角色体验法在传染病外科实习护生护理安全教育中的应用

目的探讨角色体验法在传染病外科实习护生护理安全教育中的效果。方法选取本科室2016届实习护生作为对照组,2017届实习护生为试验组。对照组根据实习大纲,制定培训计划,采用常规教学方法,以PPT授课为主;试验组在此基础上增加护患角色体验法教学,即让护生分别扮演护士和患者,通过切身体验来增强学习效果,强化工作责任感。结果试验组在理论、实际操作方面的考核成绩及护理安全意识上优于对照组(P<0.05)。结论角色体验法在护理安全工作培训中有较好成效,可以采用并推广。

肝移植术中不同时相供肝胆道上皮细胞的病理组织结构改变

目的研究肝移植术中胆管上皮细胞在不同时相的病理结构改变。方法选择无胆道疾病的肝移植病人50例,供体胆道灌洗液为HC-A肾保存液,器官保存液为UW液。术中不同时间段(供肝植入前、门静脉开放时、动脉开放时、动脉开放后30 min)留取胆道组织标本,行病理检查。结果不同时间段所取的胆道标本上皮所受损伤逐渐加重。观察到细胞的肿胀、炎细胞浸润、细胞核的皱缩、微绒毛断裂等。结论胆道缺血时间的延长可导致胆道上皮细胞损伤加重。但是当冷缺血时间小于12 h,胆道上皮损伤可修复,并不增加术后胆道并发症的发生几率。

西藏地区273例肝包虫病临床分析

目的探讨肝包虫病的临床特点及手术方式,提高手术治愈率。方法回顾性分析西藏地区273例经手术确诊为肝包虫病患者的临床特点,总结手术治疗经验。结果全部患者均顺利完成手术,无术中死亡。术后发生切口感染10例,胆瘘23例(8.4%),包虫复发41例。平均住院日23.0±8.0 d。结论肝包虫病的治疗以手术为主,手术方式由病情决定,原则为彻底消灭外囊残腔,减少并发症,提高患者生活质量。

射波刀联合经导管肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的疗效及预后分析

目的探讨射波刀联合经导管肝动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗原发性肝癌(直径≥5 cm)的生存率及影响因素。方法研究对象为我院2011年1月—2013年5月收治的110例原发性肝癌患者,55例采用射波刀联合TACE治疗(治疗组),55例单独接受TACE治疗(对照组),均随访至2015年5月1日,比较2组的局部控制率、临床获益率、中位总生存时间(m OS)、中位肿瘤无进展生存时间(m PFS)及术后6、12、18、24个月的生存情况,分析生存率的影响因素。结果在肿瘤病灶局部控制率方面,治疗组为90.91%,显著优于对照组的63.64%(P=0.001)。2组生存曲线差异有统计学意义,术后6、12、18和24个月生存率方面,治疗组分别为96.36%、85.45%、58.18%、38.18%,对照组分别为78.18%、38.18%、30.91%、23.64%。治疗组和对照组的m OS分别为19个月和10个月,m PFS分别为7.0个月和2.5个月。Cox回归模型分析发现,治疗组肿瘤大小和有无腹水是生存率的影响因素。结论对于大肝癌患者,射波刀联合TACE可增加肿瘤局部控制率,有效延缓肿瘤复发,提高生存率,明显优于单纯TACE治疗,可作为直径≥5 cm肝癌治疗选择之一。而肿瘤大小和腹水可能影响既往接受射波刀患者的生存情况。

失代偿期丙型肝炎肝硬化患者长期随访研究

目的通过对失代偿期丙型肝炎肝硬化患者的长期随访,总结分析失代偿期丙型肝炎肝硬化的疾病进展及预后。方法随访2008年1月—2010年2月我院收治的195例失代偿期丙型肝炎肝硬化住院患者,总结其临床资料,进行生存分析。结果失代偿期丙型肝炎肝硬化首发临床表现有腹水(65.1%)、食管胃底静脉曲张破裂出血(17.4%)、自发性细菌性腹膜炎(16.4%)及肝性脑病(1.0%)。主要死因为原发性肝癌(27.6%)、食管胃底静脉曲张破裂出血及失血性休克(24.1%)、肝性脑病及脑水肿(15.5%)、肝肾综合征(8.6%)、多脏器衰竭(8.6%)和感染性休克(3.4%),12.1%的患者死因不详。失代偿期丙型肝炎肝硬化患者1、3、5年生存率分别为97.4%、85.3%、65.7%。1、3、5年原发性肝癌发病率分别为1.0%、6.4%、16.4%。Child-Turcotte-Pugh(CTP)分级C级患者与A级和B级相比,生存时间短,病死率高,差异有统计学意义。结论失代偿期丙型肝炎肝硬化病情进展较快,合并症较多,病死率高,预后差,CTP分级与生存时间密切相关。

21例特发性门脉高压临床及病理特点分析

目的分析特发性门脉高压(idiopathic portal hypertension,IPH)的临床及病理特点。方法回顾性分析2012年1月—2016年12月在解放军第三〇二医院住院治疗(资料完整)的21例IPH患者的临床及病理特点。结果 21例IPH患者中,男女比例6∶15,平均发病年龄(38.1±12.7)岁,临床以门脉高压症表现为主,肝功能无明显减退,主要并发症为上消化道出血及腹水。21例肝组织病理主要表现为肝细胞板排列基本正常,无假小叶形成,汇管区扩大,门静脉周围纤维化,门脉周围有不同程度的细胞浸润,血管紊乱,中央静脉及小叶间静脉扩张,肝窦扩张,窦周纤维化。结论 IPH患者门脉高压和肝功能损害不平行,门脉高压表现较重,确诊仍须病理学检查,治疗以防治并发症为主。

肝脏肿瘤标本资源库的建立、维护及管理

目的探讨建立以肝癌组织样本为主的肝脏外科生物样本库及相关数据信息化管理的方法和标准化操作规程,为临床与基础研究提供高质量的临床标本资源平台。方法收集肝脏肿瘤手术患者的血液标本(血清、血浆、白细胞)、组织标本(癌、癌旁、远端正常组织),将处理好的血液标本于-80℃冰箱保存,新鲜组织置液氮保存,定期随机抽取液氮保存的肿瘤组织样本进行RNA、DNA的提取及鉴定。结果现收集并保存有完整临床信息及随访资料的肝脏肿瘤患者血液标本22 103份,组织标本3 319例,其中肝脏肿瘤组织标本807例,包括肝脏恶性肿瘤762例,良性肿瘤23例,肝硬化组织22例。随机抽取组织RNA、DNA鉴定均符合标本质量标准,能够满足后续实验要求。结论初步建立标准化、规范化的肝脏肿瘤标本库,制定了标准化的标本库维护和管理规程,为肝脏肿瘤基础和临床研究提供了宝贵的实验材料。

新型基质金属蛋白酶抑制剂LY52对肝癌细胞HepG2.2.15体外侵袭能力的影响

目的研究新型基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)抑制剂LY52对转染HBV的肝癌细胞HepG2.2.15中MMP的表达及细胞侵袭能力的影响。方法用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐细胞增殖检测试剂盒测定LY52对细胞增殖的影响;用明胶酶谱分析法研究药物对MMP-2及MMP-9表达的影响,并进一步应用蛋白印迹(Westernblotting,WB)杂交检测MMP-2蛋白表达的改变。用侵袭小室法检测药物作用后肿瘤细胞侵袭能力的改变。结果 LY52能够抑制肿瘤细胞的增殖;明胶酶谱法和WB杂交提示HepG2.2.15细胞表达较高水平的MMP-2和MMP-9;LY52作用后,HepG2.2.15细胞的MMP-2表达受到显著抑制,而MMP-9表达的抑制作用不明显,且HepG2.2.15细胞体外侵袭能力明显降低。结论 LY52能够通过抑制MMP-2的活性及表达,抑制肝癌细胞HepG2.2.15的侵袭能力。LY52作为有潜力的抗肿瘤侵袭药物值得进一步研究。

肝移植术后早期乳酸清除率与ALT和AST的相关性及对移植肝损伤的评估研究

目的：分析肝移植术后早期乳酸清除率（early lactate clearance rate, ELCR）和初期肝特异性氨基转移酶水平变化的特点及相关性，探讨ELCR对移植肝损伤的评估价值。方法回顾性分析301例原位肝移植（orthotopic liver transplantation, OLT）病例资料，针对其术后转入重症监护室的初期ALT、AST、动脉血乳酸水平以及术后6 h动脉血乳酸水平计算ELCR，并与ALT、AST及AST/ALT比值进行相关性分析。结果 ELCR与ALT、AST呈中度负相关（r分别为-0.668、-0.602，P均＜0.001），而与AST/ALT比值无相关性（r=0.077）。经统计分析构建的3个ELCR等级分别为Ⅰ级＜25％、Ⅱ级为25％～50％、Ⅲ级≥50％。Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级对应ALT水平分别为（1670.20±897.41）U/L、（937.87±350.06）U/L和（556.16±173.56）U/L，AST为（2835.98±1549.06）U/L、（1642.87±1106.00）U/L和（827.44±260.92）U/L，3组间ALT和AST水平差异有统计学意义（P＜0.001）。随着ELCR等级增大，ALT和AST值降低。结论 ELCR可方便快速地反映肝移植后初期肝缺血-再灌注损伤程度，其不同等级可对肝移植术后初期移植肝功能进行初步评估。

肝硬化门静脉高压症脾切除手术技巧

目的探讨肝硬化门静脉高压症脾切除术的技术难点及手术技巧。方法回顾性分析2010年4月—2011年12月我科480例因肝硬化门静脉高压症行脾切断流术患者的临床资料。结果 450例行脾切除加贲门周围血管离断术,30例为单纯脾切除。开腹后到断脾胃韧带至脾切除完成平均耗时20min、出血50ml、输血量400m(l125例未输血)。术后并发症为腹腔感染(18例)、胸腔积液(5例)、肺部感染(1例)、胰瘘(1例)及腹腔内出血(1例)。结论门静脉高压症合并脾大(最大3.75kg,平均1.6kg)使得脾周间隙狭小,脾蒂宽,脾胃韧带及脾结肠韧带内侧支血管丰富,血管壁薄,术中极易出血。脾切除术前先结扎脾动脉,后分离脾上下极,最后分离结扎脾蒂,是预防脾切除术中大出血的关键。

小茴香盐包热敷包在腹腔镜下肝癌射频术后缓解腹胀的效果观察

肝癌是临床较为常见的一种恶性肿瘤,发生率居食管癌和胃癌之后,恶性程度高且预后差[1-2]。全世界每年发生肝癌超过150万例,其中近一半发生在中国[3-4]。近年来,以射频消融（RFA）为主的微创治疗在肝癌（HCC）的治疗中应用越来越广泛,尤其是在治疗小肝癌方面,被认为是微创、安全、有效的治疗方法且恢复快[5]。

丙型肝炎肝硬化合并脾功能亢进腹腔镜下脾全切除术后行抗病毒治疗的疗效观察

目的观察丙型肝炎肝硬化合并脾功能亢进患者在行手助腹腔镜下脾全切除术后采用聚乙二醇干扰素（Peg-IFNα-2α）联合利巴韦林抗病毒治疗的疗效。方法 46例丙型肝炎肝硬化（基因型为Ib型）合并脾亢患者,行手助腹腔镜下脾全切除术,待脾亢改善3个月后,予以Peg-IFNα-2α135μg或180μg皮下注射,每周1次,联合利巴韦林800-1 200 mg/d抗病毒治疗,疗程48周。抗病毒期间,第1、2、4、6、8、12周随访,之后每4周随访1次,停药后继续观察24周。治疗及随访期间观察HCV RNA水平、血常规、肝功能及抗病毒期间的不良反应。结果丙型肝炎肝硬化（基因型为Ib型）合并脾亢患者行手助腹腔镜下脾全切除术后,给予Peg-IFNα-2α联合利巴韦林抗病毒治疗后的持续病毒学应答率（SVR）为67.39%（31/46）。结论丙型肝炎肝硬化合并脾功能亢进患者,行手助腹腔镜下脾全切除术改善脾亢后予以PegIFNα-2α联合利巴韦林抗病毒治疗后有较好的SVR,从而延缓了丙型肝硬化患者肝硬化的进展。

术前天冬氨酸氨基转移酶血小板比值对肝细胞癌切除术预后的分析

目的:探讨天冬氨酸氨基转移酶血小板比值(APRI)与肝细胞癌(HCC)手术预后的关系。方法:回顾分析在我院接受根治性切除术的228例HCC患者的临床资料。利用ROC曲线获得APRI值最佳截点为1.62,将患者分为低APRI组(APRI<1.62)和高APRI组(APRI≥1.62),比较分析两组患者的临床数据及预后。结果:术前APRI值同术前AST、PLT、HBsAg阳性率、肝脏纤维化、门脉癌栓密切相关。低APRI组患者术后总生存率(50%)显著高于高APRI组(31%)的患者(P<0.01)。多因素分析显示术前APRI值、肿瘤最大横径、肿瘤数目、门静脉癌栓、肿瘤的TNM分期及分化程度均是影响HCC患者术后总生存率的独立预后因素(P<0.05)。结论:术前外周血APRI值同接受根治性手术的HCC患者的预后密切相关,是其独立的预后因素。

重度肺动脉高压患者行肝脏移植手术一例

患者,女,45岁,68kg,因＂间断乏力4年,加重伴腹胀3d＂入院,诊断：自身免疫性肝炎肝硬化失代偿合并腹水,贫血。拟行肝移植手术。既往无心肺病史,患者自述入院前未出现过呼吸困难、气促、胸闷、胸痛等症状,入院20d出现大量腹水后偶有呼吸困难。RR 18次/分,HR 65次/分,BP120/75mm Hg。ECG无异常。胸部X线片示双肺纹理增粗。腹部超声示肝硬化、大量腹水。实验室检查：RBC 2.73×1012/L,Hb 80g/L,Plt 36×109/L,PTa 51%,Alb 15g/L,TBIL 12.2μmol/L,肾功能及电解质正常。

流感病毒为载体重组病毒株rHCV/FLU的构建及初步评价

目的构建及拯救以流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株r HCV/FLU并对其进行评价。方法利用反向遗传学技术,选择流感病毒A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,将HCV 1b亚型的E1抗原基因经序列优化插入到PR8流感病毒NS1片段的特定位置,构建重组质粒p NS1-HCV,测序正确的重组质粒p NS1-HCV与PR8的7个重组质粒p HW191-PB2、p HW192-PB1、p HW193-PA、p HW194-HA、p HW195-NP、p HW196-NA、p HW197-M转染共培养的COS-1和MDCK细胞,经拯救、筛选、鉴定获得流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株,命名为r HCV/FLU,并通过血凝试验、RT-PCR、Western blot、电镜观察病毒形态等方法对重组病毒鉴定。接着,重组病毒接种SPF鸡胚扩大培养、超滤浓缩、蔗糖密度梯度离心纯化。纯化获得的重组病毒抗原,滴鼻免疫Balb/c小鼠,0 d、14 d免疫2次,设置104TCID50、105TCID50、106TCID503个剂量组,初步评价其免疫效果。结果成功拯救重组病毒株r HCV/FLU,血凝效价(HA)为29-10,病毒滴度Log10(TCID50/ml)为6.5。滴鼻免疫小鼠二免后14 d取小鼠血清及脾淋巴细胞,3个剂量组针对流感病毒的血抑(HI)效价均值分别为80、640和1 280,初步证明重组病毒株r HCV/FLU在小鼠体内能够产生较强体液免疫和细胞免疫应答反应。结论成功制备的重组病毒株r HCV/FLU在动物体内具有较好的免疫效果,为新型HCV疫苗的研制提供新的研究策略。

原发性肝细胞癌伴门静脉癌栓患者接受立体定向放射治疗的疗效观察

目的评价原发性肝细胞癌伴门静脉癌栓患者接受立体定向放射治疗（射波刀）的疗效。方法收集我院2011年1月—2015年5月原发性肝细胞癌伴门静脉癌栓患者59例,均接受射波刀治疗。门静脉癌栓的大体肿瘤体积为24.6~1265.0 cm3,中位数399.0 cm3,单次分割剂量5~13 Gy/次（中位数10 Gy）,照射次数4~8次（中位数6次）,肿瘤剂量35~56 Gy（中位数49 Gy）,每d或隔1~2 d照射1次。采用寿命表法进行生存分析,Cox回归模型分析生存相关的影响因素。结果 59例肝癌伴门静脉癌栓患者接受射波刀治疗,中位无疾病进展生存期为5.19个月,中位总生存期为11.84个月,疾病控制率为62.71%（37/59）,治疗后1年、2年、3年的累积生存率分别为49.15%（29/59）、20.34%（12/59）、11.86%（7/59）。Cox回归分析显示：术前AFP水平、性别、年龄、病灶大小、肿瘤数目、肝功能Child-Pugh分级、腹水、癌栓类型及总剂量大小对患者生存期无明显影响。结论射波刀是肝癌伴门静脉癌栓患者较理想的治疗方法,可显著延长患者生存期。

一种新型肝细胞癌分子靶向治疗临床药敏检测方法的建立

目的:建立分子靶向药物索拉菲尼(Sorafenib)临床治疗肝细胞癌(HCC)敏感性的新型预测方法。方法:将HCC手术切除癌症标本外围组织性状较好的部分处理成1 mm^3,原位接种于免疫缺陷的BALB/c小鼠肝脏,4~6周后B超检测其生长状况;当肿瘤长至2~3 mm^3时,用生理盐水配置Sorafenib溶液,以2 mg/kg用量对小鼠进行隔日口服灌胃给药,共给药10次。最后收集动物,观察肝脏原位肿瘤的大小,同时进行病理检测,考察Sorafenib的抗肿瘤治疗效果。结果:实验动物肝脏拍照和病理结果均显示,与溶剂对照组相比,Sorafenib治疗组小鼠肝脏原位HCC病灶明显缩小或消除。结论:建立了HCC分子靶向治疗临床药敏检测方法,为临床有效且个体化治疗HCC提供了新途径。

基因间长链非编码RNA?524346在肝细胞癌中的?表达及临床意义

目的检测基因间长链非编码RNA 524346(long intergenic non-coding RNA 524346,LincRNA 524346)在肝细胞癌患者组织(癌、癌旁)及细胞系(正常肝细胞系LO2及肝癌细胞系SMMC-7721、HepG2和Huh7)中的表达情况,探讨LincRNA 524346与肝细胞癌临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测LincRNA 524346在61例肝细胞癌患者癌组织、配对癌旁组织以及肝癌细胞系的表达水平,分析其与肝细胞癌患者临床病理特征之间的相关性。用受试者工作曲线(receiver operating characteristics,ROC)评价肝细胞癌组织中LincRNA 524346的表达水平在肝细胞癌早期诊断中的效能。结果 LincRNA 524346在83.6%(51/61)肝细胞癌患者的癌组织中较配对癌旁组织表达下调,差异有统计学意义(P<0.01);LincRNA 524346的表达水平与肝细胞癌患者的病理分期(P=0.021)、肿瘤数目(P=0.013)、是否合并门静脉癌栓(PVTT)(P<0.01)、肝硬化(P=0.005)和微静脉浸润(MVI)(P<0.001)具有显著相关性。结论 LincRNA 524346在肝细胞癌组织中表达降低,其有望作为潜在肝细胞癌早期诊断、转移的分子标志物。

重组金黄色葡萄球菌肠毒素B蛋白可溶性微针制备及免疫效果研究

目的建立重组金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)蛋白的可溶性微针体外检测方法及体内免疫效果评价。方法通过动态光散射(DLS)检测蛋白粒径、BCA法检测单片微针的蛋白浓度、活体成像实验检测微针皮内注射后蛋白在体内的停留时间,通过DRIZE评分评价微针注射后的皮肤情况,通过动物实验评价重组SEB蛋白可溶性微针的免疫原性及免疫保护效果。结果DLS分析显示SEB蛋白可溶性微针负载的重组SEB蛋白粒径与重组SEB蛋白溶液中的SEB蛋白粒径无明显差别,单片微针中重组SEB蛋白含量为(13.2±1.4)μg,活体成像实验显示相对于肌肉注射,重组SEB蛋白可溶性微针皮内给药后荧光蛋白在体内的停留时间延长,动物实验显示13.0μg的重组SEB蛋白可溶性微针即能引发免疫反应,并且在2LD50SEB攻毒剂量下能够产生很好保护效果。结论重组SEB蛋白可溶性微针能够刺激小鼠机体产生较好的免疫原性及免疫保护效果,为发展疫苗新型免疫途径提供了新策略。

Fyn与小鼠肝纤维化模型中胆汁酸代谢组分的相关性研究

目的探讨四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型中胆汁酸(bile acids,BAs)代谢的改变,并初步探索分子机制。方法选取6周龄的C57BL/6小鼠,用四氯化碳诱导6周为肝纤维化模型(肝纤维化组),正常饲养小鼠6周作为对照(健康组)。对2组小鼠肝脏进行病理评估和血清学检测,利用液相色谱与质谱联用技术检测血清中BAs各组分的含量,利用Western Blot检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Fyn的表达量。结果四氯化碳诱导形成小鼠肝纤维化模型后,小鼠血清中BAs代谢各组分普遍升高,其中肝纤维化组中鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)、去氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)、牛磺-β-鼠胆酸(tauro-β-muricholic,T-βMCA)、熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)、α-鼠胆酸(α-muricholic acid,α-MCA)、β-鼠胆酸(β-muricholic acid,β-MCA)相比健康组均显著升高,Fyn的表达量也显著升高并且与UDCA、DCA、牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid,TCDCA)呈正相关的关系。结论本研究明确了四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型中BAs各组分的改变,并揭示Fyn对BAs的合成和转运可能起重要调控作用,进而影响肝纤维化的形成。