基于人/鼠嵌合模型的人黑色素瘤mage-3基因疫苗的免疫学作用

目的:利用人/鼠嵌合模型评价人黑色素瘤基因mage-3基因疫苗的免疫效果。方法:建立并鉴定Trimera动物模型,并用重组质粒mage-3/pCI-neo作为基因疫苗对其进行免疫。检测免疫动物脾细胞CTL的杀伤活性和血清中mage-3特异性抗体。结果:构建的Trimera模型脾脏和腹腔中出现了大量的人淋巴细胞。接种后,Trimera模型体内出现了效价为1:256的mage-3特异抗体。免疫动物CTL体外杀伤实验显示,注射基因疫苗的Trimera小鼠脾脏淋巴细胞对靶细胞LB373的最大杀伤率为50%左右,而对照小鼠只有10%以下的杀伤水平。结论:mage-3是一种理想的肿瘤疫苗,在人源化动物模型中能激发出特异的细胞和体液免疫,对共享mage-3抗原的各种肿瘤细胞的临床治疗提供了实验依据。

基于创新人才培养的POPS教学模式研究

以往的医学免疫学教学常采用"结构式课堂教学",难以达到培养创新人才的教学目的。POPS(Patient-Oriented Problem Solving System(以患者为导向的问题求解系统,简称POPS))教学模式改变了传统课堂教学中重知识灌输、轻实践与运用;重理论体系、轻方法手段;重以教员为中心,轻学员参与的弊端与不足,提高了学员的主观能动性,将转换医学的概念贯穿学习的始终,激发了教员的教学创新能力,值得在推广。

融合蛋白ICOSIg的三维结构模建的研究

目的:利用结构相似性的序列比对来模建ICOSIg的三维结构,分析其可能的结合位点,为 改造ICOSIg的突变体,提高其结合活性提供理论基础。方法:利用生物信息学手段分析ICOS所 属CD28家族各成员分子的结构域,通过基于结构相似的序列比对,以空间结构已经得到解析的 CTLA4为模板,利用同源模建的方法,模建ICOS膜外区的空间结构。进一步地以人IgG2和 CTLA4为模板,模建了ICOSIg全长的空间结构。在此基础上,结合氨基酸特性,分析其可能的功 能位点。结果:FDPPPF及KTKGSGN基序可能是ICOSIg的功能结合位点。结论:模建了ICOSIg 的空间结构,分析了其可能结合位点,为突变ICOSIg提高其亲和力提供了线索。

基于蛋白优势表位的乙型肝炎疫苗研究

乙型肝炎是中国的常见病.本文对基于乙肝病毒抗原表位的多肽疫苗研究和基于乙肝病毒表面抗原的转基因植物技术的研究进展和存在的问题进行了分析.并就可能诱导黏膜B、T细胞免疫的基于乙肝病毒抗原优势表位多肽的转基因植物口服疫苗的研究进行了预测和展望.

MHCⅡ类分子胞内转运过程研究进展

MHCⅡ类分子在抗原提呈细胞内的转运过程可分为3个环节:1)新合成MHCⅡ类分子转运到内吞系统;2)存储在内吞系统中完成抗原提呈;3)从内吞系统转运到细胞表面活化CD4+T细胞。近年来研究显示此转运过程涉及自吞噬、泛素化等多种机制,而转运环节的改变将影响MHC II类分子发挥其功能,导致免疫发育和免疫防御功能障碍,故本文将此领域研究进展进行综述。

构建具有突变铜-锌超氧化物歧化酶绿色荧光真核表达载体

目的:构建一个具有特殊临床表型的肌萎缩侧索硬化症家系的突变铜-锌超氧化物歧化酶与有增强绿色荧光蛋白基因的pEGFP-N1融合的真核表达载体。方法:实验于2003-09/2005-01在第三军医大学全军免疫学研究所完成。通过RT-聚合酶链扩增突变铜-锌超氧化物歧化酶cDNA,应用基因重组技术,将得到的突变铜-锌超氧化物歧化酶cDNA克隆入荧光真核表达载体pEGFP-N1中,转化DH5α感受态细胞,用含卡那霉素LB培养基平板筛选转化菌,阳性重组子经EcoRⅠ与BamHⅠ双酶切分析、测序鉴定。结果:提取到纯度较高的总RNA,通过RT-聚合酶链和基因重组得到重组质粒,应用EcoRⅠ与BamHⅠ双酶切重组质粒,得到长约130bp和4.6Kb的两条带,前者为插入片段的长度,后者为pEGFP-N1载体本身的长度。测序也最终证实重组载体的方向及序列正确。结论:突变铜-锌超氧化物歧化酶cDNA成功地亚克隆至荧光真核表达载体pEGFP-N1中,获得突变铜-锌超氧化物歧化酶/pEGFP-N1重组质粒,从而为实时监测突变铜-锌超氧化物歧化酶基因在体内的表达和蛋白定位提供一个有用的工具载体。

哮喘患者外周血单个核细胞CD4^+CD25^+调节性T细胞及IL-4分泌水平的检测

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘发病机制中的作用,为哮喘的临床治疗提供新的思路和方法。方法:分离哮喘患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞仪分析CD4+CD25+调节性T细胞在外周血单个核细胞中的比例;酶联免疫吸附法(ELASA)检测外周血PBMC培养上清IL-4的分泌状况。结果:哮喘组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(3.2±1.5)%,健康对照组为(6.5±2.5)%,哮喘组明显低于对照组(P<0.05);哮喘组外周血PBMC培养上清IL-4分泌水平为(57.3±13.5)ng/L,健康对照组为(28.6±7.2)ng/L,哮喘组明显高于对照组(P<0.05)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能参与了哮喘的发生与发展。