癫痫持续状态后大鼠海马大麻素受体1随时间演变规律

目的 探讨CB1R（大麻素受体1）在癫痫持续状态模型大鼠海马中随时间的演变规律.方法 采用海人酸（KA）腹腔注射诱导大鼠癫痫持续状态模型,并于癫痫持续状态30 min后终止发作,在终止发作后的4h、1d、1周、1个月、2个月,行免疫组化和Western印迹方法检测CB 1R的变化情况.结果 KA组大鼠在癫痫持续状态后CB1R在海马CA1区的平均吸光度（IA）呈先升高后降低的趋势,且在1周之内CB1R逐渐升高,1周后CB1R逐渐降低,且在4h、1d、1周与NS组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）（KA组比NS组：5.5±1.1比1.8±0.2、6.4±3.7比3.1±0.7、16.9±10.4比3.7±1.7、8.8±5.4比6.9±4.0、3.2±1.0比4.4±1.9）,CA3区及DG区的IA变化规律与CA1区一致,KA组和NS组大鼠海马三个区CB1R表达至1个月、2个月时差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 CB1R在癫痫持续状态后的大鼠海马中呈现保护性的升高之后恢复至正常水平,表明CB1R与癫痫的发生和终止存在一定的关系.

黄热病毒特异性抗原片段的筛选与鉴定

目的通过系统的生物信息学分析和实验验证,筛选黄热病毒的特异抗原片段,为免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法分别利用DNAStar及ANTHEPROT软件对黄热病毒蛋白进行分析,参考亲水性、抗原性、可塑性、表面可及性及二级结构信息,对黄热病毒可能的共有及特异性抗原表位进行系统的预测分析,分析其在不同毒株中的保守性,并对预测得分值较高的抗原区域进行RT-PCR扩增,利用pMal-c2x原核表达系统进行原核表达,Western blot验证其免疫学反应原性,检测阳性抗原片段经亲和纯化后,包被ELISA微孔板,进一步验证其免疫学反应特异性及检测敏感性。结果其中27段抗原片段获高效表达,经Western blot筛选及ELISA进一步验证,原核表达抗原片段YFV22表现良好特异抗,可检测低至1∶12 800倍稀释的黄热病毒多克隆抗体,与所试其他参考病毒多克隆抗体无交叉反应。结论经系统筛选、验证,获黄热病毒特异性抗原片段1段,为其免疫学诊断试剂的研制奠定了基础。