创伤后内毒素增敏效应在多器官损害中的作用

目的：探讨内毒素增敏系统——脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）和脂多糖受体（ＣＤ１４）在严重创伤后内毒素血症诱发多器官损害中的作用及其分子机制。方法：采用低血容量创伤性休克、重度低血容量性休克、肠缺血再灌注损伤、３５％Ⅲ度烫伤等动物模型，从不同层次观察ＬＢＰ／ＣＤ１４系统的变化规律及其与多器官损害的关系。同时，结合多发伤、大面积烧伤等临床病例进行前瞻性研究。结果：急性烫伤和休克的打击可导致内毒素易位，并明显上调机体主要脏器ＬＢＰ／ＣＤ１４ｍＲＮＡ的广泛表达，腹腔巨噬细胞ＣＤ１４ｍＲＮＡ表达亦显著增强（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。早期拮抗肠源性内毒素易位，可明显抑制ＬＢＰ／ＣＤ１４ｍＲＮＡ表达上调和减轻机体病理生理异常改变。临床资料显示，多发伤、休克早期血浆ＬＢＰ水平即迅速升高；严重烧伤后第７日患者血清可溶性ＣＤ１４含量亦明显上升，其中以出现多器官损害者改变尤为显著（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论：肠源性内毒素经上调的ＬＢＰ／ＣＤ１４系统介导刺激机体产生细胞因子等炎性介质。

创伤后内毒素血症与脏器损害关系及其防治新方法的系列研究

目的：从不同的作用环节采用多种干预手段以阻断肠源性内毒素血症的发生，观察其对机体炎症反应、免疫反应、脏器损害和预后的影响。方法：采用多种动物分别建立了不同致伤方式诱发脓毒症及多脏器功能失常综合征（MODS）的模型；并结合临床病例进行前瞻性研究。结果：分别应用杀菌-通透性增加蛋白、抗核心脂多糖（LPS）单抗及Re型LPS抗血清、低剂量多粘菌素B、选择性消化道脱污染及抗肿瘤坏死因子（TNF）单抗等措施，可显著中和循环内毒素，能有效地减轻肝、肺、肾及肠道等器官损害和明显提高动物存活率；并且抗内毒素可不同程度地抑制循环和组织中细胞因子mRNA及蛋白质的表达和改善机体细胞免疫功能；临床观察显示，大面积烧伤和创伤患者24小时内血浆内毒素含量显著升高，其升高程度与血浆TNF呈正相关，这一趋势以并发脓毒症、MODS者尤为明显。结论：肠源性内毒素血症与脓毒症、脏器功能损害密切相关；创伤早期采取有效措施及时防止肠源性内毒素血症对创伤所致脓毒症及MODS具有一定的防护效应，动物预后明显改善；其作用机制与抑制细胞因子的基因表达、分泌及提高机体全身免疫状况有关。

创伤性脓毒症外周血中性粒细胞及组织中肿瘤坏死因子-α mRNA表达的变化

目的探讨外周血中性粒细胞及组织中肿瘤坏死因子α(TNFα)mRNA表达在创伤脓毒症中的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测盲肠结扎穿孔术(CLP)大鼠外周血中性粒细胞及组织TNFαmRNA的表达。结果CLP术后外周血中性粒细胞中TNFαmRNA表达逐渐增高,48h达峰值后开始降低,但仍明显高于正常对照组水平。组织TNFαmRNA表达的增高首先局限于创伤局部(小肠12hP<0.01,24h达峰值),然后进入血循环,再转移至敏感器官肺和肝组织中(肺24hP<0.01,48h达峰值;肝24hP<0.05,48h达峰值)。结论TNFαmRNA表达的增高在脓毒症发病机制中起重要作用。

创伤患者外周血白细胞介素-18水平与多器官功能障碍综合征严重程度的相关分析

目的 研究创伤患者白细胞介素 18(IL 18)血浆水平的变化规律 ,并评估 IL 18在创伤后脏器功能不全发生中的预警价值。方法 对从 2 0 0 1年 3月— 2 0 0 2年 9月收入院的 5 4例创伤患者进行回顾性研究 ,根据创伤严重程度 (ISS)评分把患者分成低 ISS(L ISS)和高 ISS(H ISS)两组 ,在入院 1、4、7和 14 d分别采集血标本 ,用酶联免疫吸附法 (EL ISA)测量 IL 18水平 ,根据病历对脏器功能不全的发生情况进行回顾性评价。结果 IL 18在创伤后出现明显的改变 ,在 4和 7d内达到峰值并在 14 d内逐渐下降 ,其改变与创伤严重程度有关。此外 ,发生脏器功能不全的患者血浆 IL 18水平相对较高。结论 IL 18可以作为一项创伤后脏器功能不全发生的敏感监测指标。

烫伤后金黄色葡萄球菌感染致严重脓毒症大鼠模型的建立

目的 :初步建立烫伤后金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )感染所致严重脓毒症的动物模型。方法 :雄性 Wistar大鼠行 2 0 %总体表面积 度烫伤 ,于伤后 2 4小时经腹腔注射对数生长期的金葡菌菌液 4ml/ kg(浓度为8× 10 1 2集落形成单位 / L)造成严重脓毒症。结果 :烫伤复合金葡菌攻击后 ,大鼠血浆肿瘤坏死因子 α、干扰素 γ和一氧化氮水平均显著升高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;同时反映动物肝、肾和心脏功能的血清丙氨酸转氨酶(AL T)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、肌酐 (Cr)、肌酸激酶同工酶 (CK MB)和肺组织髓过氧化物酶活性明显增加 ,而小肠组织二胺氧化酶 (DAO)活性呈持续下降趋势。相关分析显示 :动物血清 CK MB、AL T和 Cr水平分别与心、肝、肾组织中肠毒素 B (SEB)含量呈显著正相关 (分别为 r1 =0 .789,P=0 .0 11;r2 =0 .846 ,P=0 .0 0 4和r3=0 .6 70 ,P =0 .0 48) ,而小肠组织 DAO活性与血浆葡萄球菌 SEB含量呈显著负相关 (r4=0 .44 0 ,P =0 .0 17)。病理形态学检查显示 ,动物多个器官明显受损。结论 :大鼠 2 0 %总体表面积 度烫伤后合并金葡菌感染可致大鼠体内广泛炎症反应并伴有多器官损害 ,其改变符合严重脓毒症的标准与特征。

Bax和Bcl-2基因在单纯和放射复合伤口中的表达及与细胞凋亡和愈合延迟的关系

目的 :研究 Bax、Bcl 2基因在单纯和放射复合伤口愈合中的表达规律及与细胞凋亡和愈合延迟的关系。方法 :用原位末端标记法 (TU NEL )检测细胞凋亡 ,用核酸原位杂交方法检测 Bax、Bcl 2 m RNA表达并定量分析。结果 :1照射后细胞凋亡出现的频度及延续的时间明显高于单伤组 ;2伤口愈合过程中 Bax、Bcl 2表达随着细胞凋亡的增加呈规律性改变 :Bax表达明显增强 ,且与细胞凋亡发生有良好的相应关系 ;而 Bcl 2呈明显下降趋势。结论 :Bax和 Bcl

放射复合伤口中Bax和Bcl-2蛋白表达与细胞凋亡的关系研究

目的 :研究 Bax和 Bcl 2蛋白在放射复合伤口愈合中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 :用原位末端标记 (TU NEL)法检测细胞凋亡 ,用免疫组织化学方法检测 Bax、Bcl 2蛋白表达。结果 :(1)与单伤组比较 ,照射后细胞凋亡的变化具有出现较早、频度较高、消失推迟 3个显著特点 ,可能是导致辐射延迟伤口愈合的重要原因。 (2 )观察伤口愈合过程中 Bax、Bcl 2蛋白表达及其与细胞凋亡的关系 ,发现随着细胞凋亡的增加 ,Bax蛋白的表达明显增强 ,并且与细胞凋亡发生频度具有良好的相应关系。而 Bcl 2蛋白水平在细胞凋亡达高峰时呈明显下降趋势 ;当凋亡明显下降时 ,Bcl 2蛋白表达增加 ,并逐渐恢复其正常水平。结论 :Bax和 Bcl

内毒素在实验性多系统器官功能衰竭中的作用

本研究采用饲菌复合失血性休克造成家兔 MSOF 的实验模型,着重观察了血液中 LPS 水平与各器官功能损害的关系及粗糙型 LPS 免疫血清的防治作用。结果表明:内毒素血症发生于休克的初期,且贯穿于MSOF 发生、发展的整个病程;LPS 核心抗体具有较强的免疫保护作用:血浆 LPS 水平有一定的预警意义。提示细菌 LPS 在实验性 MSOF 发生中有重要作用。

抑制JAK/STAT通路对烫伤后金黄色葡萄球菌脓毒症大鼠肝损害的影响

目的 :研究 JAK激酶 /信号转导和转录激活子 (JAK/ STAT)通路对烫伤后金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )感染致严重脓毒症大鼠肝损害的影响。方法 :采用烫伤后金葡菌感染致严重脓毒症的大鼠模型 ,6 0只动物随机分为正常对照组、烫伤对照组、烫伤后金葡菌感染组、JAK2 激酶抑制剂 AG4 90和 STAT3抑制剂雷帕霉素(RPM)处理组。采用逆转录多聚酶链式反应和酶联免疫吸附法 ,分别检测肝组织中肿瘤坏死因子 α(TNFα)基因和蛋白表达、肝功能指标的改变。结果 :AG4 90和 RPM早期干预均能显著降低烫伤脓毒症大鼠肝组织TNFα m RNA表达峰值 (P均 <0 .0 1) ,AG4 90处理后 2小时肝组织 TNFα的蛋白水平也有所下降 ;同时 ,血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶亦显著降低 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论 :脓毒症早期抑制 JAK/

杀菌-通透性增加蛋白对脓毒症大鼠肝组织致炎与抗炎细胞因子表达的影响

目的 :探讨杀菌通透性增加蛋白 (BPI)对脓毒症大鼠肝组织致炎与抗炎细胞因子表达的影响。方法 :采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CL P)致脓毒症模型 ,动物随机分为正常对照组、脓毒症组和 BPI治疗组。分别于 CL P后 12和 2 4小时处死动物 ,检测肝组织肿瘤坏死因子 α(TNFα)、白介素 10 (IL 10 ) m RNA及其蛋白表达以及肝功能指标的改变。结果 :脓毒症动物肝组织 TNFα及 IL 10基因和蛋白表达均显著升高(P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,其中 CL P后 12小时组织 TNFα蛋白水平升高幅度明显大于 IL 10的改变。 BPI治疗 12小时组 TNFα基因及蛋白均显著下降 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,而 IL 10则不同程度地升高 ;同时 ,治疗组 12小时肝功能指标亦明显改善。结论 :脓毒症早期应用 BPI治疗可明显抑制肝组织 TNFα等致炎细胞因子表达 ,并上调局部组织 IL 10等抗炎细胞因子的产生 。

艾司洛尔和芬太尼对高血压患者气管插管循环反应影响的研究

目的 :比较艾司洛尔和芬太尼对高血压患者气管插管时循环和儿茶酚胺反应的影响。方法 :将 6 0例美国麻醉医师协会 (ASA)分级标准 ～ 级且行气管插管全麻手术的高血压患者随机分为 4组 ,分别于插管前静脉注射生理盐水 (A组 )、 2 m g/ kg艾司洛尔 (B组 )、2 μg/ kg芬太尼 (C组 )和 2 mg/ kg艾司洛尔 +2 μg/ kg芬太尼 (D组 )。静脉给咪唑安定、阿曲库胺和异丙酚诱导插管。测定插管前后收缩压 (SAP)、舒张压 (DAP)、心率 (HR)、心率收缩压乘积 (RPP)及血浆去甲肾上腺素 (NA)和肾上腺素 (A)浓度。结果 :气管插管后 1min和3min,A组患者 SAP、DAP、HR、RPP、NA和 A均非常显著高于基础水平 (P<0 .0 5或 P <0 .0 1) ,B组患者NA和 C组患者 SAP插管后均明显升高 (P均 <0 .0 5 ) ,D组患者气管插管后 SAP、DAP、HR和 NA、A水平与基础值比较无明显差异 (P均 >0 .0 5 )。结论 :高血压患者气管插管有明显循环和应激反应 ,2 mg/ kg艾司洛尔或 2 μg/ kg芬太尼预处理仅能部分减少插管反应 ,联合应用 2 mg/ kg艾司洛尔和 2 μg/ kg芬太尼能完全抑制高血压患者插管时的循环和儿茶酚胺反应。

内毒素在多系统器官功能衰竭中的作用

内毒素与多系统器官功能衰竭(MSOF)密切相关。在创伤、感染等应激状态下,机体免疫功能抑制、机械屏障作用削弱,从而使大量内毒素,尤其是肠源性内毒素侵入血循环,并在一定条件下形成内毒素血症,通过直接或间接激活补体而促发一系列活性介质的作用,导致全身各器官损害,进而发展为MSOF,可见内毒素是MSOF发生的重要动因。应用内毒素抗体冶疗,为MSOF的防治展示了新的前景。

多系统器官衰竭家兔前列腺素E_2的释放与内毒素血症的研究

本文采用家兔多系统器官衰竭(MSOF)的实验模型,初步观察了血浆PGE_2的改变与内毒素血症的关系及其对MSOF发生、发展的影响。结果表明:(1)伤后24小时血浆PGE_2水平迅速升高,其中发生MSOF者上升的幅度显著高于未发生MSOF者;(2)休克24小时后血浆内毒素值与PGE_2水平的变化趋势相平行;(3)休克1小时即出现内毒素血症,此时PGE_2水平无明显异常。提示严重失血性休克后内毒素血症发生甚早,它对血浆PGE_2水平有明显影响,而PGE_2的大量产生与释放可能是导致机体免疫功能抑制、诱发脓毒症及MSOF的免疫学基础之一。

脓毒症的分子生物学基础及其治疗途径的进展

脓毒症是严重创伤、烧伤、休克后常见的并发症，进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障综合征（ＭＯＤＳ）等，已成为危重病医学研究的前沿课题。近年来，随着分子生物学的飞速发展，人们对脓毒症发病机制及其治疗途径的了解也日益加深。分子生物学已经广泛应用于脓毒...

烫伤大鼠组织肿瘤坏死因子-α受体基因表达的变化

目的：观察烫伤后机体主要脏器肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）及其受体（ＴＮＦＲ）ｍＲＮＡ表达的变化规律及二者的平衡关系。方法：采用大鼠３５％Ⅲ度烫伤模型，分别于伤前、伤后１２、２４、４８、７２小时活杀动物。留取组织和血标本分别检测组织ＴＮＦα、ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达及器官功能指标。结果：烫伤后组织ＴＮＦα基因表达明显增强，而ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达则呈持续降低趋势。同时，烫伤后各组织ＴＮＦα／ＴＮＦＲｍＲＮＡ比值显著增加，其中以肺组织升高最为显著。相关分析表明，肝组织ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达、ＴＮＦα／ＴＮＦＲｍＲＮＡ比值与血清谷草转氨酶（ＧＯＴ）呈显著相关（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１），肾组织ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达与血清肌酐（ＳＣｒ）呈显著负相关（Ｐ＜０．０１）。结论：烫伤可明显上调机体主要脏器ＴＮＦαｍＲＮＡ的表达，而ＴＮＦＲ基因表达则呈下调反应，提示ＴＮＦα和ＴＮＦＲ比例严重失调可能参与了烧伤后多器官功能损害的病理生理过程。

选择性肠道清洁法对重症烫伤大鼠肠源性内毒素血症的影响

本实验采用大鼠４０％Ⅲ°烫伤模型，初步观察了选择性肠道清洁法（ＳＤＤ）对肠源性内毒素血症的防治效果。结果发现，防治组动物门、体循环内毒素水平伤后均显著降低（Ｐ＜０．０５～０．０１），各段肠腔内游离内毒素含量较烫伤对照组下降９９．５％以上。且肠道细菌易位率致伤１～５天都明显减少，回肠粘膜二胺氧化酶活性逐渐恢复。防治组大鼠严重烫伤５天存活率提高２６．７％（Ｐ＜０．０５）。本结果提示，该方法对于重症烫伤大鼠肠源性内毒素血症具有显著防护效应，并能抑制肠道细菌的移居与减轻肠粘膜的进一步损害。因此，及早进行ＳＤＤ可能有助于烧伤后肠源性感染及其它并发症的防治。

多粘菌素B和杀菌/通透性增加蛋白对烫伤大鼠肠道细菌易位和肿瘤坏死因子-α基因表达的影响

目的：比较两种不同内毒素拮抗剂——多粘菌素Ｂ和杀菌／通透性增加蛋白（ＢＰＩ）对大鼠烫伤后肠道细菌易位和组织肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）基因表达的影响。方法：采用大鼠３５％体表面积Ⅲ度烫伤模型，动物随机分为正常对照组（８只）、烫伤组（２４只）、多粘菌素Ｂ治疗组（７只）和ＢＰＩ治疗组（６只）。结果：大鼠烫伤后肠道细菌易位率明显上升，伤后８小时细菌易位率达３７．１％，与正常对照组比较差异显著（Ｐ＜０．０１）；细菌易位率最高的器官是肠系膜淋巴结，不同器官易位细菌量无显著性差异；给予烫伤大鼠多粘菌素Ｂ和ＢＰＩ治疗均可不同程度地降低细菌易位率，其细菌易位率分别降至烫伤８小时组的６１．７％和５３．９％；ＢＰＩ比多粘菌素Ｂ更为有效地降低肠、肾等组织ＴＮＦαｍＲＮＡ表达水平（Ｐ均＜０．０１）。结论：多粘菌素Ｂ和ＢＰＩ均可降低大鼠烫伤后肠道细菌易位的发生；ＢＰＩ较多粘菌素Ｂ能更有效地抑制多种组织ＴＮＦαｍＲＮＡ表达。因此，烧伤早期应用ＢＰＩ治疗对抑制创伤后机体过度炎症反应具有重要意义。

烧伤内毒素血症研究的若干进展

感染是烧伤后最常见的并发症,成为首要的致死原因。特别是革兰氏阴性杆菌如绿脓杆菌、大肠杆菌等侵袭所致脓毒症,对患者生命威胁极大。

单纯和放射复合伤伤口愈合中循环血T淋巴细胞亚群的变化及其与愈合延迟的关系

目的 :研究放射复合伤伤口愈合中循环血 T淋巴细胞亚群的变化规律及其与愈合延迟的关系。方法 :用免疫组织化学方法检测循环血 T淋巴细胞亚群。结果 :伤口区病理形态学观察表明 ,大剂量局部照射后能导致伤口愈合延迟 ;照射后白细胞数出现下降 ,伤后 3～ 5日降低较为明显 ,显著低于单纯创伤组 ;伤后 2组动物循环血 T淋巴细胞及其亚群均出现降低 ,然而照射组始终低于单纯创伤组 ,致伤后 2 8日仍然有显著性差别。结论 :照射后循环血 T淋巴细胞及其亚群的降低和白细胞数的下降是辐射延迟伤口愈合的重要原因。