血栓弹力图对小儿先天性心脏病术后凝血异常的应用价值

目的探讨血栓弹力图(TEG)在小儿先天性心脏病术后凝血异常的应用价值。方法以100例先天性心脏病患儿为对象,根据患儿是否存在左向右或双分流并且血氧饱和度≤90%,将患儿分为紫绀组(n=29)和非紫绀组(n=71);根据患儿年龄进行亚组划分。检测TEG参数,比较其差异。结果年龄低于1岁患儿紫绀组与非紫绀组R值、K值、Angle、MA值未见差异(P>0.05);年龄1~3岁患儿出现紫绀K值低于非紫绀患儿,Angle值低于非紫绀患儿(P <0.05),两组R值、MA值未见差异(P> 0.05);年龄≥3岁患儿紫绀组R值、K值高于非紫绀组,Angle值低于非紫绀组(P <0.05),两组MA值未见差异(P>0.05)。年龄<1岁患儿凝血异常风险较高,非紫绀组患儿随年龄的增加,各凝血成分异常发生率趋于降低,但紫绀组患儿在1~3岁纤维蛋白原缺乏及血小板功能低下发生率升高。结论先天性心脏病患儿术后凝血异常的发生率较高,主要以血小板低下多见;低龄及紫绀也为先天性心脏病患儿术后凝血异常的高危因素,因此综合评估患儿凝血功能,对制定合理治疗策略大有裨益。

CD20和CD19双靶点CAR-T细胞对B淋巴细胞瘤的杀伤作用

目的:设计同时靶向B淋巴细胞表面CD20和CD19两个抗原蛋白的双特异嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)并制备BiCAR-T细胞,检测其对B淋巴细胞瘤细胞的杀伤作用以及对免疫缺陷B-NSG小鼠白血病模型的治疗效果。方法:构建基于鼠源CD19和人源化CD20 scFv的双靶点CAR分子,将CAR基因装载于慢病毒载体中,在293T细胞中包装慢病毒,感染健康人T细胞制备BiCAR-T细胞。构建表达CD19和CD20的K562-CD19-GFP、K562-CD20-GFP以及表达Luciferase的Nalm6-Luc-GFP细胞作为靶细胞,将BiCAR-T细胞与靶细胞共同孵育,检测其对靶细胞杀伤能力及释放IFN-γ水平。使用Nalm6-Luc-GFP细胞构建白血病小鼠模型,尾静脉注射BiCAR-T细胞,通过小动物成像方法观察BiCAR-T细胞对荷瘤小鼠的治疗作用。结果:健康人来源的BiCAR-T细胞经7 d培养后扩增良好,扩增倍数为20~50倍,阳性率为10%~92%,显示成功制备BiCAR-T细胞。在效靶比为10∶1时,BiCAR-T细胞对Nalm-6、K562-CD19-GFP和K562-CD20-GFP的杀伤率显著高于对照组细胞[(76.7±7.4)%vs(8.7±2.4)%、(93.3±5.2)%vs(46.7±6.2)、(51.0±0.8)vs(30.7±0.5)%,均P<0.01];与对照组相比,与Nalm-6细胞共孵育后BiCAR-T细胞分泌IFN-γ量显著增加[(872.7±7.7)vs(101.0±5.3)pg/ml,P<0.01]。动物实验表明,BiCAR-T细胞对B-NSG小鼠白血病模型治疗效果明显,注射BiCAR-T细胞后白血病细胞逐渐减少,第50天时基本消失,小鼠全部存活至第70天被安乐死;PBS和对照T细胞组小鼠分别在(19±3)和(20±1)d全部死亡。结论:成功设计了表达CD19和CD20的双靶点CAR分子后成功制备了BiCAR-T细胞,该细胞能够有效杀伤表达CD19和/或CD20的B淋巴细胞瘤细胞,与靶细胞共同孵育后能够分泌大量IFN-γ,对B-NSG免疫缺陷小鼠白血病模型具有明显的治疗效果。

D二聚体、降钙素对新生儿呼吸窘迫综合并发呼吸机相关性肺预后评估的价值

目的探讨二聚体(D-D)、降钙素(PCT)对新生儿呼吸窘迫综(RDS)合并发呼吸机相关性肺(VAP)预后评估的价值。方法以100例RDS患儿为对象,根据患者VAP发生情况将患者分为VAP组(n=20)和非VAP组(n=80)。检测D-D、PCT水平,记录VAP患儿预后情况,分析二者与VAP患儿预后的关系。结果 VAP组D-D、PCT水平高于非VAP组(P<0.05)。低危组、中危组、高危组之间亦有差距。20例VAP患者中生存15例(75.00%),死亡5例(25.00%)。死亡组D-D、PCT水平高于生存组(P<0.05)。结论 RDS并发VAP患儿D-D、PCT水平升高,检测二者水平可评估患儿的严重程度及预后情况。

利伐沙班在脾切除联合贲门周围血管离断术后门静脉血栓预防中的疗效

目的:探讨利伐沙班在脾切除联合贲门周围血管离断术后门静脉血栓(PVT)治疗中的疗效。方法:回顾性分析2019年6月1日至2022年6月1日解放军总医院第五医学中心行脾切除联合贲门周围血管离断的37例肝硬化伴PVT患者临床资料。其中男10例,女27例;平均年龄(52±4)岁。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。其中乙型病毒性肝炎肝硬化27例,自身免疫性肝硬化8例,酒精性肝硬化2例。术前存在PVT合并消化道出血12例,单纯上消化道出血25例。37例患者术后第1~3 d应用低分子量肝素钙治疗,随后改为利伐沙班口服,根据用药反应及凝血酶原活动度,调整利伐沙班用量。术后3~5 d常规行彩超或上腹部增强CT检查,判断PVT变化;术后1个月复查增强CT评估临床效果。结果:术后1周复查显示新发PVT发生率38%(14/37),其中Ⅰ级8例,Ⅱ级3例,Ⅲ级2例,Ⅳ级1例。其中合并术前陈旧性PVT患者新发PVT发生率约58%(7/12),其中3例新发PVT完全溶解,3例新发PVT部分溶解,1例门静脉海绵样变,术后出现Ⅳ级PVT,经溶栓+经颈内静脉门静脉取栓均失败,继续口服利伐沙班。术前合并陈旧血栓者,血栓未见溶解考虑血栓机化;单纯上消化道出血患者PVT发生率28%(7/25),其中4例新发PVT完全溶解,其余3例新发PVT部分溶解。术后使用利伐沙班后牙龈及皮下出血6例,利伐沙班减量后出血停止。所有患者PVT溶解后继续口服利伐沙班6个月。结论:脾切除联合贲门周围血管离断术后应用利伐沙班预防术后新发门静脉血栓安全、有效,可使脾切除联合贲门周围血管离断术后患者获益。

安络化纤丸联合恩替卡韦治疗可显著提高慢性乙型肝炎病毒感染者肝纤维化的改善率

目的探索慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者接受恩替卡韦单独或联合安络化纤丸治疗78周对肝纤维化的改善作用。方法慢性HBV感染者随机接受恩替卡韦单独或联合安络化纤丸治疗78周,肝穿刺标本采用Ishakscore盲态判读。比较患者治疗前后的肝纤维化改善情况。对计量资料采用Student'st检验、非参数检验(Mann-WhitneyU-Test及Kruskal-Wallis检验)方法分析;计数资料采用Chi-squared检验方法分析;Spearman分级检验法分析双变量相关性。结果治疗78周后肝纤维化改善率为36.53%(80/219)、进展率为23.29%(51/219)。肝纤维化改善与基线纤维化程度和治疗方法相关(P<0.05)。在安络化纤丸联合恩替卡韦治疗且基线肝纤维化评分(F)≥3的患者中,肝纤维改善率(54.74%,52/95)显著高于仅接受恩替卡韦治疗者(33.33%,16/48),P=0.016;联合治疗组肝纤维化进展比例(13.68%,13/95)在数值上低于单独治疗组(18.75%,9/48),P=0.466。在基线F<3的患者中,联合治疗组肝纤维化改善和稳定的患者比例(68.08%,32/47)高于单独治疗组(51.72%,15/29)。结论安络化纤丸联合恩替卡韦治疗可显著提高慢性HBV感染者肝纤维化的改善率,并有提高肝纤维化稳定率和降低进展率的趋势。