HBV S基因变异与临床疾病的关系

目的探讨泉州地区乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染者HBVS基因变异与临床疾病的关系。方法采用PCR产物直接测序技术对43例慢性HBV感染者的HBVS区进行序列测定及分析。结果 43例慢性HBV感染者中共检出基因B型29例(29/43,67.44%),C型14例(14/43,32.56%);血清学分型adw型28例(28/43,65.12%),adr型14例(14/43,32.56%),ayw型1例(1/43,0.02%)。43例慢性HBV感染者共检出HBsAg氨基酸(aa)变异位点32个,较常见的aa变异位点为sY200F、sM213I、sI126T和sF85C,这些变异位点多见于肝功能衰竭患者。HBV主要亲水区(MHR)共检出aa变异19例(19/43,44.19%),aa替换位点12个。MHR区最常见的变异位点为aa126(7/23,30.43%),其次为aa140(3/23,13.04%)。基因B型患者中sT126I/A变异2例(2/29,6.90%),基因C型患者中sI126T变异5例(5/14,35.71%),基因C型患者中aa126变异率显著高于基因B型(χ2=5.753,P<0.05)。肝功能衰竭患者aa126变异率为26.67%(4/15),高于慢性乙型肝炎患者10.71%(3/28),但差异无统计学意义(χ2=1.824,P>0.05)。肝功能衰竭患者HBVS基因变异率在"a"决定簇上显著高于慢性乙型肝炎(χ2=4.268,P<0.05)。结论泉州地区HBV基因型(血清型)以B型(adw)为主,其次为C型(adr)。部分HBVS区基因变异与HBV基因型的异质性有关,可能与严重肝病有一定的相关性。

血清高尔基体蛋白73与慢性乙型肝炎病毒感染者肝脏炎症损伤的相关性

目的探讨慢性HBV感染者高尔基体蛋白73(GP73)水平与肝脏炎症损伤的相关性。方法收集慢性HBV感染者573例,其中慢性乙型肝炎(CHB)轻度患者107例、中度患者191例和重度患者132例,HBV相关的慢加急性和慢加亚急性肝功能衰竭(ACLF)患者50例和失代偿期乙型肝炎肝硬化(HLC)患者93例。采用ELISA法检测血清GP73,采用免疫组织化学技术检测肝组织GP73表达,并对血清GP73水平与慢性HBV感染者疾病进展的相关性进行分析。结果血清GP73水平在轻度CHB、中度CHB、重度CHB、HLC和ACLF中持续升高,分别为(71.54±39.48)ng/ml、(143.70±70.16)ng/ml、(218.20±79.34)ng/ml、(244.67±83.36)ng/ml和(275.61±104.05)ng/ml,各组血清GP73水平差异均有统计学意义(P均<0.05)。血清GP73水平与慢性HBV感染者病情进展呈正相关关系(r=0.723,P<0.0001)。HBe Ag阳性与HBe Ag阴性CHB患者比较,血清GP73水平差异无统计学意义(t=1.966,P>0.05)。在不同血清HBV DNA含量之间比较,患者血清GP73水平差异无统计学意义(F=1.220,P>0.05)。血清GP73水平随着血清白蛋白(ALB)含量的下降而逐渐升高,随着血清总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量的升高而逐渐升高,血清GP73水平与ALB(r=-0.573,P<0.0001)含量呈负相关关系,与TBil(r=0.623,P<0.0001)、ALT(r=0.521,P<0.0001)以及AST(r=0.542,P<0.0001)含量均呈正相关关系。免疫组织化学染色分析结果显示,GP73主要在肝细胞浆内表达,在肝组织内浸润的炎症细胞和纤维隔中无表达。肝组织GP73表达随着病情从轻度、中度、重度CHB到HLC的进展逐渐增强,与轻度CHB对比,重度CHB和HLC患者肝组织GP73呈强阳性表达。结论血清GP73水平与慢性HBV感染者肝脏炎症损伤密切相关,与HBV复制水平无关。血清GP73可作为评估肝脏炎症损伤的一个重要标志。

核苷(酸)类药物引起HBV基因突变的危险因素与模式分析

目的分析应用核苷(酸)类药物(NA)治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者耐药基因突变发生的危险因素和突变模式。方法选取本院经NA治疗的209例CHB患者,采用直接测序法检测患者血清标本中的HBV基因分型及耐药位点,并对结果进行分析,对可能影响HBV逆转录酶(RT)区耐药基因突变的危险因素,包括年龄、性别、基因型、HBe Ag状态、HBV DNA水平、HBs Ag阳性时间、家族史、病期、核苷(酸)类药物选择以及用药时间等进行统计分析,筛选出独立危险因素。结果年龄、基因型、NA药物选择及用药时间与HBV RT区耐药基因突变发生相关。209例患者测序结果中86例发现有耐药基因突变,突变率为41.15%,B型和C型基因患者耐药突变率分别33.67%和47.75%,差异具有统计学意义(χ2=4.25,P<0.05),但Logistic回归分析表明基因型不是HBV耐药基因突变发生的独立危险因素。HBV RT区突变以rt M204V/I(79.1%)、rt A181V/T/A/S(19.8%)和rt N236T(11.6%)突变株为主,rt M204V位点变异大多伴随了rt L180M突变。结论年龄大于45岁、曾使用LAM或LDT进行长时间治疗的CHB人群更容易导致HBV突变的发生,在使用NA治疗慢性乙型肝炎患者过程中,出现的变异模式复杂多样,应及时监测患者耐药基因以指导临床用药。