烫伤后金黄色葡萄球菌感染致严重脓毒症大鼠模型的建立

目的 :初步建立烫伤后金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )感染所致严重脓毒症的动物模型。方法 :雄性 Wistar大鼠行 2 0 %总体表面积 度烫伤 ,于伤后 2 4小时经腹腔注射对数生长期的金葡菌菌液 4ml/ kg(浓度为8× 10 1 2集落形成单位 / L)造成严重脓毒症。结果 :烫伤复合金葡菌攻击后 ,大鼠血浆肿瘤坏死因子 α、干扰素 γ和一氧化氮水平均显著升高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;同时反映动物肝、肾和心脏功能的血清丙氨酸转氨酶(AL T)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、肌酐 (Cr)、肌酸激酶同工酶 (CK MB)和肺组织髓过氧化物酶活性明显增加 ,而小肠组织二胺氧化酶 (DAO)活性呈持续下降趋势。相关分析显示 :动物血清 CK MB、AL T和 Cr水平分别与心、肝、肾组织中肠毒素 B (SEB)含量呈显著正相关 (分别为 r1 =0 .789,P=0 .0 11;r2 =0 .846 ,P=0 .0 0 4和r3=0 .6 70 ,P =0 .0 48) ,而小肠组织 DAO活性与血浆葡萄球菌 SEB含量呈显著负相关 (r4=0 .44 0 ,P =0 .0 17)。病理形态学检查显示 ,动物多个器官明显受损。结论 :大鼠 2 0 %总体表面积 度烫伤后合并金葡菌感染可致大鼠体内广泛炎症反应并伴有多器官损害 ,其改变符合严重脓毒症的标准与特征。

抑制JAK/STAT通路对烫伤后金黄色葡萄球菌脓毒症大鼠肝损害的影响

目的 :研究 JAK激酶 /信号转导和转录激活子 (JAK/ STAT)通路对烫伤后金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )感染致严重脓毒症大鼠肝损害的影响。方法 :采用烫伤后金葡菌感染致严重脓毒症的大鼠模型 ,6 0只动物随机分为正常对照组、烫伤对照组、烫伤后金葡菌感染组、JAK2 激酶抑制剂 AG4 90和 STAT3抑制剂雷帕霉素(RPM)处理组。采用逆转录多聚酶链式反应和酶联免疫吸附法 ,分别检测肝组织中肿瘤坏死因子 α(TNFα)基因和蛋白表达、肝功能指标的改变。结果 :AG4 90和 RPM早期干预均能显著降低烫伤脓毒症大鼠肝组织TNFα m RNA表达峰值 (P均 <0 .0 1) ,AG4 90处理后 2小时肝组织 TNFα的蛋白水平也有所下降 ;同时 ,血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶亦显著降低 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论 :脓毒症早期抑制 JAK/

杀菌-通透性增加蛋白对脓毒症大鼠肝组织致炎与抗炎细胞因子表达的影响

目的 :探讨杀菌通透性增加蛋白 (BPI)对脓毒症大鼠肝组织致炎与抗炎细胞因子表达的影响。方法 :采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CL P)致脓毒症模型 ,动物随机分为正常对照组、脓毒症组和 BPI治疗组。分别于 CL P后 12和 2 4小时处死动物 ,检测肝组织肿瘤坏死因子 α(TNFα)、白介素 10 (IL 10 ) m RNA及其蛋白表达以及肝功能指标的改变。结果 :脓毒症动物肝组织 TNFα及 IL 10基因和蛋白表达均显著升高(P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,其中 CL P后 12小时组织 TNFα蛋白水平升高幅度明显大于 IL 10的改变。 BPI治疗 12小时组 TNFα基因及蛋白均显著下降 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,而 IL 10则不同程度地升高 ;同时 ,治疗组 12小时肝功能指标亦明显改善。结论 :脓毒症早期应用 BPI治疗可明显抑制肝组织 TNFα等致炎细胞因子表达 ,并上调局部组织 IL 10等抗炎细胞因子的产生 。

山莨菪碱对脓毒症大鼠肺组织生物喋呤的影响

目的 :探讨山莨菪碱对脓毒症大鼠肺组织生物喋呤产生的影响及其意义。方法 :采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CL P)致脓毒症模型 ,动物随机分为正常对照组、脓毒症组和山莨菪碱治疗组。分别于 CL P后 2、8、16小时处死动物 ,检测肺组织生物喋呤及其合成限速酶三磷酸鸟苷环水解酶 I(GTP CHI) m RNA表达和肿瘤坏死因子α(TNFα) m RNA表达的改变。结果 :脓毒症动物肺组织生物喋呤含量显著升高 ,GTP CHI基因表达水平也显著增强 ,而且其改变与局部 TNFα m RNA表达水平呈正相关。给予山莨菪碱治疗后 2小时 ,组织生物喋呤含量、GTP CHI m RNA表达及 TNFα m RNA表达水平均明显下降 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,且肺组织髓过氧化物酶活性也显著降低 (P<0 .0 5 )。结论 :脓毒症早期应用山莨菪碱能有效抑制肺组织生物喋呤及其合成限速酶基因表达 。

烧伤后免疫抑制引起肠道细菌迁移和内源性感染的实验研究

我们报告了25%烧伤后腹腔内注射地塞米松大鼠肠道细菌迁移及其引起的内源性感染。烧伤后注射地塞米松组(n=31)肠道细菌迁移发生率为67.4%,内脏脓肿发生率为65.5%,显著高于仅注射地塞米松组(n=15)。烧伤对照组(n=15)和空白对照组也出现了肠道细菌迁移(前者为3/15,后者为1/23),但未出现内源性感染。感染的细菌为肠遭中的肠杆菌(大肠杆菌占优势)和棒状杆菌。从微生态学上讨论了烧伤后肠道细菌迁移引起的内源性感染的机理。

腹腔感染所致多器官损害与Toll样受体2基因表达的关系

目的 探讨Toll样受体 2 (TLR2 )基因表达与严重腹腔感染所致多器官损害的关系。方法 采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)模型造成脓毒症。将 80只大鼠随机分为正常对照组 (n =10 )、假手术组 (n =10 )和脓毒症组 (n =6 0 ) ,留取肝、肺、肾及小肠组织检测TLR2和肿瘤坏死因子 α(TNF α)mRNA表达 ,同时测定血浆中丙氨酸转氨酶 (ALT)、肌酐 (Cr)及肺组织髓过氧化物酶(MPO)、小肠组织二胺氧化酶 (DAO)活性。结果 CLP后 2～ 6h肝、肺、肾及小肠组织TLR2mR NA表达迅速增多 (P <0 .0 1) ,12h达高峰 (P <0 .0 1) ,分别为 0 .818± 0 .0 14 ,0 .95 5± 0 .0 31,0 .82 0± 0 .0 45 ,0 .885± 0 .0 18,并持续至伤后 72h。相关分析结果显示 ,肝、肺、小肠中TLR2与TNF α基因表达呈显著正相关 (P <0 .0 5 0 .0 1) ,肾组织内TLR2与TNF α基因表达无明显相关(P >0 .0 5 ) ;肝、肺、肾、小肠组织中TLR2基因表达分别与ALT、MPO、Cr、DAO水平显著相关。结论 严重腹腔感染可导致多种组织TLR2mRNA持续表达 ,其改变与多器官损害密切相关。

脓毒症大鼠多器官Toll样受体4基因表达的改变及意义

目的 探讨脓毒症大鼠肝、肺、肾及小肠组织中Toll样受体4(TLR4)基因表达的变化 规律及其意义。方法 雄性Wistar大鼠100只,动物随机分为正常对照组、假手术组、盲肠结扎穿孔 (CLP)致脓毒症组和杀菌/通透性增加蛋白(BPI)治疗组。分别检测肝、肺、肾、小肠组织TLR4、TNF αmRNA表达以及组织、血浆中内毒素水平的改变。结果 CLP后6～12h肝、肺、肾及小肠组织 TLR4mRNA表达显著升高达峰值(P<0.05或P<0.01);BPI早期治疗可显著降低各组织内毒素 水平,CLP后12h肝、肺、肾、小肠组织和24h肾组织TLR4mRNA表达亦明显抑制(P<0.05或 P<0.01)。相关分析显示,肝、肺、肾组织TLR4mRNA表达分别与相应组织及血浆内毒素水平、组 织TNF αmRNA水平均呈显著正相关。结论 CLP后细菌内毒素可迅速侵入血循环和多种组织, 它对于诱导体内TLR4基因表达上调具有显著影响,而TLR4基因广泛表达可能参与了脓毒症的病 理生理过程。

己酮可可碱对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机理

目的探讨己酮可可碱 (PTX)对腹腔感染致脓毒症时急性肺损伤的保护作用及其机理。方法采用盲肠结扎穿孔致脓毒症模型 ,将 42只大鼠随机分为对照组 6只、脓毒症组 18只和PTX治疗组 18只。检测肺组织生物喋呤 (BH4 )合成限速酶 三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ (GTP CHI)、诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)和肿瘤坏死因子 α (TNF α)mRNA的表达 ;同时测定肺组织BH4 、一氧化氮(NO)的含量及髓过氧化物酶 (MPO)活性的变化。结果脓毒症早期给予PTX治疗可有效抑制腹腔感染后 2、8h肺组织TNF αmRNA表达和伤后 2hMPO活性 ;同时 ,治疗组 2h肺组织BH4 、NO含量及GTP CHImRNA、iNOSmRNA表达均显著降低。结论早期应用PTX对脓毒症后急性肺损伤具有明显保护作用 ,该效应与PTX抑制BH4 。