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反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系端粒酶活性的抑制作用
被引量:
4
1
作者
马学斌
韩为东
+4 位作者
郝好杰
李琦
徐周敏
卢学春
赵亚力
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003年第9期932-937,共6页
背景与目的:近几年的研究表明,端粒酶在肿瘤的发生中扮演着重要角色。人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetrascriptase,hTERT)是端粒酶活化的惟一限制性组分。本研究探讨hTERT全长cDNA反义序列转染对人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D...
背景与目的:近几年的研究表明,端粒酶在肿瘤的发生中扮演着重要角色。人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetrascriptase,hTERT)是端粒酶活化的惟一限制性组分。本研究探讨hTERT全长cDNA反义序列转染对人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D恶性表型的逆转作用。方法:应用基因重组技术构建包含hTERTcDNA全长序列的反义hTERT真核表达载体pcDNA3.1(-)-hTERT,用脂质体转染人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D,通过生长曲线比较转染反义hTERT后PLA-801D细胞的增殖能力,应用逆转录-聚合酶链反应方法检测hTERTmRNA的表达水平,并应用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法检测端粒酶活性。结果:成功地构建了pcDNA3.1(-)-hTERT的反义真核表达载体,并转入到PLA-801D细胞中。转染反义hTERT的细胞较未转染及转染空质粒细胞的生长增殖能力显著降低(P<0.05);转染组细胞中野生型hTERTmRNA的表达被抑制,其相对表达量仅为对照组细胞的15.7%,转染组细胞中端粒酶活性较对照细胞下降了约82.4%。结论:hTERTcDNA的全长反义序列可以抑制PLA-801D细胞hTERTmRNA的表达水平和端粒酶活性,限制PLA-801D细胞的生长。
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关键词
反义HTERT
人肺巨细胞癌细胞系
端粒酶
活性
抑制作用
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职称材料
DNA甲基化与白血病的研究进展
被引量:
1
2
作者
徐周敏
卢学春
+1 位作者
于力
楼方定
《国外医学(输血及血液学分册)》
2002年第5期415-417,共3页
DNA异常甲基化是人类肿瘤中最常见的基因变化之一,它在白血病发生、发展中对基因表达调控、基因结构的稳定等方面发挥重要作用。白血病去甲基化治疗是建立在白血病甲基化研究基础上,是一种作用机理不同于传统化疗药物的新方法,它对复发...
DNA异常甲基化是人类肿瘤中最常见的基因变化之一,它在白血病发生、发展中对基因表达调控、基因结构的稳定等方面发挥重要作用。白血病去甲基化治疗是建立在白血病甲基化研究基础上,是一种作用机理不同于传统化疗药物的新方法,它对复发及耐药白血病有一定疗效。本文就近年来在DNA甲基化与白血病发生的关系及白血病去甲基化治疗方面的研究进展作一综述。
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关键词
研究进展
DNA甲基化
白血病
去甲基化
5-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶
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职称材料
反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系p53表达的影响
3
作者
马学斌
赵亚力
+4 位作者
郝好杰
李琦
司艺玲
徐周敏
卢学春
《军医进修学院学报》
CAS
北大核心
2005年第2期96-98,共3页
目的:本研究以端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetrascriptase,hTERT)基因的全长序列构建反义hTERT的真核表达载体,以此来转染肿瘤细胞PLA 801D,观察反义hTERT对其细胞周期分布及对p53表达的影响。方法:构建了包含hTERT全长基因序...
目的:本研究以端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetrascriptase,hTERT)基因的全长序列构建反义hTERT的真核表达载体,以此来转染肿瘤细胞PLA 801D,观察反义hTERT对其细胞周期分布及对p53表达的影响。方法:构建了包含hTERT全长基因序列的反义hTERT基因真核表达载体pcDNA3. 1(-) -hTERT,并稳定转染人肺巨细胞癌细胞系PLA 801D,观察基因转染前后,流式细胞术检测PLA 801D细胞的周期分布,用半定量RT- PCR检测p53mRNA的表达水平,免疫组化检测突变型p53蛋白阳性表达率的差异。结果:全长的反义hTERT基因可显著地抑制p53mRNA的表达,使细胞周期的分布出现G0 /G1期阻滞,突变型p53蛋白阳性率显著下降。结论:反义的hTERT基因可有效的抑制p53mRNA及突变型蛋白的表达水平,引起细胞周期阻滞,使细胞的恶性增殖减缓。
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关键词
反义HTERT
P53表达
肺巨细胞癌
癌细胞系
突变型P53蛋白
真核表达载体
RNA
表达水平
全长序列
基因
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职称材料
题名
反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系端粒酶活性的抑制作用
被引量:
4
1
作者
马学斌
韩为东
郝好杰
李琦
徐周敏
卢学春
赵亚力
机构
解放军总医院
基础所分子生物室
解放军总医院血液科实验室
出处
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003年第9期932-937,共6页
文摘
背景与目的:近几年的研究表明,端粒酶在肿瘤的发生中扮演着重要角色。人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetrascriptase,hTERT)是端粒酶活化的惟一限制性组分。本研究探讨hTERT全长cDNA反义序列转染对人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D恶性表型的逆转作用。方法:应用基因重组技术构建包含hTERTcDNA全长序列的反义hTERT真核表达载体pcDNA3.1(-)-hTERT,用脂质体转染人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D,通过生长曲线比较转染反义hTERT后PLA-801D细胞的增殖能力,应用逆转录-聚合酶链反应方法检测hTERTmRNA的表达水平,并应用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法检测端粒酶活性。结果:成功地构建了pcDNA3.1(-)-hTERT的反义真核表达载体,并转入到PLA-801D细胞中。转染反义hTERT的细胞较未转染及转染空质粒细胞的生长增殖能力显著降低(P<0.05);转染组细胞中野生型hTERTmRNA的表达被抑制,其相对表达量仅为对照组细胞的15.7%,转染组细胞中端粒酶活性较对照细胞下降了约82.4%。结论:hTERTcDNA的全长反义序列可以抑制PLA-801D细胞hTERTmRNA的表达水平和端粒酶活性,限制PLA-801D细胞的生长。
关键词
反义HTERT
人肺巨细胞癌细胞系
端粒酶
活性
抑制作用
Keywords
Antisense human telomerase reverse transcriptase(hTERT)
Telomerase
Eukaryotic expression vector
Human pulmonary g iant cell carcinoma cell line(PLA-801D)
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
DNA甲基化与白血病的研究进展
被引量:
1
2
作者
徐周敏
卢学春
于力
楼方定
机构
[
出处
《国外医学(输血及血液学分册)》
2002年第5期415-417,共3页
文摘
DNA异常甲基化是人类肿瘤中最常见的基因变化之一,它在白血病发生、发展中对基因表达调控、基因结构的稳定等方面发挥重要作用。白血病去甲基化治疗是建立在白血病甲基化研究基础上,是一种作用机理不同于传统化疗药物的新方法,它对复发及耐药白血病有一定疗效。本文就近年来在DNA甲基化与白血病发生的关系及白血病去甲基化治疗方面的研究进展作一综述。
关键词
研究进展
DNA甲基化
白血病
去甲基化
5-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系p53表达的影响
3
作者
马学斌
赵亚力
郝好杰
李琦
司艺玲
徐周敏
卢学春
机构
解放军总医院
基础所分子生物室
解放军总医院血液科实验室
出处
《军医进修学院学报》
CAS
北大核心
2005年第2期96-98,共3页
文摘
目的:本研究以端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetrascriptase,hTERT)基因的全长序列构建反义hTERT的真核表达载体,以此来转染肿瘤细胞PLA 801D,观察反义hTERT对其细胞周期分布及对p53表达的影响。方法:构建了包含hTERT全长基因序列的反义hTERT基因真核表达载体pcDNA3. 1(-) -hTERT,并稳定转染人肺巨细胞癌细胞系PLA 801D,观察基因转染前后,流式细胞术检测PLA 801D细胞的周期分布,用半定量RT- PCR检测p53mRNA的表达水平,免疫组化检测突变型p53蛋白阳性表达率的差异。结果:全长的反义hTERT基因可显著地抑制p53mRNA的表达,使细胞周期的分布出现G0 /G1期阻滞,突变型p53蛋白阳性率显著下降。结论:反义的hTERT基因可有效的抑制p53mRNA及突变型蛋白的表达水平,引起细胞周期阻滞,使细胞的恶性增殖减缓。
关键词
反义HTERT
P53表达
肺巨细胞癌
癌细胞系
突变型P53蛋白
真核表达载体
RNA
表达水平
全长序列
基因
Keywords
oncogenes
gene expression
genetic vectors
lung neoplasms
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
R737 [医药卫生—肿瘤]
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操作
1
反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系端粒酶活性的抑制作用
马学斌
韩为东
郝好杰
李琦
徐周敏
卢学春
赵亚力
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003
4
下载PDF
职称材料
2
DNA甲基化与白血病的研究进展
徐周敏
卢学春
于力
楼方定
《国外医学(输血及血液学分册)》
2002
1
下载PDF
职称材料
3
反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系p53表达的影响
马学斌
赵亚力
郝好杰
李琦
司艺玲
徐周敏
卢学春
《军医进修学院学报》
CAS
北大核心
2005
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