野战(应急)快速检验系统A型与常规实验室血细胞分析仪检测结果比对分析

目的:比较野战(应急)快速检验系统A型中的血细胞分析模块与常规实验室血细胞分析仪的检测结果,分析二者的可比性。方法:利用野战(应急)快速检验系统A型的血细胞分析模块(QBC STAR)和SYSMEX(XE2100)血细胞分析仪对200例血常规标本进行平行检测,并对其检测结果进行比较分析。结果:血细胞分析模块(QBC STAR)测定红细胞比容(HCT)、血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)和血小板(PLT),其结果分别为40.05%±5.95%,(134.81±21.5)g/L,(8.44±2.61)×109/L,(255.64±71.68)×109/L;XE2100测定HCT,HGB,WBC,PLT结果分别为37.68%±5.43%,(129.46±20.16)g/L,(7.22±2.19)×109/L,(226.35±67.40)×109/L;两种仪器测定的相关系数分别为0.981、0.986、0.962、0.977,其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:野战(应急)快速检验系统A型中的血细胞分析模块与常规实验室血细胞分析仪检测结果无显著性差异,一致性良好。

野战(应急)快速检验系统生化分析模块性能的综合评价

目的:对北京倍肯公司研发的野战(应急)快速检验系统生化分析模块(SP4430)基本性能进行综合评价。方法:对野战(应急)快速检验系统生化分析模块分别在室内环境与模拟野战环境下进行精密度评价,并对其在两种不同环境下的检测结果进行对比;对野战(应急)快速检验系统生化分析模块与日本OLYMPUS AU5421全自动生化分析仪所测定结果进行比较,分析二者之间有无差异。结果:生化分析模块GLU、UA、ALB、REA、ALT、TBIL、LDH、AMS在室内的CV(%)分别为2.08、2.89、1.56、2.38、4.10、2.36、3.19、6.33;在模拟野战环境下的CV(%)分别为2.31、3.12、2.11、2.32、4.80、2.57、4.51、7.14;GLU(mmol/L)、UA(umol/L)、ALB(g/L)、CREA(umol/L)、ALT(U/L)、TBIL(umol/L)、LDH(U/L)、AMS(U/L)在室内结果分别为5.91±2.03、269.50±111.50、35.89±7.55、94.08±22.150、42.71±27.62、10.30±5.75、173.60±59.99、67.45±25.06,在模拟野战环境下的结果分别为6.33±2.31、273.38±120.56、34.90±6.99、94.85±23.15、37.73±24.64、10.18±5.71、170.43±61.74、68.02±25.14;所有项目室内与模拟野战环境的检测结果采用配对t检验比较,P值均>0.05;结果表明生化分析模块与OLYMPUS AU5421所测GLU、UA、ALB结果差异无统计学意义(P>0.05),而CREA、ALT、TBIL、LDH、AMS所测结果差异有统计学意义(P<0.01)。两种仪器所有检测结果的相关系数均>0.90。结论:在室内、模拟野战环境下,野战(应急)快速检验系统生化分析模块精密度良好,结果比较无显著差异;生化分析模块与实验室常规生化分析仪检测结果相关性良好,由于检测方法不同,部分结果差异较大,但仍然具有可比性。

野战(应急)快速检验系统尿液分析模块性能的综合评价

目的:综合评价野战(应急)快速检验系统尿液分析模块(PU4010)的性能。方法:对野战(应急)快速检验系统的尿液分析模块分别在室内环境与模拟野战环境下进行精密度评价、并对其在2种不同环境下的检测结果进行对比;利用尿液分析模块和迪瑞H-800尿液分析仪对200例尿液标本进行平行检测,分析二者的可比性。结果:尿液分析模块所有项目测定值与靶值的符合率均为100%。尿液分析模块环境对比实验URO,GLU、PRO、BIL、BLD、LEU、PH、SG、KET的Kappa值分别为0.66、0.94、0.91、0.94、0.93、0.92、0.81、0.76、1;尿液分析模块和迪瑞H-800尿液分析仪测定其各项结果的阳性率基本一致,完全符合率均为80%以上,其各项环境对比实验Kappa值均>0.7,二者无显著性差异。结论:在室内和模拟野战环境下,野战(应急)快速检验系统尿液分析模块精密度良好;与常规实验室尿液分析仪的检测结果无显著性差异,检测结果的一致性良好。

野战(应急)快速检验系统血细胞分析模块性能的综合评价

目的:对野战(应急)快速检验系统血细胞分析模块性能进行评价。方法:对该模块在室内环境与模拟野战环境下进行精密度评价,并对两种环境下的评价结果进行对比;利用该模块和Sysmex XE-2100血细胞分析仪对200例标本进行平行检测,分析其可比性。结果:该模块测定红细胞比容(HCT)、血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)和血小板(PLT)的变异系数(CV)值在室内环境中分别为0.24%、0.23%、1.40%、2.94%,在模拟野战环境下分别为1.29%、1.53%、2.25%、1.95%;两种环境结果比较其差异无统计学意义(t=0.380,t=0.206,t=1.935,t=1.329;P>0.05)。两台仪器HCT,Hb,WBC,PLT的相关性系数分别为0.981、0.986、0.962、0.977。结论:在室内和模拟野战环境下,野战(应急)快速检验系统血细胞分析模块精密度良好,结果对比无显著差异;该模块与常规血细胞分析仪检测结果无显著性差异,且一致性良好。

低丙种球蛋白血症伴粒细胞缺乏症1例实验室诊断分析

1临床资料患者，男，3岁。主因咳嗽、发热多日入院。既往史：患者为第1胎，第1产，足月顺产，母乳喂养，智力、运动发育同正常同龄儿。患儿自半岁（6月）起反复发病，先后多次于我院及河北省儿童医院住院治疗，诊断“扁桃体脓肿、重症肺炎、麻疹、

重组融合蛋白早期快速诊断侵袭性念珠菌病的实验研究

目的建立一种IC早期快速准确的诊断方法。方法 178例临床需要送检侵袭性念珠菌病常规检测和真菌培养的患者血清为研究对象,其中103例确诊为侵袭性念珠菌病者作为病例组,75例为在同样免疫妥协易感人群但无念珠菌感染微生物学证据的患者血清作为对照组。应用基因重组的方法,将念珠菌菌丝壁蛋白(HWP1),与位于细胞壁的糖酵解酶(烯醇化酶蛋白ENO1)进行基因克隆,随后将由HWP1与ENO1组成的重组蛋白在大肠杆菌中表达,并建立酶联免疫方法(ELISA),检测患者血清中的Ig G特异性抗体。通过统计学的分析,计算出该方法的灵敏度,特异性,阳性预测值,阴性预测值。筛选出灵敏度高,特异性强,阳性预测值和阴性预测值均高的融合蛋白抗原建立的ELISA方法。结果病例组中抗-ENO1、抗-HWP1以及二者联合检测的阳性检出率均显著高于对照组(P<0.01),差异有统计学意义。抗-HWP1与抗-ENO1两方法相比,抗-HWP1的敏感性(χ2=37.622,P<0.01)、阳预测值(χ2=74.427,P<0.01)及阴性预测值(χ2=2.057,P=0.152)均显著高于抗-ENO1;联合检测与抗-ENO1比较,敏感性(χ2=44.524,P<0.01)、特异性(χ2=9.765,P=0.002)及阳预测值(χ2=72.000,P<0.01)均显著高于抗-ENO1;联合检测与抗-HWP1相比,特异性(χ2=4.700,P=0.030)、阴性预测值(χ2=3.191,P=0.074)显著高于抗-HWP1。结论 ENO1和HWP1蛋白重组后联合诊断的效果更佳,可以作为IC早期快速准确的诊断方法。

TIM-3介导免疫平衡失调与支气管哮喘发病的意义及机制研究

目的：探讨TIM-3介导免疫平衡失调与支气管哮喘发病的意义及机制。方法：选取2013年1月~2014年6月在本院呼吸科就诊并诊断为支气管哮喘患者及正常健康人设为实验组和对照组,各50例,收集外周血,流式细胞仪检测两组人群外周血中辅助性T细胞17（T helper 17,Th17）及调节性T细胞（regulatory T cell,Treg细胞）比例,并检测TIM-3表达改变,分析其与支气管哮喘发病的相关性;并阻断TIM-3表达,观察其对Th17及Treg细胞的影响。结果：Tim-3抑制前,实验组患者Th17、Treg细胞比例以及Th17/treg值均高于对照组患者,差异有统计学意义（P〈0.01）;Tim-3抑制后,实验组患者Th17细胞比例和Th17/treg值仍高于对照组患者,差异有统计学意义（P〈0.01）,而Treg细胞比例和对照组无显著差别（P〉0.01）;Tim-3抑制前后,实验组患者Th17、Treg细胞比例以及Th17/treg值均有显著变化,差异有统计学意义（P〈0.01）。相关性分析的结果表明外周血中Th17细胞比例同Treg细胞为负相关关系（r=-0.436,P〈0.05）。实验组及对照组患者外周血中CD4＋Tim3＋细胞占CD4＋细胞比例分别是（5.22±0.95）%和（2.20±0.41）%,实验组显著高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.01）。对照组患者Th17细胞有少量Tim-3[（0.18±0.05）%]表达,实验组患者外周血中Th17细胞基本无Tim-3表达,两组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：哮喘患者外周血中Th17细胞和Treg细胞比例失衡,可能为哮喘发生的重要诱导因素,Tim-3抑制后,实验组患者Th17细胞和Treg细胞比例有显著变化,暗示Tim-3的表达对这两种细胞数量有明显的调控作用。此外支气管哮喘患者外周血T淋巴细胞中TIM-3表达有显著增高。

异常妊娠孕妇血清亮氨酸氨基肽酶活性检测的价值

目的探讨孕妇血清亮氨酸氨基肽酶（LAP）检测在异常妊娠中的临床价值。方法分别检测早期妊娠（4-13周,其中宫外孕34例、正常妊娠34例）、中期妊娠（13-28周,其中先兆流产32例、正常妊娠51例）、晚期妊娠（28-41周,其中子痫前期39例、肝内胆汁淤积症30例、多胎妊娠30例、正常妊娠54例）妇女血清LAP、碱性磷酸酶（ALP）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性并做比较。结果早期妊娠中宫外孕组LAP活性明显低于正常妊娠组（P〈0.05）,ALP和ALT活性2组间差异无统计学意义（P〉0.05）。中期妊娠中先兆流产组血清LAP、ALP、ALT与正常妊娠组比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。晚期妊娠中子痫前期组LAP活性虽高于正常妊娠组,但差异无统计学意义（P〉0.05）,而肝内胆汁淤积症组和多胎妊娠组LAP、ALP和ALT活性均明显高于正常妊娠组（P〈0.05）。结论连续测定LAP活性可监测妊娠过程中有无异常,对监测胎盘功能及妊娠并发症具有一定的意义。

白念珠菌磷酸甘油酸激酶1的原核表达及免疫原性分析

目的构建白念珠菌基因磷酸甘油酸激酶1(PGK-1)基因的原核表达质粒并诱导其表达,对其免疫原性进行分析。方法 PCR法获取白念珠菌SC5314的PGK-1基因,插入原核表达载体pET30a中,以重组质粒转染感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE检测蛋白的表达情况,并用Western blot法验证。用纯化获取的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA对蛋白的免疫原性进行评价。结果成功构建原核表达质粒pET-30a-pgk-1,诱导后表达的重组蛋白相对分子质量(M r)约为54 810。ELISA检测抗体效价约为1∶1 024。结论成功获得白念珠菌PGK-1重组蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性。

心理应激与免疫功能关系的研究现状

应激是机体在内外环境、社会、心理等因素刺激时所发生的一种非特异性、适应性反应,应激能够影响动物和人体的免疫功能,进而导致许多传染性疾病、肿瘤及其他恶性疾病的发生。当今社会人们长期面临着工作节奏加快、竞争日益激烈、生活压力逐渐增大等因素的影响,心理应激越来越受到各国学者的重视,其与疾病发生、发展及治疗的关系已成为当今医学研究的热点。该文就近年来心理应激与免疫功能变化的研究现状进行综述。

血清降钙素原检测在菌血症早期诊断中的临床应用研究

目的探讨血清降钙素原(procalcitonin,PCT)检测在菌血症早期诊断中的临床应用价值。方法采用回顾性研究,以同时进行血液培养、PCT检测、全血超敏C反应蛋白(hs-CRP)及中性粒细胞(NEU)计数的496例患者为研究对象,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)比较PCT、全血hs-CRP及NEU诊断菌血症及区分革兰阴性菌和革兰阳性菌菌血症的临床应用价值。结果 PCT、全血hs-CRP、NEU诊断菌血症感染的ROC曲线下面积分别为0.888、0.646、0.585,PCT诊断菌血症的最佳诊断临界值(optimal operating point,OOP)为0.265 ng/ml。以血培养作为金标准,PCT诊断菌血症的灵敏度、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)分别为83.9%、77.6%、81.0%、80.9%。PCT区分革兰阴性菌和革兰阳性菌菌血症的ROC曲线下面积为0.727,PCT诊断革兰阴性菌导致菌血症的OOP为0.485 ng/ml。以血培养作为金标准,PCT诊断革兰阴性菌导致菌血症的灵敏度、特异性、PPV、NPV分别为86.2%、76.9%、80.6%、83.3%。结论 PCT可作为早期诊断菌血症的实验室指标,并可区分革兰阴性菌和革兰阳性菌导致的菌血症,有助于早期诊断和治疗,降低菌血症的死亡率。

检测抗白色念珠菌烯醇化酶IgG抗体免疫胶体金层析试纸的制备

目的建立一种快速检测抗白色念珠菌烯醇化酶IgG抗体的免疫胶体金层析试纸法。方法以重组烯醇化酶包被于硝酸纤维素膜上,与金标垫上包被的金标小鼠抗人IgG单克隆抗体配对,优化试纸制备条件并制备试纸条,检测人血清中的抗念珠菌烯醇化酶IgG抗体。用该方法对38例确证念珠菌血流感染者和50例健康体检者血清进行检测,分析其检测效能。结果用直径30 nm金颗粒制备的烯醇化酶IgG抗体检测试纸条,最适烯醇化酶包被浓度为1. 0 mg/ml。该试纸用于检测多种念珠菌引起的血流感染中的抗烯醇化酶IgG抗体,检测灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为71. 1%,96. 0%,93. 1%和83. 4%。结论用重组白色念珠菌烯醇化酶制备的免疫胶体金层析试纸条有较好的检测效能,具有准确、快速、方便的优点,可用于人血清抗念珠菌IgG抗体的检测。

降钙素原的临床应用进展

降钙素原(procalcitonin,PCT)是降钙素(CT,32AA)的前肽,在严重细菌、真菌、寄生虫感染及脓毒症、多脏器功能衰竭时其血浆水平常升高,可反映全身炎症反应的活跃程度。PCT对细菌感染和脓毒症具有早期诊断价值,对细菌感染和非细菌感染具有鉴别诊断作用,对于鉴别革兰阳性菌和革兰阴性菌也有一定的作用。此外,PCT亦是诊断脓毒症的特异指标,并可监测脓毒症的治疗效果及预后,动态监测PCT浓度可及早有针对性选用抗生素或调整治疗方案,对提高危重患者的抢救成功率有重要意义。

石家庄地区急性中毒5000例流行病学分析

目的了解石家庄地区急性中毒流行病学特点。方法采用气相色谱法对5209例血液、尿液、呕吐物标本进行检测。结果检出毒物阳性标本5000例,阳性率为96.0%;毒物种类以农药为主（48.3%）,其次为药物（27.1%）、乙醇（8.5%）、鼠药（5.5%）、一氧化碳（4.0%）。男女比例为1∶2.1。急性中毒患者中20～岁占42.6%,40～岁占31.8%。有意中毒占91.2%,中毒途径以消化道为主（86.4%）。结论毒物检测可及时明确中毒病因,为临床诊断和及时救治急性中毒提供依据。

军事应激与入伍新兵胃部幽门螺杆菌感染的关系研究

目的探讨新兵入伍军事训练前后胃部幽门螺杆菌(HP)感染情况。方法抽取某部新兵集训基地参加入伍军事训练的新兵60名,分别在军训前和军训后对其进行症状自评量表(SCL-90)问卷调查、血清皮质醇(COR)检测、HP抗体检测和14C呼气试验。结果入伍新兵军训前SCL-90总均分及各因子分与中国常模比较差异无统计学意义(P>0.05),军训后SCL-90总均分以及躯体化、抑郁、偏执因子分较中国常模升高(P<0.05)。军训后血清COR水平和14C呼气试验值均较军训前升高(P<0.05),军训前后HP阳性率无明显变化(P>0.05)。结论军事应激可致入伍新兵胃部HP定植量增加,感染加重。

自身免疫性疾病患者血清抗白念珠菌烯醇化酶IgG型抗体的检测和分析

目的检测自身免疫性疾病患者血清中抗白念珠菌烯醇化酶(Eno)IgG型抗体表达情况。方法以重组白念珠菌Eno为包被抗原,建立ELISA检测方法并对反应条件优化,检测健康献血员对照组和自身免疫性疾病患者血清中抗白念珠菌Eno IgG型抗体。用Western blot法验证部分Eno抗体阳性血清的准确性。结果共检测自身免疫性疾病患者血清70份,其中抗白念珠菌Eno IgG型抗体阳性血清19份,总体阳性率为27.14%(19/70)。与对照组相比,自身免疫性疾病患者白念珠菌Eno IgG型抗体阳性率明显升高。其中,类风湿性关节炎患者白念珠菌Eno IgG型抗体阳性率为11.8%(2/17)、红斑狼疮患者阳性率为45.8%(11/24)。部分血清反应特异性得到Western blot验证。结论自身免疫性疾病患者血清抗白念珠菌Eno IgG型抗体阳性率较高,可能对白念珠菌Eno IgG型抗体应用于侵袭性念珠菌病诊断有干扰。

流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌方法的建立和应用

目的建立全血白细胞吞噬白念珠菌的流式细胞术检测方法。方法绘制白念珠菌生长曲线后,取生长对数中期的白念珠菌,以活体细胞示踪荧光探针二乙酰羧基荧光黄琥珀酰亚胺酯（CFDA-SE）标记,与以PC5标记的CD45单克隆抗体预标记的全血白细胞,在37℃分别反应10、30、60min（MOI≈10∶1）,以流式细胞术观察CD45阳性细胞对白念珠菌的吞噬情况。结果白念珠菌在液体酵母浸出粉胨葡萄糖培养基（YPD）中37℃、50mL/LCO2培养,第5~11h为对数生长期。10mmol/LCFDA-SE染色30min,可使白念珠菌均匀着色;CD45阳性细胞和标记的白念珠菌作用10、30、60min,CD45阳性细胞中中性粒细胞的吞噬率分别为（80.1±6.1）%、（83.8±7.7）%和（92.3±11.2）%;单核细胞的吞噬率为（11.2±3.6）%、（15.8±4.4）%和（27.7±6.8）%,淋巴细胞作为无明显吞噬作用内参,其吞噬率为（0.9±0.3）%、（0.8±0.4）%和（5.2±1.6）%。结论成功建立流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌的方法,全血白细胞与白念珠菌共孵育30min是较为合适的作用时间。

血清降钙素原检测在呼吸道感染患者临床诊断中的应用

目的探讨血清降钙素原(procalcitonin,PCT)在呼吸道感染患者临床诊断中的应用价值。方法对2013年6月—2015年6月解放军白求恩国际和平医院收治的呼吸道感染414例的血清PCT检测结果结合痰培养及9项呼吸道病原体Ig M抗体联合检测结果进行分析。结果 414例呼吸道感染中PCT检测阳性132例(31.88%)。痰培养阳性225例(54.35%),其中单纯细菌阳性160例(单纯革兰阳性菌11例,单纯革兰阴性菌96例,2种及以上细菌阳性53例),单纯假丝酵母菌阳性44例,假丝酵母菌合并细菌阳性21例。痰培养无病菌生长的189例9项呼吸道病原体Ig M抗体检测阳性66例(34.92%),全阴性123例(65.08%)。痰培养及9项呼吸道病原体Ig M抗体联合检测不同结果间PCT中位数及其阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。痰培养无病菌生长且9项呼吸道病原体Ig M检测全阴性与痰培养单纯革兰阴性菌阳性、2种及以上细菌阳性、假丝酵母菌合并细菌阳性PCT中位数及其阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。痰培养无病菌生长而9项呼吸道病原体Ig M抗体检测阳性与痰培养单纯革兰阴性菌阳性、2种及以上细菌阳性的PCT中位数及其阳性率比较差异亦均有统计学意义(P<0.05)。414例呼吸道感染中PCT阳性患者病死率(15.15%)明显高于PCT阴性患者病死率(3.55%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清PCT检测联合痰培养及9项呼吸道病原体Ig M抗体检测对诊断和鉴别诊断呼吸道感染具有重要的参考价值。血清PCT检测可作为快速排除和诊断细菌性呼吸道感染的重要手段。

α1-酸性糖蛋白、触珠蛋白、铜蓝蛋白评价炎性状态及与C反应蛋白相关性分析

机体炎性状态评估是临床检验诊断重要的分析内容,对自身免疫性和感染性等疾病的诊断、治疗和病情监测具有重要意义。当前,对血清一些急性期蛋白（acute-phase protein,APP）水平进行测定用于监测炎性状态已经在临床得到广泛的开展,最为常用的指标为C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）[1]。

白念珠菌烯醇化酶1的原核表达及多克隆抗体制备

目的构建白念珠菌烯醇化酶1(eno1)基因的原核表达质粒并诱导其表达,制备其多克隆抗体。方法聚合酶链反应(PCR)获取白念珠菌SC5314的eno1全长基因,克隆入原核表达载体p ET30(a),转化感受态细胞E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后以亲和层析纯化重组蛋白并以SDS-PAGE和蛋白免疫印迹(Western blot)法鉴定。用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备Eno多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体效价,Western blot法鉴定其特异性。结果成功构建原核表达质粒p ET30(a)-eno1,诱导后表达的重组蛋白相对分子质量约为50 000,主要以可溶性上清形式存在。纯化制备的eno1多克隆抗体效价约为1︰12 800 000,可与重组Eno反应。结论成功获得白念珠菌eno1重组蛋白并制备了该蛋白的多克隆抗体。