海水淹溺急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5表达变化的研究

目的观测海水淹溺急性肺损伤（Au）大鼠肺组织水通道蛋白5（AQP5）表达变化。方法100只健康雄性Wistar大鼠随机分为两组，即海水淹溺组和对照组。海水淹溺组用气管吸人海水法建立模型，对照组除不吸人海水外，其他处理同海水淹溺组。分别于致伤后0．5、1、2、4及8h时点，取大鼠颈动脉血做血气分析，观察动脉血氧分压（PaO2）的变化；光镜下观察肺组织病理变化情况；采用免疫组织化学法检测肺组织表达与分布；采用RT—PCR方法检测AQP5mRNA表达。结果成功复制了大鼠海水淹溺AU模型：海水淹溺组在吸人海水后血PaO2明显下降，海水淹溺组各时点血PaO2显著低于对应时点对照组（P〈0．01）。光镜下可见海水淹溺组各时点肺组织有毛细血管充血、肺间质、肺泡水肿和灶性出血；对照组未见明显病理变化。免疫组化显示，海水淹溺组肺问质的毛细血管内皮AQP5的阳性表达，积分光密度值显著高于对照组的表达（P〈0．05）；海水淹溺组大鼠肺组织AQP5mRNA表达也显著高于对照组（P〈0．01）。结论海水淹溺ALI时肺组织AQP5蛋白及mRNA表达增加，AQP5在ALI／ARDS海水的转运中可能起着重要作用。

PKC/MAPK/NF-κB信号通路在低氧诱导大鼠单核细胞表达IL-1β中的作用

目的研究PKC／MAPK／NF—κB信号通路在低氧诱导大鼠外周血单核细胞（peripher—al blood monouclear cells，PBMCs）白细胞介素-1β（IL-1β）表达中的作用，探讨低氧与全身炎症反应综合征（SIRS）的关系，为进一步研究老年多器官功能障碍综合征（MODSE）的肺启动机制奠定基础。方法采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞，分为低氧组和Chelerythrine＋低氧组。Chelerythrine＋低氧组于低氧前予10 μmol／L Chelerythrine预处理。然后两组细胞均于低氧条件下（3％O2，5％CO2，92％N2）培养0、1、3、6、9、12、24h后，收集细胞及培养液上清，分别采用PKC、MAPK活性检测试剂盒、电泳迁移分析法（EMSA）、逆转录PCR（RT—PCR）检测PKC、MAPK、NF—κB活性及IL-1β表达量。结果低氧1～9h，PKC、MAPK活性，NF—κB结合活性及IL-1β表达量显著高于正常对照组（P〈0．01）。低氧后1～24h，PKC、MAPK活性、NF—κB结合活性与IL-1β mRNA表达水平间呈显著正相关（P〈0．01—0．05）。10 μLmol／L Chelerythrine可显著抑制低氧诱导的PKC、MAPK、NF—κB活性升高和IL-1β表达。结论低氧可显著增强大鼠外周血单核细胞的PKC、MAPK活性及NF—κB结合活性，并可诱导其产生大量的促炎症因子IL-1β，这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征（acuterespiratorydysfunction，ARDS）时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关。

慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡率的动态变化(英文)

背景:慢性阻塞性肺疾病是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征,这些炎症细胞数量增加和活性改变的机制目前还不十分清楚。目的:探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡特点及其与慢性阻塞性肺疾病发生发展的关系,以期为慢性阻塞性肺疾病患者的早期干预和功能监测提供参考方向。设计:以慢性阻塞性肺疾病患者为观察对象,健康人群为对照组的观察对比研究。单位:一所军医大学医院的呼吸内科。对象:观察对象为2003-02/12因慢性阻塞性肺疾病急性发作在第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸内科住院的慢性阻塞性肺疾病患者,同期同类住院患者98例,采用随机数字表法随机选择18例患者作为慢性阻塞性肺疾病组,其中男12例,女6例,年龄48～70岁,平均(56±7)岁。对照组14例,为来本院查体的健康成年人,其中男10例,女4例,年龄50～70岁,平均(59±8)岁。方法:用密度梯度离心法分离外周血中性粒细胞,利用流式细胞仪和原位末端标记技术观察外周血中中性粒细胞凋亡的动态变化。主要观察指标:各组外周血中性粒细胞凋亡率比较。结果:流式细胞分析显示,缓解期慢性阻塞性肺疾病患者凋亡早期中性粒细胞的比率为(8.5±1.3)%,明显低于正常对照组(12.5±1.8)%(t=6.25,P<0.01),急性加重期(5.1±0.6)

Na^+/H^+交换器-1抑制诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的可能机制(英文)

背景:肺动脉平滑肌细胞(pulmonaryarterysmoothmusclecells,PASMC)的增殖在缺氧肺动脉高压肺血管重构中起重要作用。解放军第三军医大学附属新桥医院全军呼吸研究所在前期实验中通过构建Na+/H+交换器-1(sodium/protonexchangerisoform-1,Na+/H+exchangeriso-form-1,Na+/H+antiporterisoform-1,NHE-1)特异性核酶基因逆转录病毒载体,转染入体外培养的大鼠PASMC内表达,发现NHE-1抑制可诱导细胞内酸化而抑制PASMC增殖,并促进其凋亡。但这种促凋亡作用是通过什么途径来完成,尚不清楚。目的:探讨Bcl-2、Bax蛋白表达在NHE-1抑制而诱导大鼠PASMC凋亡中的作用。设计:分组对照实验。地点和材料:实验在解放军第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所完成。转染表达NHE-1特异性核酶基因的体外培养大鼠PASMC(PRZ细胞)、转染PLXSN空载体的大鼠PASMC(PX细胞)、未处理大鼠PASMC细胞(PA细胞)为前期实验所制备。干预:已构建NHE-1特异性核酶基因逆转录病毒载体,转染入体外培养的大鼠PASMC内表达,同时转染pLXSN空载体入另一组大鼠PASMC内,后者与未转染的大鼠PASMC细胞为对照组。用荧光指示剂(Fura-2/AM)测定法检测转染NHE-1特异性核酶基因的大鼠PASMC内Ca2+(犤Ca2+犦i)变化;RT-PCR方法检测细胞内Bcl-2和BaxmRNA表达变化,

七叶皂苷钠对模拟高原低氧大鼠脑损伤的干预作用及对水通道蛋白4表达的影响

目的探讨七叶皂苷钠对模拟高原低氧大鼠脑损伤的干预作用及对水通道蛋白4（AQPg）表达的影响。方法40只SD大鼠随机均分为正常对照组、高原低氧致脑损伤组、七叶皂苷钠干预组。将大鼠放置在模拟海拔6000m高原环境中，每6h舱外以20m／min运动2h，重复三次致大鼠脑损伤。脑损伤后干预组给予尾静脉推注5mg／kg七叶皂苷钠，高原低氧致脑损伤组尾静脉推注5mg／kg生理盐水，分别观察各组脑组织病理切片、含水量、TNF—α含量和AQPd蛋白在脑组织中的定位及表达情况。结果病理切片显示，大鼠高原脑损伤后立即给予七叶皂苷钠干预，脑损伤程度显著减低。免疫组化示，AQP4蛋白主要在脑组织星形胶质细胞、小胶质细胞胞浆中呈阳性表达，且干预组较脑损伤组AQP4蛋白表达量显著降低；与正常组比较，脑损伤组12h脑含水量、TNF-α含量和AQP4蛋白表达显著升高，干预组12h脑含水量、12hTNF-α含量和6、12hAQP4蛋白表达较脑损伤组显著降低。结论七叶皂苷钠通过抑制TNF-α及下调AQP4表达，从而有效改善高原脑损伤程度。

Wy14643联合Troglitazone对急性肺损伤大鼠肺组织PPAR-α表达的影响

目的探讨Wy14643联合Troglitazone作用于急性肺损伤大鼠肺组织后PPAR-α表达的变化及其意义。方法将96只大鼠随机分为对照组(ND组)、脂多糖(LPS)致伤组(LD组)、Wy14643处理组(LW组)、Wy14643联合Troglitazone处理组(LWT组)。用LPS 5 mg/kg静脉注射复制大鼠ALI模型。静脉注射Wy14643 3mg/kg(LW组)或顺序注入Wy14643 3mg/kg及Troglita-zone 3mg/kg(LWT组),30min后静脉注射LPS(注射LPS完毕后开始计时)。分别在1、2、4及8h时处死大鼠,测定用药前后各时相点大鼠肺组织湿/干质量比(W/D);观察肺组织病理变化;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各时相点肺组织中PPAR-αmRNA的表达;采用免疫组织化学染色法检测各时相点肺组织中PPAR-α蛋白的表达。结果LD组大鼠肺组织干湿质量比值(W/D值)较ND组明显升高(P<0.05);LW组、LWT组的W/D比值均较LD组明显降低(P<0.05),LWT组和LW组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结果显示,正常肺组织有PPAR-α表达,为棕黄色粗颗粒,主要表达在肺泡上皮细胞核内,胞浆未表达或有少许表达;LD组较ND组PPAR-α表达减弱(P<0.05);LW组和LWT组PPAR-α表达较LD组增强(P<0.05);LW组与LWT组比较无显著差别。结论LPS引起急性肺损伤大鼠肺组织PPAR-α表达下降,Wy14643使PPAR-α表达增强,Wy14643联合Troglitazone同样使PPAR-α表达增强,但与单用Wy14643比较无差别。