，尚未发现胃、肠癌，本法假阳性率低，０．３％。且方法较简便、价低。用于胃肠癌普查及诊断将有一定意义。

一组抗人肺癌单克隆抗体的制备及初步鉴定

本文报告用人肺腺癌细胞株A549细胞为免疫原,用常规细胞融合技术获得了5株抗人肺癌单克隆抗体WLA-1B4、WLA-2D1、WLA-1G7、WLA-1G9和WLA-2C4。前4株均为IgM型,后1株为IgG1型。添加试验表明WLA-2D1和WLA-1G9识别同一抗原决定簇,WLA-2C4,WLA-1B4识别不同的抗原决定簇。ABC法免疫组织化学研究表明,5株单抗与肺癌组织均呈阳性反应,而与正常组织交叉反应较少。

胃癌患者胃液、粪便、血清中CL—3肿瘤相关抗原特性的分析

本文采用免疫印迹、ELISA和一些生化手段测定慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎(CAG)和胃癌(GC)患者的胃液、粪便、血清中CL-3单克隆抗体相关抗原的含量、分子量和阳性率,并对其特性进行部份分析。胃液SDS-PAGE图谱显示CSG组无蛋白区带,CAG组甚少区带,GC组可达十来条区带,甚至融合成片。胃液免疫印迹图谱显示同样结果,其阳性区带分子量均值是:CSG组0,CAG组31KD,GC组40KD;阳性率分别是:0%,44％和72%。胃癌患者粪便、血清中CL-3对应抗原的分子量与胃液的相似,其阳性率是69％和70％。同一患者三种样品中CL-3对应抗原的性质均是涎酸糖蛋白,但其涎酸、糖链的含量不同,且有个体差异。CL-3与CEA和S-Tn抗原均有反应,文中对此展开了讨论。

强直性脊柱炎及类风湿关节炎患者IL-2及IL-2受体测定

应用流式细胞仪检测强直性脊柱炎(AS)及类风湿关节炎(RA)患者外周血淋巴细胞(PBL)表面IL-2受体(IL-2R)及经PHA刺激、体外培养产生的IL-2。结果表明,AS患者PBL表达IL-2R无明显增加,而RA患者则明显高于正常人及AS患者(P<0.01);AS及RA患者PBL体外培养产生IL-2明显多于正常人(P<0.01),提示IL-2异常在AS及RA患者免疫功能失调中起重要作用。

大肠癌患者粪便抗原的电泳分析

我们采用免疫印迹和ELISA技术,测得抗结肠癌单克隆抗体(CL-3)在大肠癌患者组织中对应的相关抗原是类CEA,分子量是180和123KD。粪便中也存有CL-3对应的肿瘤相关抗原,其性质同癌组织的相关抗原,但分子量明显小于它。它们是33、38、42,60和64KD五条区带。本文测定了14例大肠癌患者粪便,12/14阳性,1/14阴性,1/14可疑。17例正常人中仅有1/17阳性。

类风湿关节炎患者细胞免疫功能研究

对9例类风湿关节炎(RA)患者进行细胞免疫功能测定。结果表明,RA患者外周血淋巴细胞T_4、Tac阳性率及T_4/T_8比率明显高于正常人(P<0.05),且与临床表现及病情活动性相关;白细胞介素2的产生也明显增多;自然杀伤细胞活性明显降低,且对白细胞介素2刺激无反应。提示RA患者存在明显的细胞免疫功能紊乱。

血型抗原A、B、H、Le^a及Le^b在食道癌的表达

血型抗原作为癌相关抗原,在大肠、胃、胰、膀胱、肺等癌组织中都有显著变化,而在食道癌中的变化规律则尚未见报道。本文对42例食道癌组织进行ABH和Lewis血型抗原的检测。

GST—π、HAb18、HK_2三种免疫组化染色在乙型肝炎、肝硬化及肝癌研究中的应用

本文报道应用抗胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(简称GST-π)和抗人肝细胞癌单克隆抗体HAb18及抗细胞角蛋白单克隆抗体HK_2。用免疫组化染色,对肝癌、肝硬化及乙型肝炎进行了研究。结果表明:(1)GST-π是高分化肝细胞癌和胆管型肝癌较好的标志酶;用来鉴别低分化肝细胞癌和胆管型肝癌可能有一定价值。(2)HAb18相应抗原在肝癌的阳性率为78.6％,说明HAb18是肝癌较好的标志物。(3)HK_2在乙型肝炎、肝硬化不同程度地异常表达,反映其肝细胞胆管化生倾向,也提示二者与肝癌确有某种程度的内在联系。HK_2可用来帮助鉴别肝细胞肝癌和胆管型肝癌。

乙型肝炎、肝硬化及肝癌的免疫组化研究

本文应用抗人肝细胞癌单克隆抗体HAb_(13)(简称HAb_(13))和抗细胞角蛋白单克隆抗体HK_2(简称HK_2),经免疫组化PAP法染色,对10例正常肝、10例乙型肝炎、20例肝硬化及42例原发性肝癌进行研究,结果发现HAb_(13)相应抗原在肝癌的阳性率为78.6% 提示HAb_(13)是肝癌较好的标志物。HK_2在正常肝仅见汇管区胆管上皮细胞阳性,肝细胞均为阴性;在乙型肝炎及肝硬化组织中,除成熟及增生的胆管上皮外,部分肝细胞也出现HK_2阳性,其阳性率分别为30%和60%;在肝癌HK_2的总阳性率为92.9%,其中肝细胞型癌36例,33例呈弱阳性,胆管型肝癌6例全部为强阳性表达。

抗结肠癌抗体重链可变区和κ轻链基因的克隆

目的：从一株抗结肠癌细胞系ＬＳ１７４Ｔ的单抗细胞株ＣＬ－４中克隆出抗结肠癌抗体重链可变区和κ轻链基因。方法：用一步法提取总ＲＮＡ，逆转录形成ｃＤＮＡ，设计并合成一套扩增小鼠抗体重链可变区和完整κ轻链的通用引物，通过ＰＣＲ扩增基因，分别克隆入ｐＵＣ１９，作核苷酸序列分析。结果：用重链引物扩增获得长约３６０ｂｐ的片段；用轻链引物扩增获得约６４０ｂｐ的片段，序列测定获得它们的ＤＮＡ序列。结论：克隆的重链可变区基因长度为３６０ｂｐ，属于小鼠重链可变区Ｉ（Ｂ）亚族；κ轻链长度为６４２ｂｐ，其中可变区为３２１ｂｐ，属于小鼠κ轻链Ⅴ亚族。

抗结肠癌抗体Fab片段在大肠杆菌中的表达

目的：在大肠杆菌中表达抗结肠癌抗体Ｆａｂ片段，比较表达产物和原杂交瘤单克隆抗体的抗原结合特性。方法：以ＤＮＡ重组法构建重组表达质粒，在大肠杆菌中进行表达。对表达产物包涵体进行复性。用ＥＬＩＳＡ法和ＳＡＢＣ法测定复性产物的抗原结合特性。结果：构建了抗结肠癌相关抗原抗体Ｆａｂ片段的重组表达质粒ｐＧＬ４，在大肠杆菌ＪＭ８３中获得表达，表达的Ｆａｂ片段占全菌蛋白的２１％，主要以包涵体形式存在；对包涵体进行分离、变性和复性后得到了有活性的Ｆａｂ分子。结论：复性后的Ｆａｂ具有与原杂交瘤单克隆抗体相同的抗原结合活性。